细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、...2

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。 F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应。在所有这些培......阅读全文

更换无血清培养基后细胞大量死亡的问题

问:我使用Lipofectamine2000转染成骨细胞,在转染前要换上无血清的培养基。本来条件模的好好的,转染效率也可以接受。但是寒假一回来就发生了怪事:细胞在有血清的培养基中长的好好的,一换无血清的培养基就死亡。大概4个小时就能看到较多的细胞飘起来。但是原来我换无血清培养基,就算放那里10个小时

关于无血清培养基添加分组的相关介绍

  1.促贴壁物质:许多细胞必须贴壁才能生长,这种情况下无血清培养基中一定要添加促贴壁和扩展因子,一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、

无血清的细胞培养

实验概要    经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免病毒污染造成的危害。 实验原理    无血清培养基(serum free  medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间

动物细胞培养的基础培养基的介绍

  细胞培养基成分复杂,包括盐类、糖类、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素。对这些物质的需求因细胞而有差异,这也导致大量的不同培养基配方出现。主要碳源物质通常是葡萄糖,有时也会使用半乳糖代替,这是因为半乳糖的代谢速度较慢。氨基酸(尤其是L-谷氨酰胺)和丙酮酸盐也可作为碳源。  除了营

基础培养基的制备

培养基是根据微生物  生长繁殖时对营养物质的需要而配制的营养制品,含有营养物质及适宜的酸碱度,经灭菌后使用。 常用的培养基按用途分为:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基及厌氧培养基。按物理性状分为固体、半固体和液体三种。 实验目的: 了解常用的液体、固体、半固体培养基的成分、制备方法和用

什么是基础培养基

  培养基是人工配制的适合细菌生长繁殖的营养物制品, pH调节为7.2~7.6,经灭菌后备用。  基础培养基含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质,可供大多数细菌生长。在牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐,调节 pH7.2~7.6,经灭菌处理后,即为基础液体培养基;如再加入0.3%~0.5%的琼

牛血清在细胞培养基中的实验步骤(一)

牛血清在细胞培养基中的实验步骤 取HeLa细胞和Mel细胞(本来应该取正常的二倍体细胞和不太好养的肿瘤细胞,但是实验室条件有限,本组做HeLa细胞),胰酶消化后,用无血清培养基(事先加双抗)吹打成细胞悬液(避免以前血清的干扰)。计数。2.取4000个左右的HeLa细胞加入到每行的孔(在加之前要震荡培

牛血清在细胞培养基中的实验步骤(二)

牛血清的质量要求随着科学技术的发展和生活水平的不断提高对生物医药产品的质量要求也越来越高,所以对制备工艺中所涉及到的各种原材料的质量标准要求也越来越高,特别是对用于细胞培养基中的主要天然成份――牛血清的质量要求也不断提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。(一)、WHO公布的《用动物细胞体外

血清培养基主要问题

  1. 血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难。  2. 血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受

血清和培养基的种类

1、问:细胞培养的胎牛血清用哪个公司的产品比较好呢?周围有人用PAA或Hyclone的,这两种跟Gibco或sigma出品的差别大吗? 答:如果是长得非常快得细胞如pa317,293,c6等恶性肿瘤细胞,一般得国产血清就可以,如果是原代培养的细胞,最好应用胎牛血清或类标准胎牛血清,Hyclone公司

简介天然培养基血清作用

  1. 提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。  2. 提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。  3. 提供结合蛋白

简述免疫细胞无血清培养基的主要特点介绍

  1、免疫细胞无血清培养基—无血清、不含异源动物成分;所有成分都是明确的,且同种来源(人),包括蛋白质;不含抗生素;  2、免疫细胞无血清培养基—能够培养人淋巴细胞、CIK、DC、NK等各类免疫细胞;  3、免疫细胞无血清培养基—具有很高的成活率和扩增倍数;  4、免疫细胞无血清培养基—能够维持高

天然细胞培养基的血清种类和成分等相关介绍

  天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质

胎牛血清为什么是细胞培养基的必需成分

胎牛血清是细胞培养中常用*的添加培养基。它营养丰富,大约含有三四百种不同成分,具有基础培养基所不具备的营养因子。它给细胞提供的益处主要有六个方面1. 提供细胞生长所需的天然激素或天然生长因子, 如胰岛素、IGFII等。2. 提供天然的结合蛋白如胎球蛋白、白蛋白等,能识别氨基酸、脂质、金属离子和激素等

简述血清培养基主要问题

  1. 血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难。  2. 血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受

培养脂肪干细胞一定要用无血清培养基吗

不一定要无血清培养基培养。无血清培养的目的只是适合将来临床使用或者排除其他不确定成分因子影响基础研究的判断。你可以用含10%FBSDMEM:F12培养基培养好原代(0.1%gelatin包被,I型胶原酶至少消化40min以上),然后使用Sciencell的MSCM进行培养,效果还不错。

细胞培养基的种类,以及如何选择?

  动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。  细胞培养基的种类有哪些?  按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培

细胞培养基中加血清的量的多少有什么原则

每种细胞的要求不一样,你要看细胞需要是10%还是5%还有的是15%,并不是多益善.。 一般常用的是10%,如果希望细胞长得快点可以用15%,但血清这东西,可以让细胞长得快,同时也可以让细胞分化得快,即加速细胞老化。所以要根据具体细胞来定,如果没有文献报道,可以自己尝试调节浓度,找到合适的即可

MTT加药的时加不加血清?加药时要用无血清的培养基吗?

我的药就是用含Gibco澳洲胎牛血清的培养基稀释的,不含血清的培养基对细胞有毒性或抑制作用,无形中对细胞造了一个serum-free的模型,细胞在提内本来就是有血清供应,如果该药物都不能对抗,那该药物就没有什么临床价值了,这是我的理解。 

如何选择合适的细胞培养基?

   细胞培养是大多数生物实验室都会遇到的基础实验,但不是最简单的实验。细胞培养蕴含着大学问。细胞培养状态不好相信每个细胞培养者都遇到过。有时候细胞状态不好,转染 、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,但首要因素是选好合适的细胞培养基。很多研究者只对一两种培养基比较了解,下面让我们详

基础培养基的用途是什么?

  基础培养基(basic medium)  基础培养基:含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质,可供大多数细菌生长。在牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐,调节 pH7.2~7.6,经灭菌处理后,即为基础液体培养基;如再加入0.3%~0.5%的琼脂,则为基础半固体培养基;加入1%~2%的琼脂,则

MSC干细胞无血清培养基对于培养MSC细胞有哪些好处?

  MSC干细胞无血清培养基到底是什么样的?下面我们就来给大家分享一下MSC干细胞无血清培养基对于培养MSC细胞有哪些好处吧。  MSC干细胞无血清培养基,没有添加血清、也没有添加动物源的组分、里面的每一种组分都是明确的。这样的培养基,对于培养MSC细胞,好处是很直接的:  1. 产品的安全性高。 

神经细胞培养基总结2

许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求,只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如,大鼠交感神经元仅需NGF即能存活,在其生存期间,这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月(即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上)。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生

血清替代品:XerumFree-XF205培养基添加物使用说明(一)

以下翻译仅供参考!最终使用者请参看英文原文说明书。 使细胞能在无血清环境中生长确保无动物成分且经过GMP认证的细胞培养添加物细胞的无血清培养具有一定的挑战性。这篇文章的目的是指导终端使用者平稳过渡到无血清环境中,且避免所有不足的或不恰当的努力。理想的过渡到无血清环境下应该经历几个阶段,逐渐地筛选使细

神经细胞培养基总结1

培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。 基础培养基 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS) 基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛

星形胶质细胞条件培养液-为什么用无血清培养基

转铁蛋白是一种结合铁离子的糖蛋白,增加脂肪酸和葡萄糖的合成。胰岛素是大多数合成培养基的必须成份,对细胞生长起重要作用, 如可促进淋巴细胞增殖 , 它可刺激细胞对尿苷和葡萄糖的吸收以合成RNA、蛋白质和脂质。普遍认为胰岛素、乙醇胺和亚硒酸钠是无血清培养基中的主要成份、转铁蛋白细胞在无血清培养液中培养时

关于天然培养基的血清种类的介绍

  目用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因:来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。  牛血清是细胞培养中用量最大的天然

低血清培养基的缓冲系统是什么?

平衡盐一般是由无机盐及葡萄糖组成的。平衡盐有Hanks′系统、Earle′s系统、Dulbecco′s磷酸缓冲盐系统等。199系列培养基、MEM系列培养基均有Hanks′系统的培养基及Earle′s系统的培养基。但是有些培养基均不是以上常规的平衡盐系统,例如RPMI 1640培养基、F12培

血清及培养基-技术的著名企业

Gibco/BRL: 著名的培养基及动物血清供应商。其培养基品类齐全,质量高,被全世界各实验室最为广泛使用。现已被invitrogen公司并购。 Hyclone: 提供高等级的血清,其采用的滤过系统最大程度的去除了支原体等污染。其产品还有培养基等系列。

如何挑选合适细胞的血清

在培养细胞的过程中,你是否遇到:本应贴壁的细胞,某次传代后出现不贴壁了?细胞养不起来,生长速度缓慢,或突然停滞生长?细胞状态不好,视野中总是存在较多死细胞? 想要知道如何才能把细胞养好,我们需要先明确培养细胞的3个关键要素:良好的细胞来源,严谨的实验操作,正确的培养体系。关于操作,其中存在许多人为不