聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定IgG纯度2
④ 浓缩胶缓冲液:称取1mol/L HCl 48ml,Tris5.98g,TEMED 0.46ml,加重蒸水至80ml,调pH6.7,用重蒸水定容至100ml,置棕色瓶内,4℃贮存。⑤ 浓缩胶贮液:称Acr10g,Bis2.5g 加重蒸水溶解后定容至100ml,过滤后置棕色瓶内,4℃贮存。⑥ 40%蔗糖溶液(W/V)⑦核黄素溶液 核黄素4.0mg,加重蒸馏水溶解,定容至100ml,置棕色试剂瓶内,4℃贮存。 (2)Ph8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液 称Tris6.0g,甘氨酸28.8g,加蒸馏水至 900ml,调pH8.3后,用重蒸水定容至1000ml,置试剂瓶中,4℃贮存,临用前稀释10倍。 (3)0.1%溴酚蓝指示剂 (4)染色液 染色液种类较多,染色方法也不完全相同。本实验采用0.05%考马斯亮蓝R250染色液中,含20%磺基水杨酸,其优点是染色、固定同时进行,背景易脱色。0.5%考马斯亮蓝R250......阅读全文
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定IgG纯度2
④ 浓缩胶缓冲液:称取1mol/L HCl 48ml,Tris5.98g,TEMED 0.46ml,加重蒸水至80ml,调pH6.7,用重蒸水定容至100ml,置棕色瓶内,4℃贮存。⑤ 浓缩胶贮液:称Acr10g,Bis2.5g 加重蒸水溶解后定容至100ml,过滤后置棕色瓶内,4℃贮存。⑥ 40%
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定IgG纯度
一)原 理 由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定IgG纯度1
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定IgG纯度3
4.加样作为分析用的PAGE加样量仅需几微克,2-3ul血清电泳后就能分出几十条蛋白区带。为防止样品扩散,应在样品中加入等体积40%蔗糖(内含少许溴酚兰)。用微量注射器取5ul上述混合液,通过缓冲液,小心地将样品加到凝胶凹形样品槽底部,待所有凹形样品槽内都加了样品,即可开始电泳。5.电泳将直流稳压电
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度2
③ 分析纯过硫酸胺(AP)(AR) 0.14g加重蒸水至100ml,置棕色瓶,4℃储存仅能用一周,最好当天配制。上述3种试剂用于制备分离胶。④ 浓缩胶缓冲液:称取1mol/L HCl 48ml,Tris5.98g,TEMED 0.46ml,加重蒸水至80ml,调pH6.7,用重蒸水定容至100ml,
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度
由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成「连续系统」和「不连续系统」两种电泳系统。「不连续系统」最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及 pH 不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH 也不相同
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度
(一)原理由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也不
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度(一)
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也不
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度(二)
(三)操作方法1.安装夹心式垂直板电泳槽夹心式垂直板电泳槽操作简单,不易渗漏。这种电泳槽两侧为有机玻璃制成的电极槽,两个电极槽中间夹有一个凝胶模,该模由一个上框形凝胶框、长与短玻璃板及样品槽模板(梳子)所组成。电泳槽由上储槽(白金电极在上或面对短玻璃板),下储槽(白金电极在下或面对长玻璃板)和回纹状
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度(二)
(三)操作方法1.安装夹心式垂直板电泳槽夹心式垂直板电泳槽操作简单,不易渗漏。这种电泳槽两侧为有机玻璃制成的电极槽,两个电极槽中间夹有一个凝胶模,该模由一个上框形凝胶框、长与短玻璃板及样品槽模板(梳子)所组成。电泳槽由上储槽(白金电极在上或面对短玻璃板),下储槽(白金电极在下或面对长玻璃板)和回纹状
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度1
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度(一)
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度(一)
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度(二)
(三)操作方法1.安装夹心式垂直板电泳槽夹心式垂直板电泳槽操作简单,不易渗漏。这种电泳槽两侧为有机玻璃制成的电极槽,两个电极槽中间夹有一个凝胶模,该模由一个上框形凝胶框、长与短玻璃板及样品槽模板(梳子)所组成。电泳槽由上储槽(白金电极在上或面对短玻璃板),下储槽(白金电极在下或面对长玻璃板)和回纹状
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度3
3.制备凝胶板不连续体系采用不同孔径及pH的分离胶与浓缩胶 ,凝胶制备应分2步进行。① 分离胶的制备:根据实验要求,选择最终丙烯酰胺的浓度,本实验需20ml pH8.9 7.0 %PAA溶液,其加胶方式不同于连续系统。混合后的凝胶溶液,用细长头的滴管加至长、短玻璃板间的窄缝内,加胶高度距样品模板
蛋白质技术专题:聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度
(一)原 理由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也不
蛋白质技术专题:聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度
由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中电泳缓冲液的成分、pH也不相同。在
农作物种子纯度鉴定方法综述2
2物理化学鉴定通 过物理化学方法是通过种子在某些特殊的化学药剂中产生特定的反应,测定种子的生理生化指标以鉴定品种纯度。如荧光扫描分析法、苯酚染色法、愈创木酚法等。物理鉴定法,可根据不同品种种子和幼苗含有荧光物质的差异进行鉴定。如利用紫外光处理燕麦种子可产生荧光,根据荧光的有无或强弱可区分不同品种。化
SDSPAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定
一、实验目的与原理蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合物都带上相同密度的负电荷,
铜纯度的鉴定方法
原子吸收法。用原子吸收火花光谱直读仪,很准的,而且很快。在分析天平上称重0.1000g放在烧杯里面,然后加20ml王水,放在电炉上溶完全,配到比色管里面直接就可以拿到仪器上去看了。不过高纯度的还是要用容量法才可以。硫代硫酸纳滴定,具体方法不好说。你还是拿到专门的化验机构去化验吧。
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2DPAGE)
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。通常第一维电泳是等电聚焦,在细管中(φ1~3mm)中加入含有两性电解质、8M的脲以及非离子型去污剂
蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE,polyacrylamide-gel-...2
(3)电荷效应在分离胶中,各种血清蛋白所带静电荷不同,而有不同的迁移率。表面电荷多,则迁移快,反之则慢。因此各种蛋白质按照电荷多少、分子量大小及分子形状以一定顺序排成一个个区带。不连续PAGE所具有的分子筛效应、浓缩效应和电荷效应大大提高了它的分辨率。电泳后蛋白质染色目前常用的是考马斯亮蓝法,其比氨
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2DPAGE)
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。 通常第一维电泳是等电聚焦,在细管中(φ1~3 mm)中加入含有两性电解质、8M的脲以及非
SSR及PAGE电泳2
2、反应混合液配制在0.5mL Eppendorf管中加入下列试剂: 稀释DNA 2 μL primer 各0.5 μL 10×PCR Buffer 2.5 μL dNTP 2 μL MgCl2 1.5 μL Taq酶 0.2 μL
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
原理 聚丙烯酰胺(polyacrylamide,PAA)凝胶是丙烯酰胺(acry—lamide,Acr),在交联剂甲叉双丙烯酰胺(bisacrylamide,Bis)的作用下经聚合而形成的一种大分子化合物。 Acr的聚合作用只有在自由基存在时才能发生,需要一个催化诱发剂系
慧眼识金丨纯度计量助力黄金纯度鉴定
黄金具有重要的货币属性及装饰与保值功能,在人类几千年的历史中始终是财富和华贵的象征。黄金相关国家标准对杂质元素规定了明确的限量,例如,《金条》(GB/T 26021)对银(Ag)、铜(Cu)等十余种杂质元素进行了限量,《高纯金》(GB/T 25933)规定了更多杂质(21种)的限量要求。由于黄金
NativePAGE(非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分类2
1.3.3 实验方法(1)储备液1)200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH10.00,室温2)200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH8.00,室温3)40%丙烯酰胺/双丙烯酰胺2.67C,4℃(新鲜)(2)电泳缓冲液20mM Tris-HCl 1mMNaN3 PH10
PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)实验
【实验原理】聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质。在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的制作是分层进行的,因此凝胶不仅有分子筛效应,还具有浓缩效应。和琼脂糖凝胶相
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语:polyacrylamidegelelectrophoresis,简称page)作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称acr)和交联剂n,n’一亚甲基双丙烯酰胺(简称bis)在催化剂过硫酸铵(ap),n,n,n’,n’四甲基乙二胺(temed)作用
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语:polyacrylamidegelelectrophoresis,简称page)作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称acr)和交联剂n,n’一亚甲基双丙烯酰胺(简称bis)在催化剂过硫酸铵(ap),n,n,n’,n’四甲基乙二胺(temed)作用