植物细胞培养(plantcellculture)技术概述
植物细胞培养技术就是为了某种目的而在细胞水平上对离体植物细胞或原生质体进行的一系列生物工艺学操作。它包括分离、培养、再生以及一系列相关的操作。就有用化合物的生产来说,它主要是指在无菌条件下通过悬浮培养植物细胞生产有用化合物的过程。理论与技术基础:植物细胞全能性、微生物液体深层发酵系统、遗传工程 意义: 1)不受地理、季节和气候条件的限制; 2)节省土地,降低成本,生产周期短,可大大提高经济效益; 3)可代替整体植株在工厂内连续生产所需产物; 4)可通过添加抑制剂等使生物合成按照人的意志进行; 5)可通过诱变筛选,获得高产细胞株,并且可以进行特定的生物转化获得新的有用物质。 1. 发展与成果例证 1959年Tu1ecke和Nickell首次采用大体积〔20升〕的硫酸瓶进行了蔷薇(Rosa sp.)茎段的细胞大量培养。 1967年Kaul和Staba......阅读全文
ES-Cell-Culture-and-Manipulation2
Picking ES cell clonesOne or two days before picking colonies prepare 24-well plates of feeders. You can also use alternate protocols that utilize 96-
The-Dos-and-Donts-of-Cell-Culture
Given below are a few of the essential "do’s and don'ts" of cell culture. Some of these are mandatory e.g. use of personal protective equipment (P
植物病毒(plant-viruses)RNA提取
大多植物病毒RNA为单链RNA,并且其极性与mRNA极性相同,植物病毒RNA提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。 一、材料 提纯TMV病毒液(10mg/ml)。 二、设备 冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。 三、试剂 TE
MEDIA-AND-SOLUTIONS-REQUIRED-FOR-ROUTINE-ES-CELL-CULTURE
Media UsedTo prepare 100 ml mediumDMEM80 mlFCS15 mlNon-essential amino acids (100x)1 mlPen/strep (5,000 1U/ml, 5000 ug/ml)1 mlL-Glutamine 200 mM1 mlNu
RNA-Isolation-From-Animal-tissue-or-cell-culture
实验概要This method is designed for most animal tissues and culture cells. For RNA isolation from fibrous tissue, follow the specialized protocol on pag
Isolation-and-Culture-of-Human-Brain-Tumor-Stem-Cell
The isolation, culture, identification, and purification of stem cells from primary human brain tumors of different phenotypes have marked capacit
南京农大长江学者Plant-Cell重要成果
近期,国际植物科学领域顶级期刊《Plant Cell》刊登了南京农业大学和美国俄勒冈州立大学关于植物保护生物学的最新研究成果。这项研究表明,PsXEG1有助于大豆疫霉菌的毒力,但大豆可识别PsXEG1以诱导免疫反应,这反过来又被RXLR效应物所抑制。因此,XEG1代表一个质外体效应蛋白,可通过植
南京农大长江学者Plant-Cell重要成果
生物通报道:近期,国际植物科学领域顶级期刊《Plant Cell》刊登了南京农业大学和美国俄勒冈州立大学关于植物保护生物学的最新研究成果。这项研究表明,PsXEG1有助于大豆疫霉菌的毒力,但大豆可识别PsXEG1以诱导免疫反应,这反过来又被RXLR效应物所抑制。因此,XEG1代表一个质外体效应蛋
NIBS何新建连发Plant-Cell、PLOS-Genetics
北京生命科学研究所的何新建博士带领的课题组,主要利用模式植物拟南芥为研究材料,运用遗传学研究方法,结合蛋白、生化和分子生物学手段,研究DNA甲基化和组蛋白修饰的分子机理,并研究它们在基因表达调控和生长发育等方面的作用。近期,何新建博士带领的两项重要学术成果,分别发表在国际权威学术期刊《Plant
中国农大彭友良《Plant-Cell》发表植物病理学新成果
2014年3月18日,中国农业大学植物病理学系彭友良教授课题组与美国普渡大学的研究人员,在《Plant Cell》杂志上发表的一项研究表明,α-1,3-甘露糖转移酶介导的Slp1蛋白N-糖基化作用,对于稻瘟病菌逃避宿主的先天免疫至关重要。 本文的通讯作者彭友良教授为教育部“长江学者奖励
Human-Embryonic-Stem-(ES)-Cell-Protocols——General-notes-on-ES-cell-culture
hES media has a two week shelf life.hES cells should be cultured in 4, 6, 24, 48, 96 well plates. Growing cells in flasks is not recommended because i
欧盟评估苹果果实细胞培养生物质作为新型食品的安全性
2023年7月24日,据欧盟食品安全局(EFSA)消息,欧盟营养、新型食品和食物过敏源(NDA)研究小组就苹果果实细胞培养生物质(apple fruit cell culture biomass)作为新型食品的安全性发表科学意见。 经过评估,专家小组得出结论,在建议的使用水平下,其作为新型食品
北大长江教授Plant-Cell发表新成果
核定位RNA结合蛋白参与RNA代谢的各个方面,而这反过来又调节着基因的表达。然而,我们对核定位RNA结合蛋白在植物中的作用,却知之甚少。12月31日,来自北京大学、福建农林科技大学、中科院遗传与发育生物学研究所、日本京都大学和英国John Innes中心等处的研究人员,在国际著名植物学期刊《Pl
复旦马红PNAS、Plant-Cell连发重要成果
复旦大学的马红教授,是活跃于美国科学界的卓有成就的年轻华人科学家之一,科研成果丰硕。他发现了植物第一个编码G蛋白亚基,同时也是花同源异型框基因的共同发现者。近期,马红教授带领的课题组,在植物减数分裂研究方面的重要成果,先后发表在国际著名学术期刊《PNAS》和《Plant Cell》。 在9月2
植物叶蛋白(the-plant-leaf-protein)的提取
一、实验目的熟悉植物叶蛋白的几种提取原理和方法,了解其意义及其应用价值。二、实验原理植物叶蛋白或称绿色蛋白浓缩物 (leaf protein concentration,简称LPC),是从新鲜植物叶片中提取的高质量浓缩蛋白质,不仅是畜禽生长发育和生产畜产品的主要营养物质,而且目前也正成为人类的保
上海交大张大兵新发Plant-Cell文章
在植物中,F-box蛋白构成了一个大的超家族,对于控制许多生物学过程起着重要的作用,但是F-box蛋白在植物减数分裂中的作用仍不明确。7月19日,来自上海交通大学生科院的研究人员在国际著名植物学杂志《Plant Cell》发表题为“MEIOTIC F-BOX Is Essential for M
山农大泰山学者Plant-Cell发表研究新成果
1月7日,来自山东农业大学、华中农业大学和加州大学圣地亚哥分校的研究人员,在国际著名植物学期刊《Plant Cell》发表题为“The Arabidopsis NRG2 protein mediates nitrate signaling and interacts with and regul
浙大《Plant-Cell》发表水稻磷信号途径新结果
在2014年4月25刊的著名权威杂志《植物细胞》(Plant Cell),浙江大学吴平教授带领的的研究小组在线发表了题为“SPX4 Negatively Regulates Phosphate Signaling and Homeostasis through Its Interaction
Cell子刊发布干细胞培养新技术
人类胚胎干细胞(hESCs)不仅能够转变为人体的所有细胞类型,还能够在实验室中无限地增殖。然而从发育胚胎中取得,随后在体外培养的hESCs与早期胚胎中的多能外胚层细胞相比,往往会显示出一些生物学差异。 现在来自新加坡科技局(A*STAR)基因组研究所(GIS)的一个研究小组,开发出了一种新
Production-of-Recombinant-Proteins-in-SuspensionCultured-Plant-Cells
Plants have emerged in the past decade as a suitable alternative to the current production systems for recombinant pharmaceutical proteins and, toda
单细胞培养的基本介绍
单细胞培养(single cell culture)是指从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞,在无菌条件下,进行体外生长、发育的技术。人们分离和培养植物单细胞的设想和实践都比较早,但成功地进行单细胞培养是随着更有效的培养基的发展以及从愈伤组织悬浮培养物分离单细胞的专门技术的建立才实现
单细胞培养技术的概念
单细胞培养(single cell culture)是指从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞,在无菌条件下,进行体外生长、发育的技术。人们分离和培养植物单细胞的设想和实践都比较早,但成功地进行单细胞培养是随着更有效的培养基的发展以及从愈伤组织悬浮培养物分离单细胞的专门技术的建立才实现的。
关于植物细胞培养的相关技术介绍
1. 组织培养:诱发产生愈伤组织,如果条件适宜,可培养出再生植株。用于研究植物的生长发育、分化和遗传变异;进行无性繁殖;制取代谢产物。 2. 悬浮细胞培养:在愈伤组织培养技术基础上发展起来的一种培养技术。适合于进行产业化大规模细胞培养,制取植物代谢产物。 3. 原生质体培养:脱壁后的植物细胞
细胞培养基本技术概述(五)
实验用品 1. 种类︰ 1.1. 细胞培养实验用品均为无菌,除了玻璃容器与pasteur pipet 外,其它均为塑料无菌 制品。 1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附,培养容器种类有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等,依
细胞培养基本技术概述(一)
无菌操作基本技术 1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或
细胞培养基本技术概述(六)
抗生素 1. 细胞库之细胞培养基不加抗生素 1.1. 培养自ATCC 引进之细胞株,培养基中不加抗生素。 1.2. 培养自其它实验室引进之细胞株,制作token freeze 前培养基须添加抗生素,待token freeze 通过污染测试后,大量培养时则不加抗生素。 2. 寄送活细胞时,须将培养液充
细胞培养基本技术概述(二)
培养基 1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37 oC 水槽中温热。 2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月,期间glutamine 可能会分解,若细胞生长不佳,可以再添加适量glutamine。 3. 粉末培养基配制(以1 升为例): 3.1. 细胞培
细胞培养基本技术概述(四)
细胞传代培养 1. 细胞生长至高密度时,即须分殖至新的培养瓶中,一般稀释比例为1:3 至1:6,依细胞种类而异。 2. 材料: 2.1. 无菌磷酸生理缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS,GibcoBRL
细胞培养基本技术概述(三)
血清 1. 血清必须贮存于–20 ~ -70 oC,若存放于4 oC,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10 %,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。 2. 一般厂商提供之血清为无菌,不需再
细胞培养基本技术概述(七)
冷冻细胞活化 1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒温水槽 3.2 新鲜培养基 3.3 无菌吸管/