免疫组化具体操作步骤
免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。 一、免疫组化操作 1、石蜡切片脱蜡至水。 2、3%H 2 O 2 室温孵育 5-10 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。 3、蒸馏水冲洗, PBS 浸泡 5 分钟 x2 【如需抗原修复,可在此步后进行, 抗原热修复 (1)高压热修复 在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0)。盖上不锈钢高压锅的盖子,但不进行锁定。将玻片置于金属染色架上,缓慢加压,使玻片在缓冲液中浸泡5分钟,然后将盖子锁定,小阀门将会升起......阅读全文
融合蛋白技术的具体操作步骤
1、进行目的基因的克隆:根据基因序列互补原则,设计合适的引物序列,以cDNA为模板,利用PCR技术扩增不同的目的DNA片段。2、在载体中进行重组:通过限制内切酶将两个DNA片段进行酶切并回收,然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接,并克隆到高表达质粒载体中,构建重组质粒。3、
水准仪的具体操作步骤
水准仪的使用包括:水准仪的安置、粗平、瞄准、精平、读数五个步骤。1. 安置 安置是将仪器安装在可以伸缩的三脚架上并置于两观测点之间。 先打开三脚架并使高度适中,用目估法使架头大致水平并检查脚架是否牢固,然后打开仪器箱,用连接螺旋将水准仪器连接在三脚架上。2. 粗平 粗平是使仪器的视线粗略水平,利用脚
橡胶拉伸试验的具体操作步骤:
橡胶拉伸试验的具体操作步骤:1、先将橡胶试样安装到夹具上,设置好拉伸为速度500mm/min。2、点击开始试验,在做拉伸试验时用标尺跟踪试样工作标线。3、根据试验要求,记录拉伸至规定伸长率时负荷、橡胶拉断时的大负荷及拉断伸长率、拉断所需时间并记录伸长率曲线。4、当试件断裂后计量变形值,精度为0.5m
石蜡切片免疫组化实验步骤
脱蜡和水化1. 将切片依次浸入二甲苯Ⅰ10 min,二甲苯Ⅱ(10 min)。2. 再次浸入无水乙醇Ⅰ(5 min)-无水乙醇Ⅱ(5 min)-95%酒精(5 min)-80%酒精(5 min)-70%酒精(5 min),然后去离子水冲洗2次,每次2 min。 抗原修复 (可选)3. 将组织切片放入
石蜡切片免疫组化染色步骤
1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:1.1
免疫组化(LP法)操作步骤
1.切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2.缓冲液洗3min/2次。 3.为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在Hydrogen Peroxide Block中孵育10-15分钟。 4.缓冲液洗5min/2次。 5.滴加UltraVBlock,在室温下
免疫组化的具体步骤
免疫组化操作步骤一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗
免疫组化(SP法)操作步骤
免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ul
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
免疫组化实验原理和步骤
实验原理: 抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原
全自动量热仪具体操作步骤
。根据量热仪型号不同,操作细节稍有不同。如还是不了解的地方可以:1、打开量热仪、打印机、显示器及主机电源开关。2、在电脑上打开测试程序。3、输入量热仪系统密码,然后确定进入测试程序界面。4、称(1±0.1)g空气干燥基煤样,将试样装入坩埚,将坩埚装入氧弹的坩埚架上,装好点火丝(长度约10mm),将点
全自动量热仪具体操作步骤
1、打开量热仪、打印机、显示器及主机电源开关。2、在电脑上打开测试程序。3、输入量热仪系统密码,然后确定进入测试程序界面。4、称(1±0.1)g空气干燥基煤样,将试样装入坩埚,将坩埚装入氧弹的坩埚架上,装好点火丝(长度约10mm),将点火丝小心置于煤样中,往氧弹中加入10ml蒸馏水,小心拧紧氧弹,应
离子色谱仪具体操作步骤
操作步骤 : 1、打开钢瓶气源开关,分压表调到0.2-0.3(建议不关闭钢瓶气源); 2、调节减压阀到3-6Psi左右; 3、依次打开SP泵、EG淋洗液自动发生器、DC色谱单元、AS自动进样器和VWD的电源开关。 4、如仪器长时间不使用或更换淋洗液后,要先打开平衡泵头上的PRIME阀排
淬冷膨胀测试软件具体操作步骤
测试软件具体操作(以下各步均以仪器准备就绪为前提):1、系统补偿值测试(界面如图2):此功能主要用于对仪器误差的校正,因为仪器在实验升温的过程中,试样架、位移顶杆本身在温度作用下也会产生定的位移,造成实验过程中的位移误差,本软件该功能的实现就是用于解决此问题。具体操作如下:1) 启动测试软件,进入测
精密露点仪的具体操作步骤
精密露点仪的具体操作步骤精密露点仪又称为露点仪、微水仪、SF6微水仪、智能微水仪、SF6气体微水仪、SF6精密露点仪等,是低露点且需要控制干点的工业环境的理想选择。1、先打开电源,仪器行自校,自校结束进入测量状态.2、仪器自校的同时,把本仪器配套的测试管道与所要测量开关的开关接头连接好,再把开关接头
耐压测试仪的具体操作步骤
耐压测试是指对各种电器装置、绝缘材料和绝缘结构的耐受电压能力进行的测试。在不破坏绝缘材料性能的情况下,对绝缘材料或绝缘结构施加高电压的过程称为耐压试验。一般来讲,耐压测试主要目的是检查绝缘耐受工作电压或过电压的能力,进而检验产品设备的绝缘性能是否符合安全标准。耐压测试仪耐压测试的基本原理:把一个高于
离子色谱仪具体操作步骤
操作步骤 :1、打开钢瓶气源开关,分压表调到0.2-0.3(建议不关闭钢瓶气源);2、调节减压阀到3-6Psi左右;3、依次打开SP泵、EG淋洗液自动发生器、DC色谱单元、AS自动进样器和VWD紫外检测器的电源开关。4、如仪器长时间不使用或更换淋洗液后,要先打开平衡泵头上的PRIME阀排气。5、打开
瓷珠保存管保存具体操作步骤
第一步:对需要保存的菌株进行必要的纯化,挑取生长旺盛时期的菌落,接入菌株。保藏管中,通常需要接入4-7环,对于苛养菌应多接一些。第二步:拧上盖子,充分剧烈震荡。第三步:用无菌吸管将溶液吸走,尽可能吸干.第四步:马上放入冰箱中,温度越低越有利于保存(推荐使用-70℃超低温冰箱)。第五步:复苏时,只需将
离子色谱仪具体操作步骤
操作步骤 :1、打开钢瓶气源开关,分压表调到0.2-0.3(建议不关闭钢瓶气源);2、调节减压阀到3-6Psi左右;3、依次打开SP泵、EG淋洗液自动发生器、DC色谱单元、AS自动进样器和VWD紫外检测器的电源开关。4、如仪器长时间不使用或更换淋洗液后,要先打开平衡泵头上的PRIME阀排气。5、打开
灰分测定法的具体操作步骤
样品的炭化样品应先用小火在电炉上炭化, 并将坩埚盖半盖坩埚, 以便氧气进入和二氧化碳、水汽等逸出, 避免易燃样品炭化过程中碳粒溅出。样品产生大量浓烟后, 再转为大火烧至试样完全炭化, 关火, 温度下降后, 再移入马弗炉内。若样品不经炭化过程, 直接灰化易使样品发生熔融, 造成灰化不彻底。样品在高温下
直流高压发生器具体操作步骤
直流高压发生器是根据新的中国电力行业标准DL/T848.1-2004《直流高压发生器通用技术条件》设计制造的新一代便携式直流高压发生器。主要适用于电力部门、工矿、冶金、钢铁等企业动力部门对氧化锌避雷器、电力电缆、变压器、发电机等高压电气设备进行直流耐压试验。操作步骤:1、试验器在使用前应检查其完好性
光泽度仪的具体操作步骤
1、将仪器开关置于“OFF”的位置,取出电池盖板,按照性装上四节镍镉电池,然后压上电池盖板。2、将仪器介面拔盘拔到黑色标准板数值,拔盘共有三位,*位代表十位,第二位代表个位,第三位代表小数点后一位。若标准块数值为93.3,则拔盘拔到“933”。3、打开电源开关,置于“ON”位置,此时液晶显示小数点“
比色皿校正的具体操作步骤
在测量时如对比色皿有怀疑,自行检测及方法如下:1、可将波长选择置实际使用的波长上,将一套比色皿都注入蒸馏水,将其中一只的透射比调至100%处,测量其他各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。2、比色前将各个比色皿中装入蒸馏水,在比色波长下进行比较,误差在±0.001吸光度以内的比色皿
比色皿校正的具体操作步骤
在测量时如对比色皿有怀疑,自行检测及方法如下:1、可将波长选择置实际使用的波长上,将一套比色皿都注入蒸馏水,将其中一只的透射比调至100%处,测量其他各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。2、比色前将各个比色皿中装入蒸馏水,在比色波长下进行比较,误差在±0.001吸光度以内的比色皿
免疫组化实验原理和步骤(一)
实验原理:抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部
免疫组化实验原理和步骤(二)
免疫组化问题解答1、染色过强 a 抗体浓度过高戒孵育时间过长 。降低抗体滴度、抗体孵育时间:室温1小时、或4度过夜 b 孵育温度过高超过37度。 一般在室温20-28度 c DAB显色时间过长戒浓度过高 显色时间不超过5-12分钟,以显微镜下观察为准。2、非特异性背景染色a 操作过程中冲洗不充分 :
免疫组化实验原理和步骤(三)
免疫组化技术的关键问题1.组织处理恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素,在组织细胞材料准备过程中,不仅要求保持组织细胞形态完整,更要保持组织细胞的抗原性不受损戒弥漫,防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织,抗原已经丢失,即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术,也很难检出所
免疫组化实验原理和步骤(四)
免疫组化染色注意事项免疫组化染色方法已不是什么很难的问题,操作步骤简单也易掌握,但要染好免疫组化,其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事,但最基本的应从以下方面加以注意:(1)去除内源酶及内源性生物素一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织,其中自身含有一定量的内源酶和内源性