HLA抗原的检测(一)
(一)HLA-A、B、C抗原的检测 HLA-A、B、C抗原可用血清学方法鉴定,故又称SD抗原(serologically defined antigen),常采用微量淋巴细胞毒性试验(microlymphocytotoxicity test),又称补体依赖细胞毒试验(complement dependent cytotoxicity,CDC)。基本步骤是分离纯化外周血中的淋巴细胞,加一组已知HLA抗血清,20℃60分钏后,再加家兔补体,37℃ 60分钏后加台盼兰染色观察结果,如淋巴细胞染成兰色则为阳性,表明待检淋巴细胞表面具有与已知抗血清相应的抗原。也可用51Cr标记的细胞毒试验。 (二)HLA-DR、DQ抗原的检测 HLA-DR、DQ抗原检测的基本方法是采用微量淋巴细胞毒性试验。先从待检者外周血中分离纯B细胞,阳性血清可来自经产妇,但需用血小板吸收以除去抗HLA-A、B、C抗体。标准抗血清的......阅读全文
临床化学检查方法介绍HLA定型介绍
HLA定型介绍: HLA即人类白细胞抗原(Human leucocyteantigen),是人类的组织相容性系统。这是一组广泛分布于人体有核细胞表面的抗原,受控于人类第6号染色体短臂。HLA基因位点至少有五个,即HLA-A、B、C、D和DR位点。近年又确定了DP和DQ两个位点。HLA有高度多态性,
PCR扩增样本DNA的HLA基因片段
一、PCR扩增体系1. 1.0uM 引物2. 300ng待测样本基因组DNA3. 2.0U Taq多聚酶4. 200uM 各种dNTP5. 用1 X PCR缓冲液(10mM Tris-HCl,pH8.3,50mM KCl,1.5mM MgCl2,0.01%明胶)调至总体积100ul,并用50ul矿物
HLAA基因编码功能及结构描述
HLA-A属于HLA I类重链相似度。这一类分子是由重链和轻链(β-2微球蛋白)组成的异二聚体。重链锚定在膜上。I类分子通过呈现内质网腔中的肽在免疫系统中起着中心作用。几乎在所有细胞中都有表达。重链约45kDa,其基因包含8个外显子。外显子1编码先导肽,外显子2和3编码α1和α2结构域,两者结合肽,
关于抗HLADR的病理介绍
T淋巴细胞上的特异性受体或B淋巴细胞释放的免疫球蛋白,这些主要组织相容性复合体(MHC)的糖蛋白引起人们很大的兴趣。这些蛋白是由6号染色体短臂编码的。它们存在于细胞表面和体液中。在人类,1958年由J.Dausset首次描述并被称作“移植抗原”。使用“抗原”这个词是因为它们在血清学上已经被定义了
HLA定型的注意事项有哪些
临床上器官移植,除同卵双生儿,供者与受者除应ABO血型相配外,还需进行严格的HLA定型,以选择HLA相同或近似的个体。
HLAB27与脊柱关节病
脊柱关节病(SpA)属于风湿性疾病的范畴,它是以中轴、外周关节炎以及关节周围组织慢性进展性炎症为主要特点的一组疾病,主要包括强直性脊柱炎(AS)、银屑病关节炎、炎症性肠病关节炎、反应性关节炎和未分化SpA五个亚型。AS是脊柱关节病的最主要疾病,在风湿性疾病中它的发病率(0.3%左右)仅次于干燥综合征
HLAA基因编码功能及结构描述
HLA-A属于HLA I类重链相似度。这一类分子是由重链和轻链(β-2微球蛋白)组成的异二聚体。重链锚定在膜上。I类分子通过呈现内质网腔中的肽在免疫系统中起着中心作用。几乎在所有细胞中都有表达。重链约45kDa,其基因包含8个外显子。外显子1编码先导肽,外显子2和3编码α1和α2结构域,两者结合肽,
细胞株HLAA*02检测方法
方法1、抗体测定:研究对象取200μl新鲜抗凝全血,每管100μl加入流式细胞仪检测管中,再加入2ml红细胞裂解液反应12min后离心,弃上清液,磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline, PBS)洗细胞两次,其中反应管加入鼠抗人HLA-A*02抗体××μl(达科为公司),4
HLADRA的结构特点和作用
HLA-DRA是HLAⅡ类α链的一种。这种II类分子是一种由α链和β链组成的异二聚体,它们都锚定在膜中。通过呈现细胞外蛋白衍生的肽,在免疫系统中起到中心作用。Ⅱ类分子在抗原呈递细胞(APC:B淋巴细胞、树突状细胞、巨噬细胞)中表达。α链约为33-35kDa,其基因包含5个外显子。外显子1编码先导肽,
HLA定型的临床意义是什么
组织或器官移植配型选择HLA适合的供体。
简述HLA低分辨分型的内容
采用序列特异性引物扩增HLA等位基因的特异性片段,经电泳分离,根据PCR结果的反应格局具判断被测标本的HLA等位基因型,具有通量大、正确性好的特点。反映了HLA抗原水平的等位基因类型,用于骨髓、器官移植组织配型的初筛。
HLA分型的常用方法有哪些?
1.分子生物学技术: 一类是PCR为基础的基因分型,一类是以测序为基础的基因分型。2.淋巴细胞毒试验: 为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T
HLAA基因的结构特点和作用
HLA-A属于HLA I类重链相似度。这一类分子是由重链和轻链(β-2微球蛋白)组成的异二聚体。重链锚定在膜上。I类分子通过呈现内质网腔中的肽在免疫系统中起着中心作用。几乎在所有细胞中都有表达。重链约45kDa,其基因包含8个外显子。外显子1编码先导肽,外显子2和3编码α1和α2结构域,两者结合肽,
关于HLA高分辨分型的介绍
过去治疗白血病通常是通过骨髓移植进行的,由于必须在麻醉状态下抽取骨髓捐献者的部分骨髓,整个过程对捐献者产生非常大的心理压力。现随着科学进步,只需抽取若干毫升静脉血,分离出干细胞,再输入患者体内即可。首先抽取患者和捐献者的静脉血样本,提取DNA,测出各自DNA碱基的顺序,最后通过软件比对分析得出H
HLA分型的基本信息介绍
HLA(humanleucocyteantigen)复合体是人类多态性最丰富的遗传系统,定位于第6号染色体短臂6P21.31区,长3600kb。1999年已完成全部序列分析及基因定位,在此区域内共确认了224个基因座位中128个为功能性基因,其中39.8%和免疫功能相关。HLA基因根据其编码分子
HLAC的结构特点和作用
HLA-C属于HLA I类重链相似度。这一类分子是由重链和轻链(β-2微球蛋白)组成的异二聚体。重链锚定在膜上。I类分子通过呈现内质网腔中的肽在免疫系统中起着中心作用。几乎在所有细胞中都有表达。重链约45kDa,其基因包含8个外显子。外显子1编码先导肽,外显子2和3编码α1和α2结构域,两者结合肽,
概述抗HLADR的医学检查
1、分类 免疫学检查 > 自身抗体测定 2、抗-HLA-DR的测定原理 同Raji细胞免疫酶抑制法。 3、试剂 同Raji细胞免疫酶抑制法。 4、操作方法 同Raji细胞免疫酶抑制法。 5、正常值 Raji细胞免疫酶抑制法:阴性。 6、化验结果临床意义 阳性:系统性红斑狼疮
概述青少年强直性脊柱炎的发病机制
1. HLA-B27结构与角色 1968年Dr.Eric Thorsby发现HLA-B27, 1973年发现HLA-B27与AS有强烈的关联性,据统计,95%的患者具有HLA-B27抗原(即HLA-B27阳性);所有HLA-B27(+)的人,有2-10%终将发展成AS。除了HLA-B27外,
典型的强直性脊柱炎浅析(二)
病理病因 AS的病因目前尚未完全阐明,大多认为遗传、感染、免疫环境因素等有关。 1、遗传 遗传因素在AS的发病中具有重要作用。据流行病学调查,AS病人HLA-B27阳性率高达90%~96%,而 强直性脊柱炎 普通人群HLA-B27阳性率仅4%~9%;HLA-B27阳性者AS发
关于HLAB27的检测方法介绍
常规检测HLA抗原的方法为Terasaki 和McClelland提出的微量细胞毒实验。单克隆抗体和荧光素的开发使得流式细胞仪在各个领域得到空前的发展,多参数同时测定使得流式细胞术得以快速,灵敏,特异地检测某一特定细胞群中某一特异性抗原的表达。与传统方法相比,用流式细胞仪来检测HLA-B27的表
混合淋巴细胞培养的详细介绍
两个无关个体功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时,由于HLAⅡ类抗原中D和DP抗原不同,可相互刺激对方的T细胞发生增殖,此为双向混合淋巴细胞培养(two way MLC);若将其中一方的淋巴细胞先用丝裂霉素C(mytomycine C)处理或射线照射使之细胞中DNA失去复制能力,但仍能刺激另一方淋巴细
关于混合淋巴细胞培养的详细介绍
两个无关个体功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时,由于HLAⅡ类抗原中D和DP抗原不同,可相互刺激对方的T细胞发生增殖,此为双向混合淋巴细胞培养(two way MLC);若将其中一方的淋巴细胞先用丝裂霉素C(mytomycine C)处理或射线照射使之细胞中DNA失去复制能力,但仍能刺激另一方淋
关于人类白细胞抗原系统的简介
这种代表个体特异性的组织抗原称组织相容性抗原,一套这样的抗原系统称主要组织相容性系统(majorhistocompatibilitysystem,MHS)。编码MHS的基因群称为主要组织相容性复合体MHC即指某一染色体上一群紧密连锁的基因群。 人的MHC就称HLA(humanleucocyte
关于竹节脊柱的发病机制介绍
竹节脊柱的病因目前尚未完全阐明,近年来,分子模拟学说(molecularmimicry)从不同的角度全面地解释了发病的各个的环节。流行病学调查结合免疫遗传研究发现,HLA-B27在强直性脊柱炎患者中的阳性率高达90%以上,证明AS与遗传有关。大多数学者认为其与遗传、感染、免疫、环境因素等有关。
科学家发现与HIV控制相关的患者特异性抗原表位序列
1月15日,德国马普所科研人员在PNAS上发表了题为“HIV peptidome-wide association study reveals patient-specific epitope repertoires associated with HIV control”的文章,通过HIV多肽
主要组织相容性复合体的相关疾病介绍
研究发现许多疾病与某些HLA等位基因或HLA单倍型确实呈现明显的相关性。与HLA抗原相关的疾病有几个应当注意的特点:病因和病理生理机理未明,以遗传模式分布但为弱的外显率;与免疫异常相关;对生殖影响很少或没有影响。 可用群体和家系研究来证实 HLA复合体内标记基因与各种疾病状态的相关性。因为群体
分析竹节脊柱的发病原因
竹节脊柱的病因目前尚未完全阐明,大多认为遗传、感染、免疫环境因素等有关。 1、遗传遗传因素在竹节脊柱的发病中具有重要作用。据流行病学调查,AS病人HLA-B27阳性率高达90%~96%,而普通人群HLA-B27阳性率仅4%~9%;HLA-B27阳性者AS发病率约为10%~20%,而普通人群发病
抗原表位是抗原肽吗
抗原表位,又称抗原决定指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。抗原通过抗原表位与相应的淋巴细胞表面的抗原受体结合,从而激活淋巴细胞,引起免疫应答;抗原也借表位与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合而发挥免疫效应。抗原表位的性质、数目和空间构型决定抗原的特异性。抗原肽具有免疫原性的多肽或抗原衍生肽。
根据抗原的来源可将抗原分类
根据抗原的来源可将抗原分为:(1)异种抗原(xenoantigens):病原微生物、类毒素等不同种族之间的抗原;(2)同种异型抗原(9alloantigens):存在于同一种族不同个体之间的抗原,如HLA,ABO血型抗原,Rh抗原, MHC等;(3)自身抗原(autoantigens):自身成分,分
超抗原与普通抗原的区别
超抗原(super antigen,SAg)是一类只需极低浓度(≤10-9M)即可激活大量的T细胞克隆,产生极强免疫应答的物质。超抗原与普通抗原相比,不需要常规的细胞内抗原提呈,无MHC限制性。超抗原一端与APC表面的MHC-Ⅱ类分子抗原结合槽外的非多态区结合,一端与TCR的Vβ外侧区结合,通过