视网膜色素上皮细胞的分离培养法相关介绍

上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键。体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜, 因此培养在有胶原的底物上可能利于生长, 另外人或小鼠表皮细胞培养在以 3T3 细胞为饲养层(用射线照射后)时,细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低 PH、Ca2+含量和温度,向培养基中加入表皮生长因子,均有利于表皮细胞生长。以表皮细胞为例, 用皮肤表皮和真皮分离培养法可获得纯上皮细胞, 其法如下: 1、 取材:外科植皮或手术残余皮肤小块, 早产流产儿皮肤更好, 取角化层薄者, 切成 0.5-1 平方厘米小块。 2、置 0.02%EDTA 中,室温,5 分钟。 3、换入 0.25%胰蛋白酶中,4℃过夜。 4、分离:取出皮块,用血......阅读全文

视网膜色素上皮细胞的分离培养法相关介绍

  上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键。体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜, 因此培

正常视网膜色素上皮细胞原代培养

实验材料:1.    材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2.    清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3.    特殊取材器械:眼球托与7-0尼龙线。以灭菌的白色橡胶反口胶塞作为眼球托;4.    消毒液:200IU/ml的庆大

胰腺上皮细胞分离及培养实验

实验方法原理从豚鼠胰腺组织分离细胞,用纱布或尼龙网过滤细胞悬液,将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞,使呈团状的细胞分散。然后,将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。试剂、试剂盒F12K 组织培养液含有 20% 小牛血清HBSSHBSS-DVC葡萄糖胰蛋白酶液胰蛋白

牛角质上皮细胞的分离和培养

1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇简单处理一下。2)用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织(最好选取枝状角膜边缘组织)。3)将上述组织置于干燥的聚赖氨酸包被的表面,让其黏附全少 10 分钟。4) 加入培养液(MEM, 含 10%FCS,

牛角质上皮细胞的分离和培养

实验步骤                                                         1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇简单处理一下。2)用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织(最好选取枝状

牛角质上皮细胞的分离和培养

实验步骤1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇简单处理一下。2)用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织(最好选取枝状角膜边缘组织)。3)将上述组织置于干燥的聚赖氨酸包被的表面,让其黏附全少 10 分钟。4) 加入培养液(MEM, 含 10%

视网膜色素变性的基本介绍

  原发性视网膜色素变性(RP),也称为毯层视网膜变性,是一种进行性、遗传性、营养不良性退行性病变,主要表现为慢性进行性视野缺失,夜盲,色素性视网膜病变和视网膜电图异常,最终可导致视力下降。  2018年5月11日,国家卫生健康委员会等5部门联合制定了《第一批罕见病目录》,视网膜色素变性被收录其中。

叶绿体色素的分离(柱层析法)

原理 吸附剂如蔗糖、Al2 O3 、MgO、CaCO3 等对各种物质有不同的吸附力,吸附力的大小随吸附剂的种类而异;同一吸附剂在不同的溶剂中吸附力的大小也不同。被吸附的物质由于其结构中极性基团的种类和数量不同,吸附力也不相同。各种官能团的极性大小次序为;-CH2 -CH2 -<-CH=

原代肺泡上皮细胞的体外分离培养

1、完全无血液残留肺脏组织:2、消化肺组织:常用细胞消化酶:胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化,或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分离纯化细胞:原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法:(1)密度梯度离心法:密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同

视网膜色素变性的临床变异介绍

  (1)单眼性原发性视网膜色素变性 非常少见。诊断为本型者,必须是一眼具有原发性视网膜色素变性的典型改变,而另眼完全正常(包括电生理检查),经五年以上随访仍未发病,才能确定。此型患者多在中年发病,一般无家族史。  (2)象限性原发性视网膜色素变性 亦甚少见。特点为病变仅累及双眼同一象限,与正常区域

视网膜色素变性的功能改变介绍

  (1)夜盲 为本病最早出现的症状,常始于儿童或青少年时期,且多发生在眼底有可见改变之前。开始时轻,随年龄增生逐渐加重。  (2)暗适应检查 早期锥细胞功能尚正常,杆细胞功能下降,使杆细胞曲线终末阈值升高,造成光色间差缩小。晚期杆细胞功能丧失,锥细胞阈值亦升高,形成高位的单相曲线。  (3)视野与

牛ES细胞的分离培养相关介绍

  Saito等在加有LIF的培养基中对牛ICM进行培养,分离得到牛ES细胞并进行传代。Sims等使用与一般ES细胞分离完全不同的低密度培养法,使用BRL(buffaloratliver)条件培养基并添加亚硒酸钠、胰岛素、运铁蛋白和50mL/L胎牛血清,培养6d~10d,得到15个ES细胞系,将其作

叶绿体色素的分离纸层析法实验

叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。实验方法原理叶绿体色素中的各种色素化学结构

叶绿体色素的分离纸层析法实验

实验方法原理叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。仪器、耗材色层分析用滤纸  

叶绿体色素的分离纸层析法实验

实验方法原理 叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。仪器、耗材 色层分析用滤纸培

方案23.7-胰腺上皮细胞分离及培养实验

            实验方法原理 从豚鼠胰腺组织分离细胞,用纱布或尼龙网过滤细胞悬液,将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞,使呈团状的细胞分散。然后,将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。

膜分离法的用途相关介绍

  膜分离法的主要特点是无相变,能耗低,装置规模根据处理量的要求可大可小,而且设备简单,操作方便安全,启动快,运行可靠性高,不污染环境,投资少,用途广等优点。各种气体分离方法的规模,经济性,技术成熟程度,能耗和用途如下:  高分子分离膜是用高分子材料制成的具有选择性透过功能的半透性薄层物材料。主要有

共沉淀分离法的相关介绍

  当沉淀从溶液中析出时,溶液中的某些原本可溶的组分被沉淀剂沉淀下来,共同存在于沉淀物中的现象即为共沉淀现象。在沉淀分离、质量测定和材料制备中所得到的沉淀往往不是绝对纯净的,这对于分离和测定来说是不利的。但有时为了得到某些离子,可利用共沉淀进行分离富集,变不利为有利。共沉淀分离法就是加入某种离子同沉

细胞悬浮培养法的相关介绍

  用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法,称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同,可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面,采用静止培养的方式,适用于各种器官和组织的培养。

细胞平板培养法的相关介绍

  将制备好的单细胞悬浮液,按照一定的细胞密度,接种于适当厚度的薄层固体培养基上进行培养的方法,称为平板培养。  等量的单细胞培养液与等量熔化(30~50℃)的琼脂培养基(0.6%~1%)混合,迅速铺板于培养皿中,琼脂冷却凝固后,细胞分布均匀地被固定在薄层(厚度大约1mm)培养基中。培养皿用石蜡膜封

视网膜检影法的相关疾病

  早产儿视网膜病变,原发性开角型青光眼,眼外肌病及弱视,眼睑带状疱疹,青光眼睫状体炎综合征,钝挫伤,视网膜色素变性,斜视,先天性眼球震颤,眼球震颤阻滞综合征

叶绿体色素的提取和分离(纸层析法)

  原理   叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,可用丙酮提取。 分离色素的方法有多种,纸层析是其中最简便的一种。当溶剂不断地从层

上皮细胞的培养

上皮细胞培养 1)表皮细胞培养 1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。 2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。 3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。 4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层

乳腺上皮细胞分离培养操作步骤和注意事项

乳腺主要由腺上皮组成,早期乳汁或断奶后的乳汁含有上皮细胞团块,可用离心法收集上皮细胞(混杂有巨噬细胞),培养时常用人胚小肠纤维细胞作饲养层,可抑制间质细胞生长。使用优化培养基可使用上皮细胞传代,并形成克隆,在胶原底物上要形成三维立体的复层结构。胰岛素,氢化可的松,霍乱肠毒素,EGF可促进上皮细胞生长

乳腺上皮细胞分离培养操作步骤和注意事项

乳腺主要由腺上皮组成,早期乳汁或断奶后的乳汁含有上皮细胞团块,可用离心法收集上皮细胞(混杂有巨噬细胞),培养时常用人胚小肠纤维细胞作饲养层,可抑制间质细胞生长。使用优化培养基可使用上皮细胞传代,并形成克隆,在胶原底物上要形成三维立体的复层结构。胰岛素,氢化可的松,霍乱肠毒素,EGF可促进上皮细胞生长

薄层色谱法分离菠菜叶色素的原理

薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在移动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。   薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子

视网膜色素变性的鉴别诊断

  根据上述病史、症状、视功能及检眼镜检查所见,诊断并无太大困难。但当与一些先天生或后天性脉络膜视网膜炎症后的继发性视网膜色素变性注意鉴别。  先天性梅毒和孕妇在妊娠第3个月患风诊后引起的胎儿眼底病变,出生后眼底所见与本病几乎完全相同,ERG、视野等视功能检查结果也难以区分。只有在确定患儿父母血清梅

视网膜色素变性的病因分析

  本病为遗传性疾病。其遗传方式有常染色体隐性、显性与X性连锁隐性三种。以常染色体隐性遗传最多;显性次之;性连锁隐性遗传最小。双基因和线粒体遗传也有报道。  生物化学研究发现氨基乙磺酸缺乏可引起猫产生视网膜色素变性,氨基乙磺酸是一种含硫氨基酸,在视网膜中含量很高,有可能是一种神经介质因子,起保护作用

关于视网膜色素变性的治疗和预防的介绍

  一、治疗  1.一般血管扩张剂及视神经、视网膜营养药。  2.中医中药  主要是活血化淤、补肾明目类。  3.组织疗法及微量元素补充。  4.基因治疗  对严重的视网膜色素上皮变性已有研究。  5.手术治疗  比如肌肉移植和色素上皮移植,疗效不甚明显。对RP的并发症如白内障和青光眼的手术治疗。 

ReNeuron视网膜祖细胞治疗视网膜色素变性

  ReNeuron Group公司是细胞疗法开发领域的全球领导者,致力于利用其独特的干细胞技术开发“现成的(off-the-shelf)”干细胞疗法,而无需免疫抑制药物。该公司的先导临床候选疗法正开发用于治疗中风所致残疾以及致盲疾病视网膜色素变性(RP)。  近日,该公司在加拿大温哥华举行的第六届