知识分享：WesternBlot实验方法及注意事项
实验原理： WesternBlot印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合，再与经辣根过氧化物酶标记（偶联）的二抗结合，最后用ECL超敏发光液试剂检测。如果转印膜上含有靶蛋白，经X光片曝光、显影后，则会在X-光片上出现特异性蛋白条带。 实验材料： 分离胶及积层胶溶液 、水饱和异丁醇 、1×Tris・Cl/SDS,pH8.8 、蛋白质分子量标准混合物 、1×SDS电泳缓冲液 、电泳装置及夹子、玻璃板、灌胶支架、缓冲液槽等附件 、0.75mm封边垫片 、0.75mm样品梳子 、50μl微量加样器 、恒流电源 常用试剂： 1）30%丙烯酰胺/0.8% N,N’-亚甲丙烯酰胺 将30克丙烯酰......阅读全文
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数； g.定标板的光
知识分享：光遗传学技术
光遗传学（optogenetics）又称光刺激基因工程（optical stimulation plus genetic engineering），是一种通过光学和遗传学技术在活体动物脑内精准控制细胞行为的技术。由于其高度的时空特异性，光遗传技术广泛应用于神经科学领域的研究。 2010
知识分享：Teton表达调控系统
1992年Goseen等人成功的利用原核基因调控元件构建了四环素（tetracycline,Tet）真核细胞基因调控表达系统。目前，此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。 1、四环素调控表达系统的基本原理 Tet调控表达系统通过诱导药物（如Tet）改变调控蛋白的构
知识分享：变性梯度凝胶电泳
实验原理 DNA 双链分子在全长不断增加温度或用化学变性剂条件处理下，两条链就会开始分开（即解链）。首先解链的区域由解链温度较低的碱基组成。GC碱基对比AT碱基对结合得要牢固，因此GC含量高的区域具有较高的解链温度。同时影响解链温度的因素还有相邻碱基间的吸引力。解链温度低的区域，通常位于端
知识分享：细胞自噬研究详解
一、自噬简介 1、大自噬（macroautophagy），也就是通常说的自噬（autophagy），是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分（细胞器、蛋白等）被双层膜的囊泡包裹，形成自噬体（autophagosome），进而传递到溶酶体进行降解的过程。 详
什么是Westernblot法？
Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。
Westernblot法的应用
Westernblot法应用分子生物学、生物化学和免疫遗传学中时常会用到的一种实验方法,并且是一种能对蛋白进行定性和半定量的分析方法。是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,并且通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。蛋白质分析中应用的
Westernblot的基本流程
1.蛋白处理：此步骤是关键，蛋白处理的好否决定结果好坏。取细胞，3000rpm 3min离心，加入含蛋白酶抑制剂（现做现加）的细胞裂解液(本实验室选择RIPA，1×106/L细胞对应100ul)，枪尖反复吹吸裂解细胞（此步非常重要，容易出现鼻涕样的液体，此为裂解不充分的缘故，所以应反复吹打或者置
Fevik分享实验室冻干机分类及功能
冻干机，按规格划分，可分为实验室冻干机、中试型冻干机、生产型冻干机。而实验室冻干机顾名思义就是用于样品实验、少量冻干的一种小型冻干机设备。实验室冻干机发展至今，其种类也逐渐增多。按其功能划分，可分为：普通型冻干机、压盖型冻干机、多歧管普通型冻干机、多歧管压盖型冻干机、T型架冻干机、原位型冻干机。①普
冷凝集实验知识及操作步骤
一、概念与临床意义冷凝集实验主要用于由肺炎支原体引起的原发性非典型性肺炎的辅助诊断。参考值：凝集价≤1：32；临床意义：由肺炎支原体感染引起的原发性非典型性肺炎患者的血清中常含有较高的寒冷红细胞凝集素，简称冷凝集素，它能与患者自身红细胞或“O”型人红细胞于4℃条件下发生凝集，在37℃时又呈可逆性完全
知识分享：维真腺病毒系统产品手册
产品说明书 本产品仅限用于研究，严禁用于疾病诊断。 本产品仅供购买方内部研究使用，未经维真生物公司书面许可，严禁转售。 产品有限责任担保 维真生物公司保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了维真生物公司更换产品的责任。维真生物公司不提供其他任何形式的对于产品商业或健康用途的保证
关于工业内窥镜应用领域知识分享
工业内窥镜随着科学技术的不断发展，在各行业应用的频率越来越高，根据技术及应用范围的不同分为电子工业内窥镜、管道内窥镜、工业电子内窥镜等，下面给大家具体讲一讲工业内窥镜的应用领域。 一、发电厂 用于核电站、风力电厂、水力发电厂、火力电厂以及电力建设单位的设备检测, 如对涡轮机、管道、
分享水浴振荡器的基础知识
水浴恒温振荡器采用电磁振荡原理，类似电磁炉原理，是通过电子线路板组成部分产生交变磁场、不锈钢材质容器即切割交变磁力线而产生交变的电流（即涡流），涡流使容器壁铁分子高速无规则运动，分子互相碰撞、摩擦而产生热能，同时由于涡流存在，水分子受电磁力作用，带动玻璃容器内液体运动，达到震荡的效果。水浴恒温振荡器
专家由知网谈如何走出知识分享困境
学者胜诉中国知网，在学术圈如一石激起千层浪。 从关注案件本身，到探讨作者、期刊、数据库平台三者的责权利关系，本报对此作了连续报道。在信息爆炸、技术手段越来越发达的今天，知识分享却面临“困境”：高水平学术资源付费过高，能免费的资源质量又过低。对此，多名专家建议，由政府主导建设国家知识资源数据
专家由知网谈如何走出知识分享困境
学者胜诉中国知网，在学术圈如一石激起千层浪。 从关注案件本身，到探讨作者、期刊、数据库平台三者的责权利关系，本报对此作了连续报道。在信息爆炸、技术手段越来越发达的今天，知识分享却面临“困境”：高水平学术资源付费过高，能免费的资源质量又过低。对此，多名专家建议，由政
知识分享：PLMPuromycin试剂说明书
一、产品概述： 产品名称: PLM-Puromycin 试剂 产品货号：FH880802 规格：100μl（标准规格） 浓度：1ug/ul 推荐使用浓度：1-10 μg/ml 有效期至： 二、产品原理： PLM-Puromycin试剂是一种由
专家由知网谈如何走出知识分享困境
学者胜诉中国知网，在学术圈如一石激起千层浪。从关注案件本身，到探讨作者、期刊、数据库平台三者的责权利关系，本报对此作了连续报道。在信息爆炸、技术手段越来越发达的今天，知识分享却面临“困境”：高水平学术资源付费过高，能免费的资源质量又过低。对此，多名专家建议，由政府主导建设国家知识资源数据库，解决知识
知识分享：维真稳转株构建流程
稳转株即稳定表达细胞株，指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法，具有高效整合、目标细胞广泛等特点。 一．准备及预实验 确定细胞系相关信息，需包括如下内容 目标细胞系培养条件 目标细胞增殖速度 支原体污染情况
塑料拉力拉伸测试标准及测试方法分享
一)拉力拉伸实验目的塑料拉力拉伸测试标准及测试方法分享，掌握塑料拉伸试验方法，了解塑料拉伸试验机的基本结构和工作原理，并通过试样的拉伸应力—应变曲线和各试验数据来分析该材料的静态拉伸力学性能，对其拉伸强度、屈服强度、断裂伸长率和弹性模量作出评价。 (二)拉力拉伸实验原理在规定的试验温度、湿度与拉伸速
克尔效应实验的方法及注意事项
方法1.放入克尔盒，并转动至消光位置；2.接通克尔盒的偏转电源，即可观察到屏幕上有光亮。改变两极板之间的电压，可以观察到屏幕上的光强会随之变化；3.保持两极板之间的电压不变，旋转克尔盒，同样可以观察到屏幕上光强变化。注意事项内盛某种液体（如硝基苯）的玻璃盒子称为克尔盒，盒内装有平行板电容器，加电压后
定量PCR实验技术分享
1. 如果扩增曲线ct值比较靠后的话，32左右，一般有什么方法解决？ ct值比较靠后，对实验有一定的影响，因为经过那么多次的循环，酶的活性有可能有所下降，这时候扩增效率会有所改变（而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值）。因此最好能够把ct值往前移。 解决办法可以将模
ChIP实验技术经验分享
染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation，简称ChIP）是研究活体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。随着对基因功能研究的不断深入，这项技术正越来越多的被应用于科研的各个领域
定量PCR实验技术分享
1. 如果扩增曲线ct值比较靠后的话，32左右，一般有什么方法解决？ct值比较靠后，对实验有一定的影响，因为经过那么多次的循环，酶的活性有可能有所下降，这时候扩增效率会有所改变（而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值）。因此最好能够把ct值往前移。解决办法可以将模板加以浓
ChIP实验技术经验分享
染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation，简称ChIP）是研究活体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。随着对基因功能研究的不断深入，这项技术正越来越多的被应用于科研的各个领域。
氨逃逸监测系统知识分享丨怎么制取氨气？
怎么制取氨气？实验室制法：1.用氮化物制取氨气可以用氮化物与水反应或者叠氮化物分解。如：Li3N + 3H2O = 3LiOH + NH3↑2.加热浓氨水反应原理：NH3·H2O =△= NH3↑+H2O。这种方法一般用于实验室快速制氨气。装置：烧瓶，酒精灯，铁架台，橡胶塞，导管等。注意事项：加热浓
最新液相色谱柱知识分享和选择技巧
现代高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多，不同类型的色谱柱分离对象不同，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。色谱柱参数 物理性质：柱长，内径，如250*4.6mm。一般
知识分享：动物细胞基因组DNA提取
实验原理 真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，制备DNA将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，同时保持DNA分子的完整。提取DNA的过程是指将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉
最全面的二极管知识分享
二极管由管芯、管壳和两个电极构成。管芯就是一个PN结，在PN结的两端各引出一个引线，并用塑料、玻璃或金属材料作为封装外壳，就构成了晶体二极管，如下图所示。P区的引出的电极称为正极或阳极，N区的引出的电极称为负极或阴极。二极管的伏安特性半导体二极管的核心是PN结，它的特性就是PN结的特性——单
知识分享：去泛素化酶（DUBs）家族专题介绍
去泛素化酶（DUBs）,是一类数量很大的蛋白酶类家族。它主要通过水解泛素羧基末端的酯键、肽键或异肽键，将泛素分子特异性的从链接有泛素的蛋白质或者前体蛋白水解下来。人类基因组编码近100种去泛素酶，使得它们成为泛素系统酶中最大家族。在人类中的去泛素化酶基因，可分为两大类：半胱氨酸蛋白酶家族和金属蛋
知识分享：教你辨析标记基因和报告基因
一、标记基因和报告基因的概念 标记基因(marker gene)，是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。标记基因是选择标记基因的简称，是指其编码产物能够使转化的细胞、组织具有对抗生素等的抗性，或者使转化细胞、组织具有代谢的优越性。在培养基中加入抗生素等选择试剂的条件