肿瘤细胞培养方法简介(机械刮除法、反复帖壁法、消化...

一、机械刮除法1、标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2、刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入瓶皿中,肉眼或显微镜窥视下,刮除无标记空间。3、用Hanks液冲洗一两次,洗除被刮掉的细胞。4、注入培养液继续培养,如发现仍有成纤维细胞残留,可重复刮除至完全除掉为止。二、反复帖壁法1、待细胞生长达一定数量后,倒出旧培养液,用胰酶消化后,Hanks冲洗2次,加入不含血清的培养液,吹打制成细胞悬液。2、取编号为A、B、C三个培养瓶。首先把悬液接种入A培养瓶中,置温箱中静止培养5~20分钟后,轻轻倾斜培养瓶,让液体集中瓶角后慢慢吸出全部培养液,再接种入B培养瓶中后,向A瓶中补充少许完全培养液置温箱中继续培养。3、培养B瓶中细胞5~20分钟后,按处理A的方法,把培养液注入C培养瓶中,再向B瓶补加完全培养基。三、消化排除法1、先是用0.5%胰蛋白酶和0.02%EDTA(1:1)混合液漂洗培养基细胞一次,然后再换成新的混......阅读全文

平滑肌细胞培养方法

贴壁法原代培养1.1 细胞培养1.1.1 培养液配制 DMEM(美国Gibco公司),Hepes(15mmol/L),青霉素(100u/ml),链霉素(100mg/ml),优质胎牛血清(原代培养浓度20%,传代培养浓度10%,美国Hyclone)。1.1.2 培养器皿 25cm2塑料培养瓶(Cost

宫颈刮片(tct)的简介

  宫颈刮片是指从子宫颈部取少量的细胞样品,放在玻璃片上,然后在显微镜下研究是否异常。由于这项检验的提出,子宫颈癌的死亡率至少降低了70%。通过简单的宫颈抹片,医生可以侦测到子宫颈细胞微小的极早期变化,这使致命的癌症甚至在还没真正发生之前就被狙击了。宫颈刮片是目前广泛检查子宫颈癌最简便有效的诊断方法

宫颈刮片检查的简介

  宫颈刮片检查是进行妇科检查的女性必不可少的项目。宫颈刮片是指从子宫颈部取少量的细胞样品,放在玻璃片上,然后在显微镜下研究是否异常。有性生活的女性有条件者最好能每年做一次宫颈涂片。宫颈刮片是广泛检查子宫颈癌最简便有效的诊断方法。  宫颈刮片检查,它使子宫颈癌的死亡率至少降低了 70%。任何有三年以

电磁流量计电极的两种清洗办法

电磁流量计的电极清洗有很多种方法,一般zui常用的有机械清除法,电化学方法,电击穿方法和超声波清洗。本文章就详细介绍下机械清除:机械根除法是颠末在电极上设备特另外机械规划来完结电极根除。现在有两种方法:1.一种是选用机械刮除器。用不锈钢制成一把带有细轴的刮刀,颠末空心电极把刮刀引出,细轴和空心电极之

反复对血清冻融对细胞培养有害

实验室一次用不完的血清会采取继续冷冻的方式保存,冻融血清会对蛋白的活性有影响,如果是反复冻融的确会影响到细胞正常生长。曾有研究发现,血清冻融三次,对肿瘤标志物的浓度影响不大1,对于血浆,有报道在短时间内反复冻融三次,对总蛋白、白蛋白和免疫球蛋白含量影响不大,但作者推测对免疫球蛋白的活性有影响2。重要

丙烯分析:胸壁巨大肿瘤切除+Matrix-RIB胸壁重建

  今天的患者为女性,30岁,1年前在某院因右侧胸壁肿瘤行肿瘤切除,左上肺、中肺叶楔形切除,术后病理诊断为恶性肿瘤,未做放疗化疗。2月前患者发现 右侧胸壁局部肿大,有明显肿块。肿块生长迅速,为进行治疗,在当地医院就诊,诊断为胸壁肿瘤复发,为进一步治疗转我院。   术前查体:右侧胸壁有30cm长陈旧性

各类上皮细胞培养1

上皮细胞培养 1)表皮细胞培养 1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1 平方厘米小块。 2.EDTA 处理:先置入0.02%EDTA 中室温置5 分钟。 3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。 4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮

结缔组织类细胞培养

一、成纤维细胞培养用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。二、巨噬细胞培养1.实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml(勿注入肠内)。2.引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入70%酒

多电极电磁流量计的电极清洗方法通常有以下几种

 多电极电磁流量计的电极清洗方法通常有以下几种:  1、超声波清洗方法:  超声波清洗方法是运用超声波高频振动的原理,将超声波发生器产生的45~65kHz的超声波电压加到电极上,使超声波的能量集中在电极与介质接触面上,从而利用超声波的能力将污垢击碎,达到清洗的目的。   2、电击穿法:  这种方法使

简介机械搅拌器的安装方法

  机器的维护保养是一项极其重要的经常性的工作,它应与极其的操作和检修等密切配合,应有专职人员进行值班检查。  安装  1、该设备应安装在水平的混凝土基础上,用地脚螺栓固定。  2、安装时应注意主机体与水平的垂直。  3、安装后检查各部位螺栓有无松动及主机仓门是否紧固,如有请进行紧固。  4、按设备

平滑肌细胞培养方法4

 动脉平滑肌细胞培养的几个问题组织块大小边缘密度翻面时间观察时间对原代细胞萌发的影响对于贴块法的原代培养来源,由于细胞并非直接获得,而是从组织块边缘长出,其中有一“突破过程”,且细胞萌发后尚需一定的细胞密度才能使其存活、增殖,故组织块大小、边缘、密度均影响细胞萌出与否及细胞存活、增殖。公认的方法是将

电磁流量计电极清洗常用的方法

金属电极在电解质流体中存在电化学现象。根据电化学原理,电极与流体存在界面电场,电极与流体的界面是电极/流体相间存在的双电层所引起的。对于电极与流体界面电场的研究发现物质的分子、原子或离子在界面具有富集或贫乏的吸附现象,而且发现大多数无机阴离子是表面活性物质,具有典型的离子吸附规律,而无机阳离子的表面

上皮细胞类培养实验_毛细血管内皮细胞培养实验

实验方法原理毛细血管内皮细胞在形态上与心血管系统其它部位内皮细胞相似,但实验证明,在生物学性状上却大不相同,不能相互代替,因此必须单独进行培养。毛细血管细小,结构简单,内皮细胞外有较多的结缔组织,进行分离培养有很大困难。近年毛细血管培养已获成功;材料取自血管丰富组织,利用人的小儿包皮、人脾脏、牛肾上

机械法分离叶绿体

一、原理研磨叶片得到的匀浆,经过滤、离心可制备叶绿体。叶绿体的被膜比较脆弱,分离叶绿体应在等渗的缓冲溶液中,0~4℃温度下进行。叶绿体活力会随着离体时间延长而不断下降,因此,分离工作尽可能在短时间内完成。二、仪器与用具冰箱;离心机;扭力天平;显微镜;pH计;研钵;量筒;移液管;离心管;脱脂纱布等。分

细胞壁的简介

  化石研究表明,大约在35亿年前地球就已出现了原核细胞,大约在12~14亿年前才出现真核细胞。关于真核细胞的起源,主要有两种假说:一是“内共生假说”,认为真核细胞的各部分别起源于几种共生的原核细胞,需氧细菌穿入异养厌氧的 原核生物变为线粒体,蓝藻穿入变成叶绿体,螺旋体穿入变成鞭毛和纤毛等;一是“质

关于壁细胞的简介

  壁细胞亦称泌酸细胞( oxyntic cell),位于胃腺颈部,凸入腺腔。在未受刺激时,胞颈黏液细胞质内有许多管状泡囊,顶端有分泌小管其内璧有许多微绒毛,受刺激时细胞内的分泌小管即时形成一致密的网络而管壁细胞状泡囊消失。微绒毛内有很多肌动蛋白组成的微丝,盐酸由小管顶端表面分泌酸分泌为一主动转运过

细胞生物基本方法:结缔组织类细胞培养

结缔组织类细胞培养1)成纤维细胞培养用人或动物胚体为好;动物可用小鼠或鸡胚,去头和内脏,剪成小碎块后,用胰蛋白酶消化法培养;如为人胚,可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。 2)  巨噬细胞培养1.实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml(勿注入肠内)。2.引颈杀死动物,手

原代细胞的培养与建系3

下面为美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)入库细胞的基本要求:   (1)培养简历 组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态,细胞已传代数等。   (2)冻存液 培养基和保护剂名称。   (3)细胞活力 冻融前后细胞接种存活率和生长特性(生长繁殖曲线,分裂指数等)。   (4

刮膜式分子蒸馏仪简介

刮膜式分子蒸馏是一种在高真空下操作的蒸馏方法,这时蒸气分子的平均自由程大于蒸发表面与冷凝表面之间的距离,从而可利用料液中各组分蒸发速率的差异,对液体混合物进行分离。分子蒸馏是一种特殊的液--液分离技术,它不同于传统蒸馏依靠沸点差分离原理,而是靠不同物质分子运动平均自分子蒸馏由程的差别实现分离。刮膜式

刮膜式分子蒸馏装置简介

我国在80年代末才开展刮膜式分子蒸馏装置和工艺应用研究。该装置形成的液膜薄,分离效率高,但较降膜式结构复杂。它采取重力使蒸发面上的物料变为液膜降下的方式,但为了使蒸发面上的液膜厚度小且分布均匀,在蒸馏器中设置了一硬碳或聚四氟乙烯制的转动刮板。该刮板不但可以使下流液层得到充分搅拌,还可以加快蒸发面液层

细胞技术专题:大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验-三

 3.  免疫组化鉴定 Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测可见培养的脑微血管内皮细胞的胞浆及核周有棕黄色着色,胞核呈空泡状结构;对照染色为阴性。 收起  其他一、实验讨论我们采用两次酶消化、梯度离心分离得到脑微血管段,探索各种不同的培养条件,成功地进行了较纯的大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养,内皮细胞纯度可

消化炉的简介

  消化炉采用井式电加热方式,使样品在井式电加热炉内加热取得较佳热效应,提高消煮速度,消化管内逸出的SO2等有害气体,通过排污管经抽吸泵从水中排入下水道,有效地抑制有害气体的外逸。采用智能温度仪表数控电加热炉内温度,并直接显示温度值。配不锈钢排污罩使用方便采用四氟乙稀密封圈,无须更换。

细胞株的培养、冻存和复苏

细胞株的培养、冻存和复苏1)细胞株的培养和传代培养:用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10%小牛血清和抗生素的培养液中,培养细胞因子依赖细胞株还有加入适量细胞因子。在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养,3~4天传代一次。 悬浮生长细胞的传代:直接直接吸去或离心后吸去培养上清液,用新

电磁流量计电极脏了怎么办?

   仪器仪表作为工业生产中不可或缺的一类产品,在日常中获得了广泛的应用,然而流量计作为一种精密仪器,在使用跟日常的维护上有许多需要引起注意的地方。电磁流量计是一种智能型仪表,它的保养尤为重要。    电磁流量计如果测量的介质长期比较污浊,那么电磁流量计在工作一段时间后,电极上就会产生污垢。当结垢

机械门通道简介

细胞可以接受各种各样的机械力刺激,如摩擦力、压力、牵拉力、重力、剪切力等。细胞将机械刺激的信号转化为电化学信号最终引起细胞反应的过程称为机械信号转导(mechanotransduction)。比较明确的有两类机械门通道,其一是牵拉活化或失活的离子通道,另一类是剪切力敏感的离子通道,前者几乎存在于所有

浅析电磁流量计电极修理维护与日常清洗方法

电磁流量计电极清洗常用的方法有以下几种:                                   (l)电化学方法金属电极在电解质流体中存在电化学现象。根据电化学原理,电檄与流体存在界面电场,电磁流量计电极与流体的界面电场是电极/流体相问存在的双电层所引起的。对于电极与流体界面电场的研究

胸壁骨肿瘤的发病原因

  胸壁肿瘤是指发生在胸廓深层组织的肿瘤,包括骨骼、骨膜、肌肉、血管、神经等组织的肿瘤,但不包括皮肤、皮下组织及乳腺肿瘤。胸壁肿瘤分原发性和继发性两大类,原发性肿瘤又分为良性及恶性两种。原发性良性肿瘤有脂肪瘤、纤维瘤、神经纤维瘤、神经鞘瘤、骨纤维结构不良、骨纤维瘤、软骨瘤、骨软骨瘤及骨囊肿等;原发性

混合淋巴细胞肿瘤细胞培养的方法介绍

中文名称混合淋巴细胞肿瘤细胞培养英文名称mixed lymphocyte tumor cell culture;MLTC定  义将淋巴细胞与自身肿瘤细胞或MHCI类分子相匹配的异体肿瘤细胞混合在一起培养的方法。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),肿瘤免疫(三级学科)

细胞传代实验_消化法

实验方法原理用胰蛋白酶消化细胞,用于贴壁细胞传代培养。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶酒精PBS仪器、耗材超净工作台酒精灯酒精棉球培养箱显微镜吸管离心管离心机实验步骤一、传代前准备 1.  预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。 2.  用75%酒精

湿法消化法的分类

湿法破坏根据所用氧化剂不同分为如下几类:硫酸-硝酸法将粉碎好的样品放入250~500 mL凯氏瓶中(样品量可称10~20 g),加入浓硝酸20 mL,小心混匀后,先用小火使样品溶化,再加浓硫酸10 mL,渐渐加强火,保持微沸状态并不断滴加浓硝酸,至溶液透明不再转黑为止。每当溶液变深时,立即添加硝酸,