知识分享:WesternBlot实验方法及注意事项

实验原理: WesternBlot印迹方法,又称为免疫印记,是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对不同分子量的蛋白质进行分离,并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物(NC膜或PVDF膜)上,用抗靶蛋白的非标记抗体(一抗)与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合,再与经辣根过氧化物酶标记(偶联)的二抗结合,最后用ECL超敏发光液试剂检测。如果转印膜上含有靶蛋白,经X光片曝光、显影后,则会在X-光片上出现特异性蛋白条带。 实验材料: 分离胶及积层胶溶液 、水饱和异丁醇 、1×Tris・Cl/SDS,pH8.8 、蛋白质分子量标准混合物 、1×SDS电泳缓冲液 、电泳装置及夹子、玻璃板、灌胶支架、缓冲液槽等附件 、0.75mm封边垫片 、0.75mm样品梳子 、50μl微量加样器 、恒流电源 常用试剂: 1)30%丙烯酰胺/0.8% N,N’-亚甲丙烯酰胺 将30克丙烯酰......阅读全文

氨逃逸监测系统知识分享丨怎么制取氨气?

怎么制取氨气?实验室制法:1.用氮化物制取氨气可以用氮化物与水反应或者叠氮化物分解。如:Li3N + 3H2O = 3LiOH + NH3↑2.加热浓氨水反应原理:NH3·H2O =△= NH3↑+H2O。这种方法一般用于实验室快速制氨气。装置:烧瓶,酒精灯,铁架台,橡胶塞,导管等。注意事项:加热浓

最全面的二极管知识分享

二极管由管芯、管壳和两个电极构成。管芯就是一个PN结,在PN结的两端各引出一个引线,并用塑料、玻璃或金属材料作为封装外壳,就构成了晶体二极管,如下图所示。P区的引出的电极称为正极或阳极,N区的引出的电极称为负极或阴极。二极管的伏安特性半导体二极管的核心是PN结,它的特性就是PN结的特性——单

分享||原子吸收注意事项

  原子吸收常见问题处理  1、为啥原子吸收仪器的灵敏度会突然下降了一半?  通常原子吸收分光光度计灵敏度下降的原因有:  A、元素灯能量下降,低于原始能量得2/3;  B、雾化器故障,雾化效果不好;  C、燃烧头污染;  D、检测器故障,多半是老化(但这种现象很少);  E、样品吸收管路堵塞(这种

分享丨几种菌种的保存及复苏方法!

定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下:1.培养基制备1.1器皿准备培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸

气体稀释仪的性能特点及操作注意事项分享

  气体稀释仪根据质量流量混合法,通过程序控制、实现全自动智能数字化配气仪.其所有核心部件质量可靠、是一种高精度、高分辨率的气体稀释系统。使用多个质量流量控制器准确控制流量,可动态稀释高浓度气体标准样品至所需低浓度样品,也可单独控制每路输出流量。主要应用于气体分析仪、报警器等检定校准,以及环境保护、

八臂迷宫实验方法及注意事项

一、实验概述八臂迷宫(radial arm maze)实验是最为常用的评价动物学习记忆能力的模型之一,由Olton等人于20世纪70年代中期建立。其基本依据是,控制进食的动物受食物的驱使对迷宫各臂进行探究,经过一定时间的训练,动物可记住食物在迷宫中的空间位置。该方法可同时测定动物的工作记忆(work

实验室的经验分享

  化学是一门以实验为基础的自然科学,每个学化工的小伙伴都在实验室渡过了无数个劳碌的不眠夜,学生时代泡在实验室似乎是大家的共同经历,有的毕业后改了行,有的还继续奋斗在每个实验室中,回忆起当年的点点滴滴,会不由自主地笑起来。在实验室里有合成成功时的喜悦,有与师兄师姐聊不完的话题,有与导师探讨实验过程设

定量PCR实验技术分享1

1.  如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决没有 ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此zui好能够把ct值往前移。 解决办法可以

WesternBlot有很多杂带原因分析

1)目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小2) 样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作3)杂蛋白多,建议处理目的蛋白4)抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体5)抗体孵育

最全的液相色谱柱知识分享和选择技巧

现代高效液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。色谱柱参数物理性质柱长,内径,如250*4.6mm。一般柱长在

最全面的万用表知识分享(二)

5、万用表的使用方法1、使用前应熟悉万用表各项功能,根据被测量的对象,正确选用档位、量程及表笔插孔。2、在对被测数据大小不明时,应先将量程开关,置于最大值,而后由大量程往小量程档处切换,使仪表指针指示在满刻度的1/2以上处即可。3、测量电阻时,在选择了适当倍率档后,将两表笔相碰使指针指在零位

最全面的万用表知识分享(一)

万用表是电子爱好者最常用的测量仪器之一,是一种集成多种常用电学测量功能的仪器。如今不少万用表都向智能化方向发展,市面上的万用表种类、功能都较多,如何选择一款适合自己的万用表?万用表如何使用?你所关心的万用表知识,下面详细介绍。1、什么是万用表万用表又称为复用表、多用表、三用表、繁用表等,是电

最全的液相色谱柱知识分享和选择技巧

现代高效液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。  色谱柱参数  物理性质  柱长,内径,如250*4.6mm

知识分享:PCR仪的原理、分类、常见问题汇总!

  一、PCR的基本原理  聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)PCR反应过程与细胞内的DNA复制相似,但PCR的反应体系要简单的多,主要包括DNA靶序列、引物、4种单核苷酸dNTP、耐热DNA聚合酶以及合适的缓冲液体系。  PCR反应过程有以下3个步骤:1、变性

分享数显调速多用振荡器基础知识

   数显调速多用振荡器是同类产品中技术较先进和质量可靠的产品,运行平稳,噪音小,振荡速度可无级调节,调节范围宽,弹簧万用夹具,可配多种烧瓶,满足不同客户需要,是生化、生物工程、教学、微生物及医学等行业研究和生产中的优选设备.用于医药卫生、农业、畜牧业、环保和教育行业对微生物、病毒、动植物组织细胞的

分享数显调速多用振荡器基础知识

 数显调速多用振荡器是同类产品中技术较先进和质量可靠的产品,运行平稳,噪音小,振荡速度可无级调节,调节范围宽,弹簧万用夹具,可配多种烧瓶,满足不同客户需要,是生化、生物工程、教学、微生物及医学等行业研究和生产中的优选设备.用于医药卫生、农业、畜牧业、环保和教育行业对微生物、病毒、动植物组织细胞的培养

GWJ1谷物硬度计知识点分享

     GWJ-1是谷物硬度计中的其中的一款型号,另一款GWJ-2,它们都能快速精准的测量出谷物或饲料的硬度,外形美观小巧,便携式设计,测定读数有指针/LED数显两种,用户可根据自己的实际需求选择。今天小编主要还是想和大家分享一下GWJ-1这款硬度计的相关知识点。     首先来说一下关于GWJ-

有机实验的基本知识及基本操作

   1.安全知识   有机溶剂大都易燃,如乙醇、丙酮、苯等,特别是乙醚。常用气体如氢气、乙炔等也易燃易爆。常用药品如浓硫酸、浓硝酸、浓盐酸、烧碱及溴等有腐蚀性。有毒药品也不少,如氰化钠、硝基苯和某些有机磷化合物等。因此应十分注意安全操作。  引起火灾有两个条件:  (

Westernblot成像中得到完美荧光印迹方法湿膜快速转干膜

   Westernblot荧光印迹膜成像:干膜or湿膜 ?   干膜,还是湿膜成像:这是一个问题。   经过漫长的一天实验做荧光蛋白印迹,首先成像,以便可以看到实验成果。 这项工作流程没有任何问题,但这可能无法生成最佳图像。 如果您正在进行定性实验或具有高丰度的蛋白,那么对膜进行成像是很好的。

Westernblot成像中得到完美荧光印迹的方法:湿膜快速转...

Westernblot成像中得到完美荧光印迹的方法:湿膜快速转干膜Westernblot荧光印迹膜成像:干膜or湿膜 ?干膜,还是湿膜成像:这是一个问题。经过漫长的一天实验做荧光蛋白印迹,首先成像,以便可以看到实验成果。 这项工作流程没有任何问题,但这可能无法生成最佳图像。 如果您正在进行定性实

干燥剂知识及试剂干燥方法

  有机物干燥的方法大致有物理方法(不加干燥剂)和化学方法(加入干燥剂)两种。  物理方法如吸收、分馏等,近年来应用分子筛来脱水,在实验室中常用化学干燥法,其特点是在有机液体中加入干燥剂,干燥剂与水起化学反应(例如Na+H2O→NaOH+H2↑)或同水结合生成水化物,从而除去有机液体所含的水分,达到

【分享】荧光酶标仪使用注意事项

  荧光酶标仪是用来进行荧光的检测.通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器。荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例。荧光检测灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样,但是容易受外界干扰,激发光与发射光容易互相影响,干扰检测。 

实验室Western-Blot荧光实验干货分享

听说隔壁实验室买了一台新成像,可以做Western Blot荧光扫描式Azure Sapphire成像,效果很好,操作也简单,小师妹一脸羡慕,问了句,我从来没做过荧光实验,现在期刊杂志要求也在升级,也建议使用荧光的方法,之前因为没有合适的仪器,所以不能尝试,现在可以准备我的实验了,那从化学到荧光

实验室Western-Blot荧光实验干货分享

  听说隔壁实验室买了一台新成像,可以做Western Blot荧光扫描式Azure Sapphire成像,效果很好,操作也简单,小师妹一脸羡慕,问了句,我从来没做过荧光实验,现在期刊杂志要求也在升级,也建议使用荧光的方法,之前因为没有合适的仪器,所以不能尝试,现在可以准备我的实验了,那从化学到荧光

电导率仪的测量原理及使用注意事项分享

电导率是以数字表示溶液传导电流的能力。水的电导率与其所含无机酸、碱、盐的量有一定的关系,当它们的浓度较低时,电导率随着浓度的增大而增加,因此,该指标常用于推测水中离子的总浓度或含盐量。电导率仪是指以电化学测量方法测定电解质溶液的电导的仪器。电导率仪的测量原理是将两块平行的极板,放到被测溶液中,在极板

【知识分享】关于柴油的十六烷值,你知道多少?

  十六烷值就是表示柴油在柴油机中燃烧时的自燃性指标。加油站标注的柴油标号只表明了柴油的抗凝固性能。而真正影响燃烧性能的主要是柴油的十六烷值。它和汽油的辛烷值有些相似,十六烷值越高,柴油的燃烧性能越好,越不容易产生爆震等不正常燃烧现象。一般来说,适合轿车使用的轻柴油,其十六烷值不应低于45。但目前国

【知识分享】气相色谱温度怎么设定,你get到了吗?

  柱温的重要性   柱箱和色谱柱是气相色谱柱系统的重要组成部分。柱温,即色谱柱温度(或柱温箱温度),是气相色谱的三个重要温度(气化室温度、柱温箱温度和检测器温度)之一,也是最重要的一个温度。   色谱柱温度,不仅影响色谱过程的热力学因素,也影响传质过程的动力学因素。柱温变化,不仅影响柱前端压力、载

与您分享内毒素挑战实验

  对生物过滤器的挑战实验是向带正电的过滤器进水中不断注入高含量的内毒素,然后采用鲎变形细胞溶解物试验(动态浊度法)测量产水中的内毒素浓度。   大多数的内毒素挑战实验均要使用净化的LPS。 ELGA LabWater的科研团队从纯水中已有的细菌中生产出自己的LPS。 这是为了模仿逼真的挑战实验环

普通PCR原理及应用分享

普通 PCR 原理及应用分享

【分享】蛋白纯化的方法选择

  随着分子生物学的发展,越来越多的科研人员熟练掌握了分子生物学的各种试验技术,并研制成套试剂盒,使基因克隆表达变得越来越容易。但分子生物学的上游工作往往并非是最终目的,分子克隆与表达的关键是要拿到纯的表达产物,以研究其生物学作用,或者大量生产出可用于疾病治疗的生物制品。相对与上游工作来说,分子克隆