纳米免疫比浊检测技术
目前,体液标志蛋白的检测方法主要采用免疫学方法,以酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)、放射免疫测定(Radio immunoassay,RIA)和胶体金层析法(俗称“金标”)这几种方法为主。ELISA方法虽然在临床上使用了近二十年,但它依然存在一些致命缺点,定量准确性差、操作时间长、自动化程度低,一般只能用于定性检测。RIA灵敏度高,但不稳定,重复性比ELISA差,而且存在放射性污染的危险。金标方法虽然稳定性较好,但灵敏度较低,只能定性,不能定量。特别是重复性差这一缺点限制了这些检测技术在临床上的应用,尤其不适合用于需要通过准确定量来帮助对疾病进行诊断的体液标志蛋白的定量检测。因此,寻找更加稳定、准确的血浆蛋白定量检测方法一直是国际上近十年来的研究热点。胶乳颗粒增强比浊法(particle-enhanced turbidimetric immunoassay......阅读全文
免疫比浊法试验的注意事项
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在 沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊测定注意事项: 1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。 2、应维持反应
免疫比浊法的基本原理
免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊
免疫透射比浊法测定乳糜微粒
免疫透射比浊法:① 关于抗血清:比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯,这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价(滴度)不可低于16。目前国内某些商品试剂中,apoA-Ⅰ抗血清效价极
免疫透射比浊分析的实验要求
实验要求:1.溶液中存在的抗原抗体复合物分子应足够大,分子太小则阻挡不了光线的通过。2.溶液中抗原抗体复合物的数量要足够多,如果数量太少,溶液浊度变化不大,对光通量的影响不大。3.透射比浊是依据溶液中颗粒形成或增加而使透射光减弱的原理来定量检测抗原,检测仍需抗原抗体反应的温育时问,检测时间较长。4.
免疫比浊法的基本原理
免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊
免疫比浊测定影响因素有哪些?
抗原抗体的比例 是浊度形成的关键因素。当抗原过量时,形成的IC分子小,而且会发生再解离,使浊度反而下降,光散射亦减少,这就是高剂量钩状效应。当抗体过量时,IC的形成随着抗原递增而增加,至抗原、抗体最适比例处达最高峰,这就是经典的海德堡曲线理论。在反应体系中需保持抗体适当过量,如形成抗原过量则造成测定
免疫比浊测定的影响因素有哪些?
1.抗原抗体的比例 是浊度形成的关键因素。 形成的IC分子小,而且会发生再解离,使浊度反而下降,光散射亦减少,这就是高剂量钩状效应。当抗体过量时,IC的形成随着抗原递增而增加,至抗原、抗体最适比例处达最高峰,这就是经典的海德堡曲线理论。 在反应体系中需保持抗体适当过量,如形成抗原过量则造成测
免疫比浊分析的影响因素有哪些?
1.抗原抗体比例 2.抗体的质量:R型抗体是免疫比浊法的理想试剂,而且要特异性和亲和力好,纯度和效价高。 3.增浊剂的使用 4.入射光光源和波长 5.结果报告中的计量单位 6.伪浊度:非抗原抗体特异性结合形成的浊度,称为伪浊度,可导致抗原检测结果假性升高。伪浊度形成的原因包括:①混浊标
什么是散射比浊?什么是透射比浊?
浑浊液经过光线照射,光线会被散射掉一部分,透过去的光线被接收管接收,这就是最早的透射比浊,为了得到准确或者说更多的信息,把散射掉的光线也接收出来进行分析,就形成了现在的散射比浊,其实,散射比浊包含了透射比浊。
在蛋白检测上透射比浊法与散射比浊法的优缺点
透射比浊与散射比浊是免疫比浊的常见的两种方法,其反应的原理一样,只是检测的光信号与仪器的检测器有区别。两者各有优缺点,简述如下:1、透射比浊操作简便,适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度计,几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想,所需的抗血清量大,检测的周期较长。2、散射比
蛋白分析仪影响免疫比浊的因素
影响免疫比浊的因素:1.抗原抗体比例。抗原抗体比例对复合物的数量和颗粒大小关系极大,当抗体>抗原时成正相关,当抗体
免疫比浊法的原理及注意事项
原理 免疫比浊法(Immunoturbidimetric Assays)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性 免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗
免疫散射比浊法测定的原理是什么?
溶液中的微粒受到光线照射后,微粒对光线产生反射和折射而形成散射光。 散射光强度与颗粒的分子量、数目、大小及入射光强度成正比,与微粒至检测器的距离、入射光波长成反比,因此使用高强度光源如激光、较短波长的入射光,可提高检测灵敏度。 当颗粒直径小于入射光波长的1/10时,散射光强度在各个方向的分布
免疫比浊法的方法分类及发展历程
分类 1.免疫透射比浊法 抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被 免疫复合物吸收。 免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与 免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密
免疫比浊法对抗体的要求都有哪些?
免疫比浊测定法要求抗体的特异性强、效价高、亲和力强,并使用R型抗体。(1)抗体的特异性。(2)抗体的效价。(3)抗体的亲和力:亲和力是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力强则抗体的活性高,不仅可以加快抗原抗体反应的速度,而且形成的IC较牢固,不易发生解离,这在速率比浊法中尤为重要。(4)R型和H型抗体
免疫比浊法的注意事项及方法分类
注意事项 抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在 沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊测定注意事项: 1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。 2
什么是比浊法?
比浊法又称浊度测定法。为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。是利用透射光强度(I)与入射光强度(Io)的比值I/Io,或用 散射光强度(Is)与入射光强度(Io)的比值 Is/Io,测定悬浊物质含量的方法。
免疫比浊法试验时的注意事项有哪些?
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在 沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊测定注意事项: 1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。 2、应维持反应
乳糜微粒的免疫透射比浊法注意事项
① 关于抗血清:比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯,这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价(滴度)不可低于16。目前国内某些商品试剂中,apoA-Ⅰ抗血清效价极低,选购试剂
免疫球蛋白g定量测定igg免疫比浊法高为什么
结缔组织病:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、硬皮病、斯约格伦氏综合征、干燥综合征等。IgG型多发性骨髓瘤、原发性单克隆丙种球蛋白血症。肝脏病:慢性病毒性活动性肝炎、隐慝性肝硬化、狼疮样肝炎等。传染病:结核、麻风、黑热病、传染性单核细胞增多症、性病、淋巴肉芽肿、放射线菌病、疟疾、锥虫病等。免疫球蛋白G
比浊法相关术语简介
本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。 这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光线的强
分析试验比浊法简介
比浊法又称浊度测定法。为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。 是利用透射光强度(I)与入射光强度(Io)的比值I/Io,或用 散射光强度(Is)与入射光强度(Io)的比值 Is/Io,测定悬浊物质含量的方法。 本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质
比浊法的应用介绍
本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光线的强度
散射比浊法的概念
散射比浊法是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的方法。
比浊法的常用方法
(1)目视比浊法目视比浊法就是指用眼睛观, 比较悬浊液浊茺以确定物质含量的方吱。其操作是先配制一系列浊度逐渐增加的标准,然后在同样的实验条件下,将被测液的浊度与标准进行比较比而获得测量结果。(2)免疫比浊法免疫比浊法包括透射比浊法和散射比浊法两种。(3)光电比浊法当光束通过悬浊液时, 由于被散射或吸
比浊测定的方法作用
中文名称比浊测定英文名称nephelometry test定 义一种定量检测抗原的试验。即抗原与抗体在液相中结合而形成可见的复合物,在测定仪中光线〔激光或红外光〕照射下,发生光散射〔散射比浊〕或光通量减少〔透射比浊〕。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
比浊法的应用简介
本法主要是用于测定能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定,生物碱沉淀试剂形成的混浊也可用此法测定。 比浊法这是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量的一种分析方法。当光线通过一混浊溶液时,因悬浮体选择地吸收了一部分光能,并且悬浮体向各个方面散射了另一部分光线,减弱了透过光
麦氏比浊管简介
在微生物学中,通过比对溶液浊度,麦氏比浊管常用来校对细菌悬浮液至某个特定浓度。例如在医药学领域常见的微生物抗药物敏感性试验中,用来测量最小抑菌浓度。 最初的麦氏比浊管是通过混合特定浓度的氯化钡和硫酸,从而形成硫酸钡悬浮液。例如0.5号麦氏比浊管是由0.05毫升1%氯化钡溶液加9.95毫升1 %
比浊法的主要类型
(1)目视比浊法目视比浊法就是指用眼睛观, 比较悬浊液浊茺以确定物质含量的方吱。其操作是先配制一系列浊度逐渐增加的标准,然后在同样的实验条件下,将被测液的浊度与标准进行比较比而获得测量结果。(2)免疫比浊法免疫比浊法包括透射比浊法和散射比浊法两种。(3)光电比浊法当光束通过悬浊液时, 由于被散射或吸
散射比浊法与透射比浊法哪个与浓度呈负相关
在比浊分析中,一种是光直线通过,测定光直射后的吸收量,称直射比浊法。 另一种利用光入射后,遇到溶液产生的漫散射,测定其散射光量。因不受色度影响,这种方法测定浊度要比直射更为精确。 在比色分析中,常用终点法。原理是加入试剂后,终点反应显色(或产生浊度)不再变化,利用散射光比色的一种定量检测方法。 速率