动物胸腺上皮细胞的培养
正常动物胸腺上皮细胞的培养 实验材料: 1. 胸腺上皮细胞来源;一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺; 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 有血清培养液:可使用RPMI1640培养液,添加10%胎牛血清、谷氨酰胺2mmol/L、丙酮酸钠1mmol/L、非必需氨基酸1mmol/L、2-巯基乙醇(2-ME)5×10-5 mol/L、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml(Schreiber et al.1991)。也可以DMEM作为基础培养基; 4. 化学限定性培养液:基础培养液为DMEM,添加HDL100μg/ml、转铁蛋白50μg/ml、胰岛素5μg/ml、氢化可的松2.7×10-7 mol/L、EGF 10ng/ml、硒25 ng/ml以及三碘甲腺原氨酸(T3)1×10-10mol/L(Schreiber e......阅读全文
上皮细胞类培养实验_内皮细胞培养实验
实验方法原理内皮细胞易于从血管分离进行培养成单层细胞,对研究内皮细胞再生生、肿瘤促血管生长因子(TAF)等有很大应用价值。人内皮细胞培养可应用人脐带脐静脉、动物大动脉等,用灌流消化法获取细胞最为简便。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液PBS仪器、耗材注射器离心管培养基实验步骤1. 取产后的新鲜脐
兔食管上皮细胞培养步骤
原代细胞实验材料: 1. 大兔的正常食管组织 2. 6孔培养板:用多聚赖氨酸4℃包被过夜 3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、
人肾小管上皮细胞-4100培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL人肾小管上皮细胞 4100。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿
细胞生物基本方法:上皮细胞培养
上皮细胞培养1)表皮细胞培养1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。5.
方案23.3-乳腺上皮细胞培养实验
乳腺上皮细胞培养 实验方法原理 在内源性巨噬细胞存在的条件下,将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养,并可用混合性蛋白酶螯合液传代。
方案-23.2-角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上,使其附着。然后,在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。 试剂、试剂盒 D-PBSA
动物细胞培养的培养步骤
注:所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。取离体的动物组织,器官或细胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞,配置形成细胞悬液。制备动物细胞培养液体培养基(需加入血清,保证无菌无毒),将细胞接种至培养基,放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。当细胞增殖达到一定程度,出现接触抑制现象
降低上皮细胞培养过程中的污染
实验方法原理上皮细胞易存在纤维细胞污染,其污染程度能够采用特异的中等纤维蛋百亚基波形蛋内(vimentin,作为成纤维细胞的标记)和角蛋白(作为上皮细胞的标 记)抗体进行双重免疫荧光染色。关于如何降低污染的方法前面已述及;另一种用来降低贴壁上皮细胞群屮成纤维细胞数量的方法是采用不同浓度的胰蛋白酶
降低上皮细胞培养过程中的污染
实验方法原理上皮细胞易存在纤维细胞污染,其污染程度能够采用特异的中等纤维蛋百亚基波形蛋内(vimentin,作为成纤维细胞的标记)和角蛋白(作为上皮细胞的标 记)抗体进行双重免疫荧光染色。关于如何降低污染的方法前面已述及;另一种用来降低贴壁上皮细胞群屮成纤维细胞数量的方法是采用不同浓度的胰蛋白酶化。
大鼠卵巢上皮细胞培养注意事项
大鼠卵巢上皮细胞培养注意事项:1. 收到后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承
方案23.7-胰腺上皮细胞分离及培养实验
实验方法原理 从豚鼠胰腺组织分离细胞,用纱布或尼龙网过滤细胞悬液,将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞,使呈团状的细胞分散。然后,将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。
正常晶状体上皮细胞原代培养
实验材料:1. 材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 器械:无齿显微小镊子2把、培养板和培养皿若干;4. 培养液:为含15%胎牛血清的DMEM培养液;实验方法:1. 取材1)摘取动物或人的供体
正常视网膜色素上皮细胞原代培养
实验材料:1. 材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 特殊取材器械:眼球托与7-0尼龙线。以灭菌的白色橡胶反口胶塞作为眼球托;4. 消毒液:200IU/ml的庆大
动物细胞培养的培养步骤介绍
注:所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。取离体的动物组织,器官或细胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞,配置形成细胞悬液。制备动物细胞培养液体培养基(需加入血清,保证无菌无毒),将细胞接种至培养基,放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。当细胞增殖达到一定程度,出现接触抑制现象
动物细胞培养的培养条件简介
1、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。 2、营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等) 3、血清和血浆 (提供
视网膜色素上皮细胞的分离培养法相关介绍
上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键。体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜, 因此培
动物细胞培养和动物细胞培养的区别有哪些?
1、培养基不同:植物细胞(固体培养基),动物细胞(液体培养基)。 2、培养基的成分不同:动物细胞培养必须利用动物血清,植物组织培养则不需要,而需要加入植物生长素。 3、产物不同:植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是只含同一种的细
动物、植物细胞培养
动物细胞培养与植物细胞培养和微生物细胞细胞培养相比,动物细胞培养是当中最麻烦的。它需要一些特殊的条件:⑴血清:动物细动物细胞离体培养需要要到血清,通常使用小牛血清。血清相当于动物细胞离体培养的天然营养液,为动物细胞培养提供像矿物质微量元素、脂肪和激素的生长必需因子。⑵支持物:很多动物细胞有贴壁生长的
动物细胞培养
动物细胞培养 基本练习 2.2 无菌技术I:吸取与移液 练习2 细胞培养介绍 2.2 无菌技术I:吸取与移液 练习3无菌技术II:准备培养基 练习4:单层细胞的换液 练习5:玻璃器皿的清洗和灭菌 练习
动物器官培养方法介绍
作为动物材料的器官培养法,是用血浆和胚胎抽出液(Fell等1929)或在含有胚抽出液的琼脂培养基(E.Wolff等,1952)上直接放置器官的方法,以及用含有血清和合成培养液等方法;将器官放在玻璃纸上的培养方法(Trowell,1954)等是比较先进的方法。而到21世纪使用的是其改良法和完全合成培养
人肾小管上皮细胞-4100-培养注意事项
1. 收到人肾小管上皮细胞 4100。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读人肾小管上皮细胞 4100。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出
动物所发表关于胸腺和T细胞发育调控机制的新成果
胸腺是机体的重要免疫器官,由皮质和髓质两部分组成,主要包括胸腺上皮细胞和T淋巴细胞。胸腺病变将对机体免疫功能带来严重影响,使机体免疫自稳功能紊乱并伴发自身免疫性疾病。脊椎动物的胸腺在出生后比较活跃,但从青春期开始退化,是机体中最早退化的器官。但是,目前对于胸腺发育和T淋巴细胞产生的分子机制仍不清
动物细胞培养中动物血清的相关介绍
1.储存 血清的保质期是5年,储存温度小于-10℃。 血清长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,长期保存血清必须在-10℃以下储存,并避免反复冻融。 2.解冻 将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱
动物细胞培养的应用
培养各种正常或病变的动物细胞,用于生理病理研究。培养动物细胞,用于判断和检测某些物质对于细胞的毒性大小。作为动物基因工程的受体细胞。作为皮肤或器官移植的供体细胞。
动物细胞培养的简介
在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。 ⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。 ⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
论动物细胞的灌注培养
动物细胞的培养技术自上世纪初出现以来,经历了一个多世纪的发展,获得了很大的进步。不仅建立了许多细胞系和培养了许多类型的原代细胞,而且开发了人工合成培养基和无血清培养基,并且出现了细胞工程,哺乳动物细胞的大规模培养获得了工业化的应用,用于生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药、载体病毒、病毒性疫苗等。开发了
动物细胞培养的原理
动物细胞在液体培养基上进行正常的生命活动,并发生有丝分裂进行增殖。
动物细胞培养的原理
动物细胞在液体培养基上进行正常的生命活动,并发生有丝分裂进行增殖。
动物细胞培养的要求
动物细胞培养在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
动物细胞培养的定义
动物细胞培养是从动物机体中取出相关的组织,让它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中让这些细胞生长和增殖。培养产品一般是细胞产品或细胞分泌物。