rhGH中间体SDSPAGE电泳标准操作规程(SOP)1

目的:规范生长激素中间体的电泳检测一.仪器装置1.电泳仪2.夹心式垂直电泳槽3.玻璃板:长14.5×11.5×2mm、短14.0×11.5×2mm4.可调微量移液器5.微量进样器6.转移脱色摇床二.试剂配制1.丙烯酰胺液(30%T/2.7%C)用天平分别称取58.4g丙烯酰胺(Acr)和1.6g N,N’-亚甲双丙烯酰胺(Bis),溶于120ml温热(37℃左右,以利于溶解Bis)的去离子水中,然后转移至200ml容量瓶中,补加去离子水至刻度,摇匀,用滤纸过滤后,检查其pH值应不大于7.0,贮存在棕色瓶中,4℃保存。每隔2个月重新配制。小心:丙烯酰胺具有神经毒性,操作时应戴手套。如不慎接触皮肤,应立即用水和肥皂清洗。2.分离胶缓冲液(1.5M Tris-HCl,pH8.8)用天平称取36.3g三羟甲基氨基甲烷(Tris),溶于160ml去离子水中,用HCl调pH值至8.8~8.9(先加5ml浓HCl,再逐滴加1M HCl调节......阅读全文

拜耳Clinitek500尿液分析仪标准操作规程(SOP)

1 目的:保证拜耳Clinitek-500尿液化学分析仪的正确操作,保证检验结果的准确可靠。2 适用范围:临床血液实验室3 项目名称:尿液检验(10项:葡萄糖,胆红素,酮体乙酰乙酸,比重,隐血,PH,蛋白质,尿胆元,亚硝酸,白细胞)4 项目方法: 拜耳Clinitek-500尿液化学分析仪是一种半自

血疟原虫检查操作规程(sop)

1. 目的:通过查找血液涂片中疟原虫,为临床疟疾的感染提供辅助诊断。2.实验原理:应用瑞氏染色原理对制备好的厚血片和薄血片进行染色后在显微镜下查找疟原虫。3.标本采集3.1标本采集前病人的准备:间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血;恶性疟患者,应在发作后20小时左右采血。3.2标本种类

尿液培养操作规程之SOP文件

1 检验目的    做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。患有泌尿系感染时,尿中的数高于104/mL,以此作为诊断泌尿系感染依据。2 原理使用BACT-IST黑马微生物鉴定系统,原理见鉴定系统操作规程 。3 标本要求    (1)标本类型

TGAb测定操作规程SOP

一.原理  利用人血清中TG抗体与其示踪物125I-TG进行特异结合反应,形成125I-TG-Ab复合物,然后加入免疫分离剂。复合物被沉淀下来,而游离的示踪物留在上清液中,离心弃上清液,测定沉淀物放射性,即能反映出血清中TG抗体的含量。二.标本采集与处理:样本采集后,应尽快分离血清。三.仪器设备和试

液相色谱仪操作规程(SOP)

 一.开机   1.打开送液泵电源,打开排液阀(反时针旋转180度),按purge键进行排气泡的操作,确认输液管路中无气泡时停止该操作,将排液阀旋回到原位置。   2. 设定流速,平衡柱子30分钟  [Func]+“流速”+[enter]     3. 打开检测器电源,设定波长 [Func]+“波长

SDS-PAGE电泳的免疫反应

  1、将膜用TBS从下向上浸湿后,移至含有封闭液的平皿中,室温下脱色摇床上摇动封闭1h。  2、将一抗用TBST稀释至适当浓度(在1.5ml离心管中);撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验台面上,四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整;将抗体溶液加到保鲜膜上;从封闭液中取出膜,用滤纸吸去残留液后,将膜蛋白面

SDS-PAGE电泳的操作步骤

1、清洗玻璃板一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。2、灌胶与上样(1)玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶(操作时要使两玻璃对齐,以免漏胶)。垂直电泳槽(2) 按前面方法配10%分离胶,加入TEMED后立即摇匀即可

SDS-PAGE电泳的操作步骤

1、清洗玻璃板一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。2、灌胶与上样(1)玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶(操作时要使两玻璃对齐,以免漏胶)。垂直电泳槽(2) 按前面方法配10%分离胶,加入TEMED后立即摇匀即可

生物安全柜SOP文件(操作规程)

  1、操作前应将本次操作所需的全部物品移入安全柜,避免双臂频繁穿过气幕破坏气流;并且在移入前用70% 酒精擦拭表面消毒,以去除污染。   2、打开风机5~10分钟,待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内,少静止1分钟,使柜内气流稳定后再进行操作。   3、安全柜内不放与本

生物安全柜SOP文件(操作规程)

1、操作前应将本次操作所需的全部物品移入安全柜,避免双臂频繁穿过气幕破坏气流;并且在移入前用70% 酒精擦拭表面消毒,以去除污染。   2、打开风机5~10分钟,待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内,少静止1分钟,使柜内气流稳定后再进行操作。   3、安全柜内不放与本次实

独立通风笼盒(IVC)操作规程(SOP)

一、目的:保持动物有舒适的生活环境,避免动物受病源微生物的影响。二、背景知识:20世纪80年代,意大利Thcniplast公司,在带空气过滤帽塑料盒的盒帽上方加了一个进风口,希望促进盒内的通风换气,从而出现了第一个独立通气笼盒(Individually Ventilated Cages,IVC)。I

蛋白质的SDSPAGE电泳

按所用小型平板凝胶装置调整溶液体积,胶板大小约在 8X10X0.15 cm。在此大小范围内有几种形式可以利用。制胶的装置有玻璃板、塑料隔条(通常厚度为 0.1~0.2 cm) 和铸胶时成孔用的 Teflon 梳子。下面逐步示教 SDS-PAGE 的操作程序。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者

sdspage凝胶电泳怎么制备

SDS-PAGE电泳可用于分离蛋白质和核苷酸,这里综述了SDS-PAGE实验原理、试剂和器材、以及实验操作步骤。一.实验原理:SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结

电泳跑胶SDSPAGE的定义

聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由shapiro建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶

IEF/SDSPAGE双向电泳法

1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳(管柱状)为第一向,SDS-PAGE为第二向(平板)。在进行第一向IEF电泳时,电泳体系中应加入高浓度尿素、适量非离子型去污剂NP-40。蛋白质样品中除含有这两种物质外

电泳跑胶SDSPAGE的定义

SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳详细资料如下:聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由s

蛋白质的SDSPAGE电泳

蛋白质的SDS-PAGE电泳             试剂、试剂盒 过硫酸铵 含 2-巯基乙醇的样品缓冲液

SDS-PAGE电泳法的实验步骤

1、清洗玻璃板一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。2、灌胶与上样(1)玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶(操作时要使两玻璃对齐,以免漏胶)。垂直电泳槽(2) 按前面方法配10%分离胶,加入TEMED后立即摇匀即可

蛋白质的SDSPAGE电泳

试剂、试剂盒 过硫酸铵含 2-巯基乙醇的样品缓冲液样品缓冲液 (2X) 储液电泳缓冲液电极缓冲液压缩胶缓冲液分离胶缓冲液实验步骤 铸分离胶(下层胶)装置的清洗为使角蛋白的污染减至最少,将玻板、梳子和隔条浸泡在含强碱性去垢剂〔2%RBS 35 液(Pierce Chemical Co.)〕提浓物的

SDSPAGE的配制及电泳实验

实验原理SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapir0建立,其原理:聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N’,N’四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持

电泳技术原理SDSPAGE和琼脂糖电泳

带电物质在电场中向其所带电荷相反的电极移动的现象称电泳。电泳分离生物大分子的原理:  由于混合物中各组分所带电荷性质、电荷数量以及分子量的不同,在同一电场的作用下,它们泳动的方向和速度也不同。因此,在一定时间内各组分移动的距离不同,从而达到分离和鉴定的目的。该文件主要介绍:SDS-PAGE凝胶电泳琼

生物安全柜SOP文件的操作规程

1、操作前应将本次操作所需的全部物品移入安全柜,避免双臂频繁穿过气幕破坏气流;并且在移入前用70% 酒精擦拭表面消毒,以去除污染。   2、打开风机5~10分钟,待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内,至少静止1分钟,使柜内气流稳定后再进行操作。 3、安全柜内不放与本次实验

固相微萃取装置(SPME)操作规程SOP

  固相微萃取装置(SPME)操作规程SOP  固相微萃取装置(SPME)︰具有免溶剂、快速、萃取简单、可现场携带采样之仪器。可应用在非常多的领域;如药物分析、食品  分析、环境污染分析(VOC、PAH、PCB、有机氯、有机磷杀虫剂)等等。  一、安装程序  (A) 先将Holder下方黑色保护套管

移液器使用标准规程-(SOP)

为了帮助大家建立一个移液器使用、维护保养的标准操作程序,使操作过程标准化,莱贝整理了以下移液器使用标准规程(SOP):在讲述移液器使用标准规程之前,我们先要了解移液循环的过程。一个完整的移液循环,包括吸头安装——容量设定——预洗吸头——吸液——放液——卸去吸头等六个步骤。而每一个步骤都有需要遵循的操

SDSPAGE电泳的基本原理

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电

SDS-PAGE电泳的基本原理

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS(十二烷基硫酸钠),SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物,这种复合

SDSPAGE蛋白电泳配胶不凝固

我分析原因是过硫酸胺失效,过硫酸氨最好是先用现配,如果怕麻烦而且跑胶的频率很高的话,那么用完之后ap要放在4℃保存,一周之后必须新配。另外可以适当的增加temed的量,从5μl提高到8μl并无大碍。如你所说,是不是就是ap失效呢,还有,我强烈建议你复查一边浓缩胶,分离胶各各buffer的组分是否配制

SDSPAGE凝胶电泳及蛋白印记

①10×Running Buffer将144g Glycine、30.2g Tris Base、10g SDS溶解于1L双蒸水中。使用时稀释10倍②1×Transfer Buffer将3.03g Tris Base、14.4g Glycine溶解于500mL双蒸水中,加入200mLMethanol,

SDSPAGE电泳的基本原理

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电

知识分享:SDSPAGE的配制及电泳

  实验原理   SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapir0建立,其原理:聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N’,N’四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,