凝胶过滤(分子筛层析或凝胶层析)原理和实验方法

凝胶层析又称为分子筛层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广,商品名是sephadex型号很多,从G10到G200,它的主要应用范围是:①分级分离各种抗原与抗体;② 去掉复合物中的小分子物质。如除盐、荧光素和游离的放射性同位素以及水解的蛋白质碎片;③分析血清中的免疫复合物;④分子量的测定。 (一)原理 凝胶是一种多孔性的不带表面电荷的物质,当带有多种成分的样品溶液在凝胶内运动时,由于它们的分子量不同而表现出速度的快慢,在缓冲液洗脱时,分子量大的物质不能进入凝胶孔内,而在凝胶间几乎是垂直的向下运动,而分子量小的物质则进入凝胶孔内进行“绕道”运行,这样就可以按分子量的大小,先后流出凝胶柱,达到分离的目的。 (二)葡聚糖凝胶的种类与性能 葡聚糖又名右旋糖酐,在它们的长链间以三氯环氧丙烷交联剂交联而成。葡聚糖凝胶具有很强的吸水性,交联度大,吸水性......阅读全文

液体过滤器精密过滤器的保养方法

  1、精密过滤器滤芯pp熔喷是核心部位,过滤芯由特殊的材料组成,属宜损件,需特别保护;  2、当精密过滤器工作一段时间后,过滤器滤芯拦载了一定量的杂质,这时压力降增大,流速会下降,需及时清除过滤器内的杂质,同时要清洗滤芯;  3、在清除杂质时,特别注意精密滤芯,不得变形或损坏,否则,再装上去的滤芯

过滤器的过滤效果有几种表达方法?

过滤器的过滤效果有以下几种表达方法:效率、穿透率和净化系数。1、效率当被过滤气体中的含尘浓度以计重浓度来表示时,则效率为计重效率;以计数浓度来表示,则效率为计数效率;当含尘浓度用其它物理量相对表示时,则效率为比色效率或浊度效率等。(1)用过滤器进出口气流中的含尘浓度来表示,即:式中,G1、G2为过滤

油雾过滤器安装维护事项和过滤原理

在油雾过滤器安装过程中,如果是用耐油弹性软管来连接机床油雾过滤器的进风口与机床排雾口,软管不允许出现弯折,以免油雾充堵于软管内难以排到机床油雾过滤器中进行处理。机床排雾口应设置于产生油雾量最大处以提高油雾处理效率。在此基础上,确保机床油雾过滤器的电机转向——从主机进口方向看电机的转向与主机的指示方向

过滤器有哪些作用-过滤器作用介绍

  现在泳池里面的水都是循环使用的,通过泳池里面的水循环系统,将水回收,过滤消毒再次投入使用以节约水资源,也是为了更好地节约成本。这就要求有好的过滤器来确保水质安全。  泳池水循环— 过滤器  过滤器是利用特殊的滤沙将池中的微小污物消除。滤沙作为清除污物的介质,被装填在过滤器内的腔体内。当控制旋钮打

水过滤器的三个过滤过程

过滤过程原水从进水口流入,进入过滤器滤筒内部,然后自内而外的通过滤桶,杂质被拦截在过滤筒内壁,过滤后的干净水从出水口流出,当滤筒内壁的杂质越积越多,在滤筒内表面形成滤饼,并使滤筒内外逐渐形成压差,当压差达到压差控制器预设值时,将启动自清洗过程。自清洗过程水过滤器的自清洗过程是依靠沿着滤筒内表面做螺旋

针头过滤器如何操作可达到过滤效果?

针头过滤器天然疏水,优异,的耐热性和耐化学性,高强度和孔隙率,高流速,低溶出物,低蛋白吸附,颗粒截留率:>99.99%,应用于常规过滤(水和有机物),气体过滤,腐蚀性液体过滤,极性溶剂过滤,生物领域的无菌过滤,HPLC 里的样品制备针头过滤器按照这些步骤操作可达到过滤效果:1、在吸入样品前,先吸取大

凝胶成像种类

1)UV凝胶成像分析系统:可以对蛋白电泳凝胶,DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析,样品包括:EB、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸监测;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各种染

凝胶纯化实验

            试剂、试剂盒 蒸馏水 乙醇 甲酰胺 胶的缓冲液 亚甲基蓝 十二烷基硫酸钠储存液 TAE 缓冲液 Tris

凝胶成像定义

  图像分析程序,适用于ID胶、斑点/狭缝印迹、平板、菌落、放射自显影、多排胶、蛋白胶、GFP、PCR、考马斯亮蓝及银染的胶及ZYMA胶;可进行凝胶图像分析、克隆计数分析、手动条带定量和斑点分析。

凝胶色谱现状

由于历史原因,凝胶色谱的理论发展、实验技术和应用开发主要在生物化学和高分子化学领域内,对这项技术,不同工作者采用了不同的命名,从而造成了文献中命名方面的混乱。文献中用过的名称有:凝胶过滤( Gel Filtration)、分子筛过滤(Molecular Sieve Filtration)、分子筛色谱

凝胶纯化实验

试剂、试剂盒 蒸馏水乙醇甲酰胺胶的缓冲液亚甲基蓝十二烷基硫酸钠储存液TAE 缓冲液Tris 乙酸盐乙酸纳EDTA蓝色葡聚糖TEN 缓冲液40mer聚丙烯酰胺胶仪器、耗材 解剖刀UV 灯过滤 UV 的安全破璃实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂蒸馏水乙醇,95%甲酰胺 (使用安珀莱特单床离子交换

凝胶色谱柱

凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶处理可分

凝胶成像品牌

凝胶成像仪属于高科技产品,是需要软、硬件紧密一致配合的高端分子生物分析仪器。主要用于科研、医疗、教学等项目,目前国内进口品牌和国产品牌的市场占有率差不多。目前凝胶成像厂家很多,市场上常见的凝胶成像如:进口品牌进口品牌美国的市场上见的是相对比较多的有:UVP、伯乐、alpha、SIM、KODAK、GE

凝胶色谱柱

分类      根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、

凝胶渗透色谱

凝胶渗透色谱凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离油

凝胶渗透色谱

凝胶渗透色谱 定义:凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography、GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物。(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开)原理:1、

凝胶选择指导

Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶,包括不同的成分,百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度,缓冲系统,上样孔格式以及胶的厚度,对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。E-PAGE™ 96 High-Throughput System是整合的

凝胶电泳

以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大,对一般蛋白质不起分子筛作用,但适用于分离同工酶及其亚型,大

如何制作凝胶

  原料列表:  1、 高分子胶 ------------------------------- 0.5g(1/2匙)  1g-6.00元  2、 纯水或蒸馏水 --------------------------- 83ml  自备-0.00元 缺 货  3、 三乙醇胺 -------------

凝胶色谱讲义

第一章  前言一、高聚物及多糖平均分子量及其分布1、高聚物的平均分子量除天然聚合物外,合成聚合物都是以单体为原料经过聚合反应而制得的。每个聚合物分子都是由数目很大的单体分子加成或缩合而成,所以合成聚合物的分子量比单体要大千百倍甚至成万倍。另一方面,根据绝大多数的聚合反应机理预示,生成的聚合物的分子量

如何制作凝胶

  原料列表:  1、 高分子胶 ------------------------------- 0.5g(1/2匙)  1g-6.00元  2、 纯水或蒸馏水 --------------------------- 83ml  自备-0.00元 缺 货  3、 三乙醇胺 -------------

凝胶的选择

凝胶的选择根据所需凝胶体积,估计所需干胶的量。 一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍,例如Sephadex G-20的吸水量为20,1 克Sephadex G─200吸水后形成的凝胶体积约40ml。凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细胞分离效果好,但阻力大,流速慢。一般实验室分离蛋白质

凝胶色谱(图)

原理: 以多孔性物质作固定相,样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力(吸附、分配和离子交换等),因而凝胶色谱又常被称作体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内,迅速流出色谱柱

凝胶纯化实验

试剂、试剂盒蒸馏水乙醇甲酰胺胶的缓冲液亚甲基蓝十二烷基硫酸钠储存液TAE 缓冲液Tris 乙酸盐乙酸纳EDTA蓝色葡聚糖TEN 缓冲液40mer聚丙烯酰胺胶仪器、耗材解剖刀UV 灯过滤 UV 的安全破璃实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂蒸馏水乙醇,95%甲酰胺 (使用安珀莱特单床离子交换树脂

凝胶色谱(图)

原理: 以多孔性物质作固定相,样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力(吸附、分配和离子交换等),因而凝胶色谱又常被称作体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内,迅速流出色谱柱,不能被分离。比固定相孔径

如何选择凝胶

生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性,然后通过实验选择出最有效的纯化流程。       1.测定------分子量、PI        当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时,可用PAGE电泳方法

凝胶色谱柱

分类 根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子

凝胶的制备

凝胶的制备商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀,可用加热法,即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸,这样可大大中速膨胀,通常在1-2小时内即可完成。特别是在使用软胶时, 自然膨胀需24小时至数天,而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间,而且还可消毒,除去凝胶中

琼脂糖凝胶电泳仪凝胶种类

琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳,广泛用于核酸的研究。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖,是由1,3连接的β-D吡喃半乳糖和1,4连接的3,6脱水β-D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束,而形成大网孔型凝胶。 一、高纯度琼脂糖

琼脂糖凝胶电泳仪凝胶种类

 琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳,广泛用于核酸的研究。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖,是由1,3连接的β-D吡喃半乳糖和1,4连接的3,6脱水β-D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束,而形成大网孔型凝胶。一、高纯度琼脂糖凝胶