常规组织初代消化培养操作方法步骤
1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75% 酒精擦拭手至肘部。2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用 Hanks 液漂洗 2~3 次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中 30~60 分钟。4、剪切:用眼科剪把组织切成 2~3 毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多 30~50 倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。5、消化:或用恒温水浴,或置于 37 ℃温箱消化均可,消化中每隔 20 分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。6、分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速( 500~1000 转/分)离心消化液 5 分钟,吸出......阅读全文
上皮细胞类培养实验_肝细胞培养实验
实验方法原理肝实质由大量肝细胞和少量间质组成,人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养;肝脏具有取材方便和易于生长的优点,能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整,有多种功能并具有代谢活化致癌物的能力,适用做多种研究;我国已建有多个人肝癌细胞系。实验材料肝脏试剂、试剂盒BSS消化液胰蛋白酶胶原酶仪器、耗材
原代细胞中各种组织消化方法汇总
细胞培养名称:新生大鼠皮质星形胶质细胞培养组织来源:种属:大鼠年 龄:新生1天-2天取材部位: 皮质选用的酶:0.125%胰酶消化时间:37度15min注意事项:胰酶平时用1.5ml EP管分装冻存,用时解冻,37预温1min,以保持胰酶好的活性,消化时每隔5min轻轻摇动消化组织。细胞培养名称:成
组织的分离实验_胰蛋白酶消化消化分离法
实验方法原理胰蛋白酶适于消化细胞间质较小的软组织,如胚胎组织、羊膜、上皮组织、肝、肾等软组织,对传代细胞也非常好。用于消化纤维性组织或较硬的癌组织则较差。Ca2+和Mg2+对胰蛋白酶的活性有一定抑制作用,故需用不含这些离子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用,因此在做细胞传代时,用胰蛋白酶消
初粘力测试仪的工作原理和操作方法
1.1 工作原理:将一钢球滚过平放在倾斜板上的胶粘带粘性面。根据规定长度的粘性面能够粘住的zui大钢球尺寸,评价其初粘性大小。1.2 仪器结构:1.2.1 斜面滚球装置:本装置主要由倾斜板、放球器、支架、底座及接球盒等部分组成,如图1所示。1.2.2 钢球:以GCr15轴承钢制造、精度不低于GB
胶带初粘性测试仪的检测原理和操作方法
胶带初粘性测试仪PAT-01检测仪器也称为胶带初粘性试验机,按照GB4852之规定设计制造,适用于各种胶粘类制品的初粘性测试,如压敏胶带、医用贴剂、不干胶标签、保护膜等胶带初粘测试仪胶带初粘性测试仪PAT-01主要由倾斜板、放球器、支架、可调水平底座及钢球等构成。采用斜面滚球方法,通过钢球和压敏胶粘
定氮仪使用步骤——消化相关介绍
消化: 1、准备6个凯氏烧瓶,标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL,样品要加到烧瓶底部,切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g,浓硫酸2.0mL,30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,对样品测
细胞传代培养(消化法)
细胞传代培养(消化法)一. 传代前准备: 预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。3.正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。5.准备
E+H探头常规维护步骤
E+HPH电极又称PH探头、PH传感器,英文名称pHelectrode或pHsensor,是PH计上与被测物质接触的部分,用来测电极电位的装置。通常有两种方法测量水相溶液中的pH值,比色法(pH试纸和比色皿)和电位法。电位法是能够实现连续在线测量和过程监控的*方法,而且电位法可获得且结果可重复的pH
电子叉车秤的常规保养步骤
叉车秤是指在小型手动液压升降搬运车基础上增加高精度称重传感器和智能化该数字显示仪表而组成的称重系统,电子叉车秤实现了叉车和电子地磅功能的完美结合,每次称重的数据可以自动显示。电子叉车秤独特设计的力学结构具有防过载、偏载、倾覆的特性,小的离地间隙。在日常使用中,避免在移动中称重,在称重完后关闭仪表后再
肿瘤细胞原代培养实验
实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。根据细胞种类不同选用
组织芯片的构建步骤
1.选取待研究的组织。现在人们利用组织芯片技术对人体各组织均有研究,包括肝脏,前列腺,心脏,乳房等等,据相关数据显示,在大脑组织中的应用最多。医学上常选取一些病变器官进行研究。根据制作方法来分,微阵列主要有石蜡包埋的组织微阵列和冰冻微阵列两种。2.经检测后标记出待研究的区域。组织微阵列的检测仪主要是
葡萄组织培养
一、葡萄的形态特征和生物学特性葡萄(Vitis vinifera L.)属落叶木质藤本植物,葡萄地上部分的茎细长柔弱,髓部较大,组织较疏松。节上具有卷须,使新梢可以缠绕其它树木或支架上向上攀援。叶近圆形或卵形,35裂,基部心形。圆锥花序。葡萄是深根性作物,其根系在土壤中的分布状况,随气候、土壤型,地
组织培养再生
步骤一:接种组织培养的接种是指将灭过菌的材料,在无菌的情况下,切成小块,放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作,多在无菌室或超净工作台上进行,中学可制作接种箱,在箱内进行接种。接种的方法步骤如下: ①在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、
细菌培养的具体培养步骤
以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法,按次序分为容器、工具的消毒,培养基的制备,接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。(二)培养基的制备1.培养用水如果培养的光合细菌是淡水种,菌种培养可用蒸馏水,生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海水种,则用天
细菌培养的具体培养步骤
具体培养步骤以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法,按次序分为容器、工具的消毒,培养基的制备,接种和培养管理四个步骤。(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。(二)培养基的制备1.培养用水如果培养的光合细菌是淡水种,菌种培养可用蒸馏水,生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织酶仪器、耗材试管离心管尼龙网实验步骤1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~2 ml
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理 对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料 组织酶仪器、耗材 试管离心管尼龙网实验步骤 1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织
常规组织样本核酸(DNA/RNA)提取纯化
20 分钟内快速纯化高品质,高产量,即用型 DNA(见图 20)多种规格可选择:Mini Kit 可处理 25 mg 组织,Micro Kit 可处理小于 10 mg 组织完全去除污染物和抑制剂可在 QIAcube 上进行自动化纯化表1 QIAamp DNA Mini Kit纯化各类样本的核酸产量样
植物组织培养的培养条件
(一)温度: 对大多数植物组织20~28℃即可满足生长所需,其中26~27℃最适合。 (二)光: 组织培养通常在散射光线下进行。光的影响可导致不同的结果。有些植物组织在暗处生长较好,而另一些植物组织在光亮处生长较好,但由愈伤组织分化成器官时,则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和
植物组织培养的培养方法
1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。2、试管组织培养试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培瓶等器皿中在无菌
植物组织培养的培养条件
植物组织培养即植物无菌培养技术,又称离体培养,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)、组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、
组织培养常用培养基
组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不同特点,适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时,应对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择使用。培养基中的激素种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料而有变化,因此各配方中均不列入。几种常用培养基如下:MS培养基 MS
组织培养培养基配制
①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 ③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,
配制组织培养培养基
①根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。 ②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 ③将①中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,
植物组织培养目的原理和步骤!以及需要注意的地方哪些
(一)目的植物组织培养为一基本生物技术。植物之无土繁殖、无病毒植株生产、植物生理、形态、遗传等研究,均可利用比技术为工具。而且具不受限于季节、度地、在小空间即可完成等优点。本实验及利用时地操作,令学生学习相关的知识与技巧。(二)原理利用细胞分化之性,以任何单胞拥有与母本相同的遗传组成,来发育成与母本
凯氏定氮仪使用步骤(一)消化
1、准备6个凯氏烧瓶,标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL,样品要加到烧瓶底部,切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g,浓硫酸2.0mL,30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,对样品测定进行校正
Nature:科学家在培养皿中诱导出有消化作用的人类胃组织
科学家用多能干细胞在培养皿中生成能产生酸和消化酶的人类胃组织。1月4日,他们在Nature上在线报道了他们的研究结果。这些美国辛辛那提儿童医院医学中心的研究人员从胃的本体/基底区域培养组织。这项研究是在他们获得胃的激素生成区(胃窦)两年后进行的。 这一发现意味着研究人员现在可以培养人类胃部的两
简述手套箱的操作方法步骤
打开包装箱,首先检查运输过程中真空手套箱上的各结合部位有无松动。如有松动请将相应的螺丝拧紧,然后可以试抽真空。 一、抽真空与充气的放法: 1、本产品分为主箱体和过渡室两部分。主箱体不能单独抽真空,过渡室则可以单独抽真空。[2] 2、先打开过渡室里面的门,然后关上所有手套接口压盖、阀门和过渡
恒温培养箱操作方法
恒温培养箱是一种常用的实验设备,具有性能稳定、使用灵活、可靠性高等优点,可供医疗卫生、医药工业、生物化学、工业生产及农业科学等科研部门作细菌培养、育种、发酵及其他恒温试验用。下面介绍一下恒温培养箱操作方法及使用要点。 恒温培养箱操作方法:1.接通电源,按下电源开关,此时电源指示灯亮。2.操作