ELISA检测噬菌体抗体与目的抗原的亲和力
【材料和试剂】 （1）酶标板 （2）酶标仪 （3）0.5mol/L Na2CO3(pH9.6) （4）1％A （5）HRP标记的抗M13噬菌体多抗 （6）2mol/L H2SO4 【操作步骤】 (1)将抗原用或0.5mol/L Na2CO3(pH9.6)稀释至10μg/ml; (2)对于要检测的每个克隆,至少包被2个孔,每孔用200μl稀释抗原。同时包被阴性对照抗原。此外,包被阳性对照抗原,阳性对照抗原用anti-M13抗体; (3)室温包被1～2h,最好于4℃过夜包被,甩掉孔中液体,倒置于纸巾上空干。 (4)每孔中用至少200μl 1％A封闭,37℃1h。去掉液体后空干。 (5)将重组噬菌体事先用等体积的封闭液于室温下封闭15min～30min,以封闭各种蛋白质之间的非特异性结合位点。 以M13噬菌体作为阳性对照噬菌体,也按上述步骤操作。 (6)在每个包被抗原孔中,加入稀......阅读全文
抗体制备中你最关心的问题
抗体制备是免疫学研究的基础。制备一个合适的抗体将会决定着免疫实验的成败。抗体制备过程涉及到很多个方面，比如免疫原如何设计、免疫过程的优化、目的抗体筛选、抗体纯化、应用鉴定等。接下来我们将会对一些关键的技术难点进行解答。 1. 免疫原是如何设计的？有什么原则？ 解答：免疫原可以是天然蛋
通过噬菌体ELISA鉴定得到的噬菌体克隆
经过3～4轮的筛选后，应该能够富集到能与受体特异性结合的噬菌体群体。通常而言，在后几轮的筛选中，每次获得的噬菌体总量都会增加，但是单就这个现象并不一定能说明已经筛选到了受体特异性结合的肽段。能与靶分子非特异性结合或者能与筛选基质的噬菌体克隆也会造成这一现象。噬菌体ELISA可以说是最灵敏的鉴定所获取
噬菌体中和试验的定义和目的
中文名称噬菌体中和试验英文名称bacteriophage neutralization test;phage neutralization test定 义一种检测低水平抗噬菌体抗体的敏感试验。即将噬菌体与特异性抗体共温育，以抑制该噬菌体感染宿主，通过观察噬菌斑数量变化，可对中和作用进行定量。应用学
体外功能学实验开发的一般原则
本文从整体角度分析生物学功能评价和检测分析方法的双重间接性，并以最基本的生物学功能实验，配 体受体结合相关实验为实例，介绍采用ELISA技术竞争法进行配体受体结合相关实验方法学开发的一般过程，区分以样品以亲和力大小比较和定量检测为使用目的两个方面具体应用及方法质量的初步评价，并讨论采用同不同检
ELISA试剂盒中的抗体
在ELISA试剂盒中运用的抗体可分为多克隆抗体（多抗）和单克隆抗体（单抗）。多抗取白免疫动物的抗血清，制备较简略，但抗血清成分凌乱，除含针对抗原（多个表位）的抗体外，还含有多种其他抗体，亲和力和特异性相对要低于单抗，且制备周期长，批间差异较大。而单抗仅针对抗体的单一表位，ELISA试剂盒亲和力和特异
关于多克隆抗体的抗体鉴定介绍
抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于治疗，制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体，要求的效价不一。鉴定效价的方法很多，包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验（ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法，以资比较。如制备抗抗体的效价，一般就采用琼
ELISA的目的是什么
ELISA目的是检测血清中特定的抗原，以达到定性判断的目的。酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay（简写ELISA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。
gⅥcDNA融合噬菌体ELISA
gⅥ-cDNA融合噬菌体ELISA [器材和试剂] 通用设备及试剂以及以下的设备和试剂： ● 链霉素包被的微量浓度测定板(Pierce) ● T和 2mol/L ● 生物素抗原选择出的(BAS)噬菌体和(或)免疫亲和选择出的(1AS)噬菌体
用人血清进行噬菌体ElISA
用人血清进行噬菌体ElISA [器材和试剂] ● 包被缓冲液 ● T ● T[，1％TritonX—100，3％ A(Sigma)] ● 兔抗人Fc—特异性IgG(Pierce)：用包 被缓冲液稀释为5．0ug/ml① ● HRP标记的抗噬
抗原抗体反应的应用
（1）抗原：免疫动物是制备抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原，如果使用半抗原如小分子激素等，必须与大分子载体连接。抗原的用量视抗原种类及动物而异，—次注射小鼠可以少至几个微克，免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加，从几百μg/次至几mg/次。〔2）佐剂及乳化：佐剂可
关于抗原抗体反应催化性抗体的制备的介绍
抗体酶是抗原决定簇处于转换态结构的抗体。因为转换态分子极不稳定无法制备抗体，所以催化性抗体的获得主要是通过设计稳定的转换态的类似物作为半抗原，与载体蛋白交联后，免疫动物，获得针对半抗原的抗体，从中筛选具有催化活性的抗体。筛选催化性单克隆抗体所用的ELISA与筛选一般抗体的方法不完全一样，应根据催
概述抗原抗体反应的抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清，对其中所含抗体的浓度，特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。为了获得质量和数量上合符要求的抗血清，在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测，对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析，如效价、亲和力及交叉反应等。根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。最常用的为免疫沉淀，EL
抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清，对其中所含抗体的浓度，特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。为了获得质量和数量上合符要求的抗血清，在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测，对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析，如效价、亲和力及交叉反应等。根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。最常用的为免疫沉淀，EL
概述抗原抗体反应的抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清，对其中所含抗体的浓度，特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。为了获得质量和数量上合符要求的抗血清，在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测，对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析，如效价、亲和力及交叉反应等。根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。最常用的为免疫沉淀，EL
ELISA方法学：开发实践中不可不知的亲和力测定方法开发1
一、前言目前用于测定受体配体间的亲和力，也就是解离平衡常数的方法，主要有：热力学测定方法动力学测定方法饱和浓度法 其中动力学测定方法和饱和浓度法较为通用：动力学测定方法（如Biacore）涉及到比较昂贵的仪器投入，饱和浓度测定法为国内绝大多数生物药物企业常用的测定方法。ELISA用于亲和力的测定是饱
抗原抗体的功能
抗体的主要功能从而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物，中和它们所释放的毒素或清除某些自身抗原，使机体保持正常平衡，但有时也会对机体造成病理性损害，如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生，对人体可造成危害。
抗原抗体的功能
抗体的主要功能从而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物，中和它们所释放的毒素或清除某些自身抗原，使机体保持正常平衡，但有时也会对机体造成病理性损害，如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生，对人体可造成危害。
抗原抗体的分类
(1)按作用对象，可将其分为抗毒素、抗菌抗体、抗病毒抗体和亲细胞抗体(能与细胞结合的免疫球蛋白，如1型变态反应中的lgE反应素抗体，能吸附在靶细胞膜上)。 (2)按理化性质和生物学功能，可将其分为IgG、IgA、IgM、IgE、IgD五类。 (3)按与抗原结合后是否出现可见反应，可将其分为：
抗原抗体的定义
抗原抗体是一种非共价结合，不形成共价键。1.静电引力（库伦引力）：是因抗原、抗体带有相反电荷的氨基与羧基基团间相互吸引的能力，这种吸引力的大小和两个电荷间的距离平方成反比。两个电荷距离越近，静电引力越大。2.范德华力：这是原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，是抗原、抗体两个
抗原抗体的分类
(1)按作用对象，可将其分为抗毒素、抗菌抗体、抗病毒抗体和亲细胞抗体(能与细胞结合的免疫球蛋白，如1型变态反应中的lgE反应素抗体，能吸附在靶细胞膜上)。 (2)按理化性质和生物学功能，可将其分为IgG、IgA、IgM、IgE、IgD五类。 (3)按与抗原结合后是否出现可见反应，可将其分为：
抗原抗体的结构
抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链)；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种，重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 bio.jewelove.net 整个抗体分子可分为恒定
HLA抗原和抗体
人类白细胞上有3类抗原：红细胞血型抗原、白细胞特有抗原、与其他组织共有但也是最强的人类白细胞抗原（HLA）。1.HLA：是糖蛋白抗原，又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA有一系列紧密连锁的基因编码，这些基因称为组织相容性复合物（MHC），也称为HLA基因，定位在第6号染色体短臂上，共有6个
抗原抗体的规律
(1)初次反应产生抗体：当抗原第一次进入机体时，需经一定的潜伏期才能产生抗体，且抗体产生的量也不多，在体内维持的时间也较短。 (2)再次反应产生抗体：当相同抗原第二次进入机体后，开始时，由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合，可使原有抗体量略为降低。随后，抗体效价迅速大量增加，可比初次反应
抗原抗体的结构
抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链)；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种，重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 bio.jewelove.net 整个抗体分子可分为恒定
抗原抗体的规律
(1)初次反应产生抗体：当抗原第一次进入机体时，需经一定的潜伏期才能产生抗体，且抗体产生的量也不多，在体内维持的时间也较短。 (2)再次反应产生抗体：当相同抗原第二次进入机体后，开始时，由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合，可使原有抗体量略为降低。随后，抗体效价迅速大量增加，可比初次反应
抗原抗体是什么
抗原是指能够刺激机体产生（特异性）免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合，发生免疫效应（特异性反应）的物质。抗体是指机体的免疫糸统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中，也分布于组织液及外分泌
基因工程抗体技术的应用
1、生物传感器：生物传感器主要用于测定抗原和抗体的亲和力。它利用抗体与抗原相互作用引起的细胞质表面共振来改变偏振光的反射。与传统方法相比，它可以描述曲线并提供显示动态变化的信息。2、噬菌体文库技术的进展：过去，大多数材料是抗病毒抗体。由于病毒具有很强的抗原特异性，很容易筛选出相应的抗体。此外，该方法
基因工程抗体的概念和应用
基因工程抗体是指利用基因工程技术将抗体基因重组和克隆到表达载体中，并在合适的宿主中表达和折叠成功能性抗体分子。基因工程抗体具有分子小、免疫原性低、可塑性强、成本低等优点。该技术的基本原理是从杂交细胞、免疫脾细胞和外周血淋巴细胞中提取mRNA，反转录成cDNA，然后将扩增的重链和轻链基因抗体分别进行P
33其他类小分子抗原抗体
33其他类小分子抗原抗体用化学方法把半抗原与某种纯蛋白的分子（载体）结合，纯蛋白会获得新的免疫原性，并能刺激动物产生相应的抗体。半抗原设计的目的是使半抗原刺激机体产生特异性免疫应答，并获得对待测物分子具有高亲和力的抗体。常见的半抗原有多糖、类脂、核酸和某些小分子化合物和药物等。Cat No产品名Pr
抗原抗体反应的应用领域
免疫动物 （1）抗原：免疫动物是制备抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原，如果使用半抗原如小分子激素等，必须与大分子载体连接。抗原的用量视抗原种类及动物而异，—次注射小鼠可以少至几个微克，免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加，从几百μg/次至几mg/次。 〔2