细胞培养相关问题及解答(一)
小牛血清和胎牛血清有何区别？应用注意事项？ 来源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛（小牛）血清（Calf serum, CS）采自出生10至14 天的小牛。 组份与比例不同：两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。 血清保存和使用须注意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时，应先将血清至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加，血清在解冻和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。 胰酶消......阅读全文
细胞培养相关问题及解答(一)
小牛血清和胎牛血清有何区别？应用注意事项？ 来源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛（小牛）血清（Calf serum, CS）采自出生10至14 天的小牛。 组份与比例不同：两者所含的促细
细胞培养常见问题解答（一）
1 冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对D
细胞培养常见问题解答（一）
1 冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对D
细胞培养常见问题与解答4
22.在High Five无血清培养基中去污剂的浓度是多少？ High Five无血清培养基中去污剂的浓度：0.025 g/L Tween-80，1.0 g/L Pluronic Poly-all。 23.High Five细胞用多大的密度冻存？ 3.0x10E6 ce
细胞培养常见问题与解答2
8.培养基中丙酮酸钠的作用是什么？丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。9.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀？GIBICO的胎牛血清 没有预老化，储存在2－8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白
细胞培养常见问题与解答3
15.如何检测内毒素(热源)水平？ LAL（Limulus Amebocyte Lysate）试验是可用的最敏感和特异的检测细菌内毒素的方法。Levin和Bang 发现细菌可引起鲎（Limulus polyphemus）血管内的凝集作用。内毒素启动一个细胞内酶原系统（丝氨酸蛋白酶级
细胞培养常见问题解答
1.如何选用特殊细胞系培养基？ 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。 2.何时须更换培养基？ 视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更
细胞培养常见问题与解答1
1.为什么要热灭活血清？加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。2.如何用台盼兰计数活细胞？用无血清培养基把细胞悬液稀释到200－2000个/毫升，在0
电极相关问题解答
电极是雷磁电化学分析仪器的重要配件，用户在购买电极后可能会出现一些不懂的问题。本站技术文员总结了几个常见问题的相关回答，以供参考！ 1、232参比电极用什么液体保存？ 答：3.3-3.8mol/L饱和氯化钾溶液 2、电导率电极绝缘差？ 答：电导电极的两个极片是隔离开的 3、0.0
ELISA相关问题在线解答
日前，有客户在网上留言咨询一些问题，我司何经理都一一解答，现在小编就带大家来看看何经理与客户的在线是问答吧。 客户：在稀释抗体中加入的蛋白稳定剂是什么？ 何经理：一般就先用一些无关蛋白，如果不行可以添加少量甘油，再不行的话则需购买专门的稳定剂了。客户：在试剂盒的研发中抗体是*重要的吗？何经理：原料
细胞培养板的选择与常见问题解答（一）
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。（1）平底和圆底（U型和V型）培养板的区别和选择：贴壁细胞一
细胞培养常见问题解答（三）
21 侦测出细胞株有支原体污染时， 该如何处理?直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株。22 CO2 培养箱之水盘如何保持清洁?定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。23 为何培养基保存于4 °C 冰箱中，颜色会偏暗红色， 且pH值会越来越偏碱性?培养基保存于4 °C 冰箱中，
细胞培养常见问题解答（二）
16 细胞欲冷冻保存时， 细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial， 融合瘤细胞则以5x106 cells/ml vial 为宜。17 应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室
细胞培养常见问题解答（二）
11 欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞， 其离心速率一般为300xg (约1,000rpm)，5 - 10 分钟， 过高之转速， 将造成细胞死亡。12 细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生
细胞培养常见问题解答（四）
另：这里补充一下培养用品的消毒，供参考：细胞培养的最大危险是发生培养物的细菌，真菌和病毒等微生物的污染，污染主要是由于操作者的疏忽而引起，常见的原因有操作间或周围空间的不洁，培养器皿和培养液消毒不合格或不彻底，由于有关培养的每个环节的失误均能导致培养失败，故细胞培养的每个环节都应严格遵守操作常规，防
细胞培养中的各种问题解答
在培养细胞的过程中，或许你会有一系列的问题想要问。今天为大家整理了一些关于细胞的常见问题解答。一、细胞成长曲线测守时为什么要做重复孔？答：测定细胞成长曲线细胞计数时挑选 3 个复孔，每孔分别计三次，取其平均值，目的是减小操作差错。二、为什么制作的细胞成长曲线没有到达平台期？答：可能有以下原因：一是细
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答2
6、血清的有关问题：新生牛血清：新出生牛5天内取血制成小牛血清：小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清：（进口血清）要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到，经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为：（1）特级胎牛血清：40纳米过滤，内毒素含量≤10EU，血红蛋
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答1
1、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++， Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0， 温度37 ℃其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答1
1、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++， Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0， 温度37 ℃其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答2
6、血清的有关问题：新生牛血清：新出生牛5天内取血制成小牛血清：小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清：（进口血清）要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到，经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为：（1）特级胎牛血清：40纳米过滤，内毒素含量≤10EU，血红蛋
旋转蒸发仪相关问题解答
Q1：IKA旋转蒸发仪 (配置镀防爆膜玻璃组件) 可以达到的最低真空度是多少?A1：最低可达 1 mBar，在真空系统足够强劲且所有的真空连接都非常密实的情况下。 Q2：竖直型冷凝器和倾斜型冷凝器，哪种比较好?A2：对于应用要求来说两者的冷凝效果相当。这两种冷凝器的冷凝面积和冷却效率是一样的。 Q3
多肽合成的基本原理及相关问题解答
1.多肽合成的基本原理?多肽固相合成法是多肽合成化学的一个重大的突破。它的最大特点是不必纯化中间产物，合成过程可以连续进行，进而为多肽合成的自动化奠定了基础。目前全自动多肽的合成，基本都是固相合成。其基本过程如下：基于Fmoc化学合成，先将所要合成的目标多肽的C-端氨基酸的羧基以共价键形式与一个不溶
蛋白质组学相关问题与解答
1．为什么通过elisa、WB能检测到的蛋白在itraq实验中没有检测到？ 人血浆中的蛋白是有上万种的，而一般质谱只能检测到五六百种，也就是说只占了其中的百分之几，这是普遍现象，说明咱们的方法是不存在问题的；其次，ELISA/WB与质谱相对来说灵敏度不一样，前者具有放大效应，因为其间会用
PCR仪常见问题及解答
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行
western－blot常见问题及解答
常见问题及解答： 1 、两快玻璃板之间灌胶 , 胶为什么总是不平 ? 1)你的玻璃洗干净没有？应该要洗得非常干净！ 2)过硫酸铵和TEMED的加量不合适，加量相对较多，凝胶凝固过快也会胶不平，最多按照分子克隆加倍 3)加完试剂以后没有很好的摇匀，导致有些部位的聚合剂浓度过高，聚合相对较快
能力验证常见问题及解答
一、 CNAS-RL02《能力验证规则》中基本要求的相关问题 ： 申请认可时，是否必须参加能力验证？参加能力验证的最低要求是什么？ CNAS-RL02《能力验证规则》4.2.3款规定“只要存在可获得的能力验证，合格评定机构初次申请认可的每个子领域应至少参加过1次能力验证且获得满意结果（申请认
细胞培养的八个常见问题与解答(FAQ)
1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DM
微生物检测过程中的问题及解答集锦（一）
1.微生物实验过程中使用的移液枪怎么灭菌？答：移液枪用纱布包好，外面报纸包好灭菌。不能湿热灭菌的枪，在枪口处塞入少许棉花，外面采用表面灭菌的方法擦拭灭菌，里面采用热空气交换法或者洁净空气交换法处理。 2.微生物实验过程中如果移液枪枪头想要重复使用怎么办？答：枪头盒装好，报纸包好灭菌。枪头少的话放入平
关于HPLC的常见问题及解答
一、问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？答：关于漂移问题： 1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。 2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。 3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。关于快速变化问题
蠕动泵常见问题及解答
蠕动泵的原理：利用旋转的转轮滚压具有弹性的软管，软管中的流体随着转轮的旋转而移动，就象用两根手指夹挤软管一样，随着手指移动，液体随之流动。我们的泵里面用转轮和压块形成象手指一样的挤压效果。 蠕动泵的优点：高洁净无污染：液体仅接触软管，方便清洗，更换软管只需几秒钟。高效低能耗：有自吸、单向阀能力高精度