彩色免疫金银染色的原理及操作步骤
实验概要本文介绍了彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)的原理及操作步骤。实验原理彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)基本原理是在IGSS法的基础上,根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的,即IGSS后,在抗原位点处生成的银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的氧化反应,将银颗粒氧化成溴化银,后者与彩色显影剂起还原反应,生成金属银,而彩色显影剂本身则被氧化,其氧化产物使彩色成色剂由五色变成有色的染料,并沉积在银颗粒的部位,金属银变成了银离子。由于染料只能通过彩色显影剂沉积在有银的部位,不会发生非特异性背景染色。实验步骤1. 石蜡切片常规脱蜡至水。2. 0.1%胰蛋白酶37℃消化20min,或抗原修复20min(98℃),自然冷却至室温。3. 0.05mol/L(pH7,4)TBS洗3×3min。4. 1%EA(卵蛋白)15min,不洗。5. 适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20......阅读全文
免疫印迹(Western-blotting)实验原理、试剂和操作步骤
(一)原理Western blot是一种在PVDF或硝酸纤维素(NC)膜上进行的抗原抗体反应。蛋白电泳后,将蛋白转移至膜上,再与特异性抗体孵育,洗去游离的抗体,然后和酶标记的二抗孵育,再进行底物显色。由于抗原抗体反应特异性好,亲合力高,Western blot检测的灵敏度较高,尤其是采用
PI单染色法原理、试剂、操作步骤和注意事项
PI单染色法原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性。PI介绍荧光染料PI(碘化丙啶)是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测,英文全称是Propidi
免疫印迹法的操作步骤及注意事项
操作步骤 一蛋白质样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,真核细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000r离心15min。取上清液作为样品。 二电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。 三转移:(半干式转移) 1、电泳结束后将胶条
免疫共沉淀(CoIP)的原理及步骤
一.原理免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋
金银花烘干机的原理的原理及工艺
金银花烘干机原理 烘干机原理:用热风炉产生的纯净热风,热风温度35℃-260℃可控,采用加热干燥和通风干燥,两种 干燥脱水方式同时进行,加强热风通风量的合理调整,多层烘干箱循环翻转,逐层烘干,充分利用热风,迅速烘干脱水,高效运行。 烘干工艺 1、提供的热风是纯净的热风,热风温度根据物品需求
笔试酸度计的工作原理及操作步骤
笔试酸度计的工作原理及操作步骤 笔试酸度计是一种常用的仪器设备,又名PH计。主要用来精密测量液体介质的酸碱度值,配上相应的离子选择电极也可以测量离子电极电位MV值,用于方便、快速测定含溶液中pH值的仪器。仪器外壳防水设计,体积小,可随身携带,随时测量,使用更方便。耗电省,精度高,测量范围广
笔试酸度计的工作原理及操作步骤
笔试酸度计的工作原理及操作步骤 笔试酸度计是一种常用的仪器设备,又名PH计。主要用来精密测量液体介质的酸碱度值,配上相应的离子选择电极也可以测量离子电极电位MV值,用于方便、快速测定含溶液中pH值的仪器。仪器外壳防水设计,体积小,可随身携带,随时测量,使用更方便。耗电省,精度高,测量范围广
笔试酸度计的工作原理及操作步骤
笔试酸度计的工作原理及操作步骤 笔试酸度计是一种常用的仪器设备,又名PH计。主要用来精密测量液体介质的酸碱度值,配上相应的离子选择电极也可以测量离子电极电位MV值,用于方便、快速测定含溶液中pH值的仪器。仪器外壳防水设计,体积小,可随身携带,随时测量,使用更方便。耗电省,精度高,测量范围广
牛结核病的检验原理及操作步骤
(一)试验原理机体受到结核杆菌刺激时,导致T淋巴细胞转变为淋巴母细胞,并进而增殖分化为致敏淋巴细胞,使机体致敏,以后如再次接触结核菌(结核菌素)时,致敏淋巴细胞即释放出各种淋巴因子,一方面使机体表现特异性的细胞免疫,而另一方面则发生迟发型变态反应,出现以单核细胞浸润,以及由于巨噬细胞释出溶酶体酶(水
概述外显子捕捉的操作步骤及原理
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后,克隆在位于“外显子捕捉序列”下游的克隆位点上。 (2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋
吹扫捕集法的原理及操作步骤
原理 吹扫捕集法属于气相萃取范畴,它是用氮气、氦气或其他惰性气体将被测物从样品中抽提出来,使气体连续通过样品,将其中的挥发组分萃取后在吸附剂或冷阱中捕集,再进行分析测定,因而是一种非平衡态的连续萃取。因此,吹扫捕集法又称为动态顶空浓缩法。 吹扫捕集法的过程是用氮气、氦气或其他惰性气体以一定的
精密高温烤箱的热风循环原理及操作步骤
精密高温烤箱,作为一种高效、均匀的加热设备,广泛应用于实验室、工业生产及多个科技领域。其核心功能在于其独特的热风循环原理,能够确保物料在烘干、固化等过程中受热均匀,从而提高生产效率和产品质量。斯博欣将详细介绍精密高温烤箱的热风循环原理及操作步骤。 一、热风循环原理 精密高温烤箱的热风循环原理
奶牛酒精阳性乳的检验原理及操作步骤
1.原理通过酒精的脱水作用,确定酪蛋白的稳定性。新鲜牛乳对酒精的作用表现得相对稳定;而不新鲜的牛乳,其中蛋白质胶粒已呈不稳定状态,当受到酒精的脱水作用时,则加速其聚沉。此法可验出鲜乳的酸度,以及盐类平衡不良乳、初乳、末乳及细菌作用产生凝乳酶的乳和乳房炎乳。2.操作方法在试管中加入等量的酒精和待检乳,
高效液相色谱仪原理及操作步骤
1. 高效液相色谱仪原理高效液相色谱仪原理 高效液相色谱仪的使用和原理分析高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,
可调容量移液器规范操作步骤及工作原理
一、可调容量移液器的工作原理移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。 在活塞推动下,排出部分空气, 利用大气压吸入液体, 再由活塞推动空气排出液体。 使用移液器时,配合弹簧的伸缩性特点来操作,可以很好地控制移液的速度和力度。二、移液器的操作使用1.可调容量移液器规范操作步骤*步 设
细胞计数及活力测定原理和操作步骤
一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞 ,总细胞 中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞 一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损
高效液相色谱仪原理及操作步骤
1. 高效液相色谱仪原理高效液相色谱仪原理 高效液相色谱仪的使用和原理分析高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,
流式细胞仪原理及操作步骤
流式细胞仪原理及操作步骤:流式细胞仪是集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群
流式细胞仪原理及操作步骤
流式细胞仪原理及操作步骤: 流式细胞仪是集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯
流式细胞仪原理及操作步骤
流式细胞仪是集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。活细胞免疫荧光
奶牛隐性乳房炎检测原理及操作步骤
1.过氧化氢(H2O2)玻片法(过氧化氢酶试验法) 大多数活细胞包括白细胞都含有过氧化氢酶,能分解过氧化氢而产生氧。但正常乳中的白细胞少,过氧化氢酶很少;乳房炎时,白细胞增多,故过氧化氢酶也增多,放出的氧也多。 (1)试剂。取双氧水(30% H2O2),按1:(2.33~4)的比
高效液相色谱仪原理及操作步骤
1. 高效液相色谱仪原理高效液相色谱仪原理 高效液相色谱仪的使用和原理分析高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,
高效液相色谱仪原理及操作步骤
1. 高效液相色谱仪原理高效液相色谱仪原理 高效液相色谱仪的使用和原理分析高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,
高效液相色谱仪原理及操作步骤
1. 高效液相色谱仪原理高效液相色谱仪原理 高效液相色谱仪的使用和原理分析高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,
高效液相色谱仪原理及操作步骤
1. 高效液相色谱仪原理高效液相色谱仪原理 高效液相色谱仪的使用和原理分析高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化(SP法)操作步骤 1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2.缓冲液洗 3min/2 次。 3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 4. 缓冲液洗 5min/
火箭免疫电泳的操作步骤
1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复
免疫组化的操作步骤
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加