细胞技术专题:大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验三

3. 免疫组化鉴定 Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测可见培养的脑微血管内皮细胞的胞浆及核周有棕黄色着色,胞核呈空泡状结构;对照染色为阴性。 收起 其他一、实验讨论我们采用两次酶消化、梯度离心分离得到脑微血管段,探索各种不同的培养条件,成功地进行了较纯的大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养,内皮细胞纯度可达90%以上,而且细胞得率较高,10只动物可培养8~10个35 mm一次性塑料培养皿,培养面积大约80~100 cm2,与国内的一些方法[3~5]相比,细胞得率有明显的提高。 由于新生鼠易于混有较多的杂细胞且大脑较小以及哺乳期大鼠优于超过1月龄的大鼠[9],我们采用2~3- 12 - 丁香园细胞技术讨论版电子文集 大鼠脑微血管内皮细胞培养周龄哺乳期的SD大鼠作为培养材料。脑微血管内皮细胞原代培养的关键是首先分离获得纯度较高且活力好的脑微血管段。在解剖过程中仔细去除软脑......阅读全文

细胞技术专题:大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验-三

 3.  免疫组化鉴定 Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测可见培养的脑微血管内皮细胞的胞浆及核周有棕黄色着色,胞核呈空泡状结构;对照染色为阴性。 收起  其他一、实验讨论我们采用两次酶消化、梯度离心分离得到脑微血管段,探索各种不同的培养条件,成功地进行了较纯的大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养,内皮细胞纯度可

细胞技术专题:大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验-二

 三、 脑微血管段的分离与脑微血管内皮细胞原代培养  1.  大鼠颈椎脱臼处死后浸泡于75%乙醇中消毒3~5 min后断头置于玻璃培养皿中,打开颅腔后取出全脑置于盛有冷D-Hanks'液的玻璃培养皿中解剖去除小脑、间脑(包括海马)。2.  随后将大脑半球在干滤纸上缓慢滚动以吸除软脑膜及脑膜大

细胞技术专题:大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验-一

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养可以:(1)应用于血脑屏障的研究;(2)脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究;(3)新药筛选;(4)脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究。实验方法酶消化法 实验方法原理丁香园站友参考文献采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,,成功地摸索出大鼠

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验

酶消化法             实验方法原理 以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯度较高的

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验

酶消化法             实验方法原理 以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯度较高的

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养

实验方法原理 丁香园站友参考文献采用以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯度较高的脑微血管内皮细胞。实验材料 SD大鼠试剂、试剂盒 纤连蛋白Ⅳ型胶原明胶肝素钠碱性成纤维细胞生长因子青霉素链霉素NaHCO3牛血清

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验——酶消化法

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养可用于:(1)血脑屏障的研究;(2)脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究;(3)新药筛选;(4)脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究。实验方法原理以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯

细胞技术专题:大鼠肝星状细胞原代培养实验

大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法 实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料SD大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠

大鼠的脑微血管内皮细胞株

癌细胞株(Cell Strain)是用bai单细胞分离培养或通过筛选的du方法,由单细zhi胞增殖形成的细胞群。dao细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经*传代成功后即为细胞系(cell line), 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有

原代微血管内皮细胞的体外分离培养

微血管内皮细胞生长因子的应用和免疫磁珠技术的发展,使微血管内皮细胞的培养和纯化变得相对简化。 1、微血管内皮细胞培养简述人体主要器官和组织的微血管内皮细胞已经培养成功的有:骨骼肌、心、脑、胃、视网膜、肺、皮肤、脉络膜、小肠、脂肪、肝窦、肾、关节滑膜、胎盘、骨髓、胰岛、角膜及食道等器官组织的微血管内皮

细胞技术专题:肿瘤细胞原代培养实验

肿瘤细胞原代培养可以:(1)研究癌变机理;(2)研究抗癌药检测;(3)研究癌分子生物学;(4)用于阐明和解决癌症。详细 实验方法实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清

小鼠脑微血管内皮细胞的体外培养

摘要:  目的 探讨脑微血管内皮细胞的体外培养方法并进行细胞超微结构研究及组织型纤溶酶原激活物(TPA ) 活性测定。 方法 取新生小鼠脑组织, 通过匀浆、过筛、胶原酶消化、差速粘附等技术对鼠脑微血管内皮细胞进行原代培养, 待细胞铺满瓶底时, 用01125%胰酶20102%EDTA 消化, 离心收集

细胞技术专题:大鼠肝星状细胞培养实验

实验方法细胞培养技术 实验方法原理选用Wistar大鼠经消化酶灌注肝脏后,用分离液分离HSC,通过观察其自发荧光及其显著特征性结构的脂肪染色、细胞免疫化学染色等方法鉴定。 实验材料雄性 SD 大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB

正常大兔脑微血管内皮细胞的培养

实验材料:1. 正常兔大脑皮质组织;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. M199培养液(含20%小牛血清、肝素25U/ml、HEPES 10mmol/L、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素);D-Hanks液;

新生大鼠心肌细胞原代培养实验——原代培养技术

新生大鼠心肌细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)用于细胞形态研究;(3)应用于临床研究。实验方法原理将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料SD 乳鼠试剂、试剂盒低糖 DMEM、胰酶EDTA青链

细胞技术专题:大鼠星型胶质细胞培养实验

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。  实验方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验材料大鼠胚胎 试剂、试剂盒L-15培养基 胶原酶 Dnase D-MEM-B

大鼠肝星状细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

大鼠肝星状细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

细胞技术专题:原代胚胎成纤维细胞培养

实验器材手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。实验试剂无Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞(MEF)生长培养基:高糖DMEM

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

大鼠血管内皮细胞培养可以:(1)用于血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)用于选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法贴块法实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。但缺点使易混有成纤维细胞和平滑肌细胞,前者的贴壁时间和内皮接

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。

大鼠原代细胞分离与培养

  一、大鼠神经元细胞(酶消化法)   简述:新生24h或E18胎鼠,取脑,剥离海马,剪碎,木瓜酶消化,清洗过筛后铺于多聚赖氨酸包被的培养板中。   二、大鼠雪旺细胞(植块法)   简述:新生24h大鼠,取坐骨神经,剥去外膜和束膜,剪成1mm3的小块,均匀铺于培养皿内,加少量血清,37℃ C

细胞技术专题:大鼠视神经少突胶质细胞培养实验(一)

标签: 大鼠 视神经 少突 胶质 大鼠视神经少突胶质细胞培养可以:(1)获得大鼠视神经少突胶质细胞;(2)用于视神经损伤修复研究;(3)用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法牛血清培养法 实验方法原理采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。 实验材料W

细胞技术专题:大鼠视神经少突胶质细胞培养实验(二)

2. 免疫组织化学染色结果培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色 GC 蛋白阳性,未加一抗的呈阴性。染色结果显示成熟的少突胶质细胞突起丰富,互相形成蜘蛛网状(图 3)。苏木素复染,异质细胞较少,90%以上为阳性细胞(图 4)。  Figure 1 Cells migrated from opti

细胞技术专题:大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验

大鼠大脑皮层神经元细胞培养可以:(1)获得大鼠大脑皮层神经元细胞;(2)用于神经元细胞定向分化研究;(3)用于神经元细胞凋亡研究。实验方法机械性划割培养 酶消化法 实验方法原理SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同分为轻、中、重

大鼠肺成纤维细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、

大鼠肺成纤维细胞原代培养实验

实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 Wistar乳鼠试剂、试剂盒 PBS牛血清青霉素链霉素EDTA胰酶碘酒酒精仪器、耗材 绵球科直剪眼科弯剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿塑料

新生大鼠心肌细胞原代培养实验

原代培养技术             实验方法原理 将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

大鼠肺成纤维细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将大鼠的肺成纤维细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的生长培养基培养基中培养,使细胞得以生存、