免疫球蛋白IgG的提取3

五、蛋白质的盐析法向蛋白质溶液中加入不同浓度的中性盐,可以把不同的蛋白质分别沉淀出来。这种方法称为蛋白质的盐析。利用蛋白质的盐析法,可以得到我们所需的不同的免疫球蛋白。最常用的中性盐包括,硅酸铵、硫酸镁、硫酸钠等,其中以硫酸铵最为常用:(一)、优点1、在水中溶解度大,其饱和溶液含有大量盐;2、在水中的溶解度受温度的影响很小;3、一般不会引起蛋白变性。(二)、缺点提取的纯度较差,所以只能用它作为粗提。饱和硫酸铵溶液配法:取760g~800g硫酸铵,放人70~80℃蒸馏水1000mL中,搅拌约20min,室温静置过液,硫酸铵结晶析出,即上清为饱和硫酸铵,再用NH40H调pH为7.0。 六、实验内容 (一)稀释血清 向血清中加入生理盐水,做1︰1稀释,主要目的,以防蛋白质溶液浓度过稠,引起其它蛋白质共沉,或局部蛋白质变性。 (二)用50%饱和度硫酸铵提取免疫球蛋白 将用生理盐水按l︰1稀释的动物血清置于三角烧瓶或烧......阅读全文

免疫球蛋白IgG的提取3

五、蛋白质的盐析法向蛋白质溶液中加入不同浓度的中性盐,可以把不同的蛋白质分别沉淀出来。这种方法称为蛋白质的盐析。利用蛋白质的盐析法,可以得到我们所需的不同的免疫球蛋白。最常用的中性盐包括,硅酸铵、硫酸镁、硫酸钠等,其中以硫酸铵最为常用:(一)、优点1、在水中溶解度大,其饱和溶液含有大量盐;2、在水中

免疫球蛋白IgG的提取3

五、蛋白质的盐析法 向蛋白质溶液中加入不同浓度的中性盐,可以把不同的蛋白质分别沉淀出来。这种方法称为蛋白质的盐析。 利用蛋白质的盐析法,可以得到我们所需的不同的免疫球蛋白。最常用的中性盐包括,硅酸铵、硫酸镁、硫酸钠等,其中以硫酸铵最为常用: (一)、优点 1、在水中溶解度大,

免疫球蛋白IgG的提取1

一、目的及要求了解和掌握免疫球蛋白的提取方法。 二、概 念 抗体是在抗原物质刺激下,人或脊椎动物免疫系统的浆细胞产生的,能与抗原发生特异性反应的免疫球蛋白,主要存在于人和动物的血清及其体液中。 三、免疫血清的制备 (一)动物的选择 实验室常用的动物是家兔和羊,有时也用豚鼠或鸡,大

免疫球蛋白IgG的提取2

(五)免疫的具体方法1、直接法免疫血清的制备取体重2~3Kg的雄鸡1只,免疫前采血8~10mL,测其正常抗体。静脉注射新城疫弱毒新鲜尿囊液病毒2mL,同时腹腔注射8mL,2~4d后同法再免疫一次。第二次免疫后七天试血,血清凝集价在1︰320以上为合格即可全采血;如果不合格,可在第二次免疫后10d左右

免疫球蛋白提取技术:IgG的分离与提纯2

⑴ 区带电泳:玻片琼脂或醋酸纤维膜电泳均可。加样电泳后,只在γ—球蛋白的迁移部位出现一条带。操作时,同时可用全血清样品,不同浓度 (NH4)2SO4盐析样品进行电泳,以资比较。⑵ 琼脂双相双扩散鉴定:预先准备该IgG免疫异种动物所获的抗IgG血清。将IgG与抗 IgG血清进行双相双扩散,如IgG提纯

免疫球蛋白提取技术:IgG的分离与提纯1

免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数

猪免疫球蛋白G3(IgG3)酶联免疫分析(ELISA)

猪免疫球蛋白G3(IgG3)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G3(IgG3)含量。实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪免疫球蛋白G3(IgG3)水平。用纯化的猪IgG3抗体包被微孔

IgG的简易快速提取法

应用硫酸铵盐析及DEAE-纤维素层析法提纯化的IgG,不仅操作复杂、需时较长,处理过程中样品体积大大增加,而且透析时变性严重,容易引起抗体效价降低等。为了克服这一不足,特别是当大量提取IgG时,则往往采取下列的简易办法。一、DEAE-纤维素直接提取法取样品直接过DEAE-纤维素柱。下面介绍的是最为简

免疫球蛋白G(IgG)的纯化

抗大鼠ic链单克隆抗体交联琼脂糖凝胶亲和层析实验步骤 一般情况下,单 克 隆 抗 体(尤其是大鼠源性)不能用 蛋 白A 或 蛋 白 G 交联琼脂糖凝胶层析纯化,在此情况下,可使用抗大鼠Ig 轻链单克隆抗体交联琼脂糖凝胶层析柱来结合组织培养上清或腹水中的大鼠单克隆抗体,然后用逐步降低洗脱液p H 的方

血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定3

一、试剂和器材1.试剂(1)消化液30%过氧化氢与硫酸与水的比例为3:2:1,即在1 份的蒸馏水中缓慢加入2 份的硫酸,待冷却后,将其加到3 份的过氧化氢中。临用时配制。(2) 催化剂 硫酸铜(CuSO4·5H2O )与硫酸钾(K2SO4)以1 : 3 配比研磨混合。(3)40 %氢氧化钠溶液 (4

人免疫球蛋白G3(IgG3)ELISA试剂盒使用说明

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G3(IgG3)水平。用纯化的人IgG3抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G3(IgG3),再与HRP标记的IgG3抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化

免疫球蛋白G(IgG)测定的介绍

  免疫球蛋白G(IgG)(immunoglobulin G,IgG):是血清中免疫球蛋白主成分,约占血清中免疫球蛋白总含量的75%,正常值为9.5~12.5mg/ml。其中40~50%分布于血清中,其余分布在组织中。分子量约为150000道尔顿。人类血清中的IgG主要为单体,正常人的IgG包括四个

血清免疫球蛋白G(IgG)的概述

  免疫球蛋白G(IgG)是在脾脏和淋巴结中合成,在人体血清中的含量最高(占Ig量的75%),而且在血清中半衰期长,主要分布在血清和组织液中,是抗细菌、抗毒素和抗病毒抗体的主要组成部分,也是机体抗感染免疫的过程中的重要物质基础。由于IgG的含量最高,是人体免疫反应的最重要的物质基础,而且它也是唯一能

血清免疫球蛋白G(IgG)参数

  免疫比浊法、单向免疫扩散法  脐带7.6~17g/L(760~1700mg/dl)。  新生儿7~14.8g/L(700~1480mg/dl)。  0.5~6个月3~10g/L(300~1000mg/dl)。  6个月~2岁5~12g/L(500~1200mg/dl)。  2~6岁5~13g/L

血清免疫球蛋白G(IgG)的相关疾病

  小儿共济失调毛细血管扩张Ⅰ型综合征,迟发性低丙球血症,原发性免疫缺陷病,选择性IgA缺乏症,自身免疫性胰腺炎,小儿自身免疫性溶血性贫血伴血小板减少综合征,小儿普通易变型免疫缺陷,小儿选择性免疫球蛋白A缺乏症,小儿选择性免疫球蛋白G亚类缺陷病,小儿X-连锁无丙种球蛋白血症

血清免疫球蛋白IgG4的认识

IgG4相关疾病的认识IgG4相关疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)是一组2010年首次命名的系统性炎症纤维化疾病,已受到国内外学者的广泛关注,是一组原因不明的慢性进行性自身免疫性疾病。其受累器官广泛,几乎可累及全身各个器官,多器官同时或相继受累,也可只累及某一器官,可

免疫球蛋白G(IgG)的医学决定水平

参考值 7.0~16.0g/L(免疫比浊法)     决定水平 临床意义及措施     6.0g/L 低于此值多与免疫缺陷病有关     17.0g/L 此水平明显高于参考范围上限,多怀疑有IgG型骨髓瘤,此时应通过骨髓细胞学检查、血清蛋白电泳和免疫电泳来协助诊断。     50g/L 高于此值应高

IgG抗体的粗提法提取球蛋白

  大多用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。硫酸铵盐析须经过多次沉淀,第一次用40%饱和度,第二次用35%饱和度,第三次用33%饱和度,经三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸钠法更简便,用20%即可将γ球蛋白沉淀出来。经盐析后的γ球蛋白虽大多属于IgG,但还有5%其他区带蛋白,如γ区的杂蛋白。又因I

免疫球蛋白G(IgG)临床意义

正常参考范围:6~16g/L临床意义:免疫球蛋白的血清含量与年龄有一定关系,儿童偏低,随着年龄的增长其含量逐渐升高。增高:见于IgG型多发性骨髓瘤、慢性肝病、慢性感染、结缔组织病、过敏性紫癜、恶性淋巴瘤、牛皮癣、麻风病、疟疾、肾炎。减低:先天性免疫缺陷病、肾病综合征、病毒感染、蛋白丢失性疾病、免疫抑

人体血清免疫球蛋白IgG是什么?

人体血清免疫球蛋白IgG是什么?人体血清免疫球蛋白IgG是初级免疫应答中最持久、最重要的抗体,它仅以单体形式存在。血清中含量最高的免疫球蛋白,是血液和细胞外液中的主要抗体。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗体属于IgG,它在抗感染中起到主力军作用,它能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用(调理作用),中和细菌毒

脑脊液免疫球蛋白IgG高说明什么

  脑脊液免疫球蛋白IgG升高可能是中枢神经系统感染。脑脊液IgG指数偏高,是指脑脊液具有自身合成免疫球蛋白的功能。出现这种情况是提示自身免疫性的中枢神经疾病,最多见的叫做多发性硬化。多发性硬化是指大脑中枢神经的一种脱髓鞘,是由于自身免疫的因素而造成,需要进行免疫治疗。

免疫球蛋白检测项目介绍血清免疫球蛋白G(IgG)

血清免疫球蛋白G(IgG)介绍: 免疫球蛋白G(IgG)是在脾脏和淋巴结中合成,在人体血清中的含量最高(占Ig量的75%),而且在血清中半衰期长,主要分布在血清和组织液中,是抗细菌、抗毒素和抗病毒抗体的主要组成部分,也是机体抗感染免疫的过程中的重要物质基础。由于IgG的含量最高,是人体免疫反应的最重

免疫球蛋白提取技术

实验材料 动物血清初乳胆汁试剂、试剂盒 硫酸铵NH4OHPBSNaH2PO4NaH2PO42H2OBaCl2HgIKIHClNaOHPBDEAE52葡聚糖凝胶G200无水硫酸钠硼酸盐缓冲液仪器、耗材 离心机透析袋低温冰箱电泳槽电泳仪

免疫球蛋白提取技术

免疫球蛋白提取技术可应用于:(1)推知机体的体液免疫功能;(2)诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。实验方法原理随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数采用二步法以上相结合的方法,特别是以硫酸铵提纯为基础,再经过层析柱的方法来提高免

免疫球蛋白提取技术

免疫球蛋白提取技术             实验方法原理 随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数采用二步法以上相

免疫球蛋白G(IgG)测定的临床意义

  增高:多发性骨髓瘤、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、慢性肝炎活动期、各种感染。  降低:肾病综合征、肠淋巴管扩张、淋巴管肉瘤、霍奇金氏病、自身免疫病、原发性无丙种球蛋白血症、继发性免疫缺陷等。

免疫球蛋白G(IgG)测定的参考值

  免疫透射比浊法:0-1岁:2.32-14.11g/L;1-4岁:4.53-9.16g/L;4-7岁:5.04-14.64g/L;7-10岁:5.72-14.74g/L;10-12岁:6.98-15.60g/L;12-14岁:7.59-15.49g/L;14-16岁:7.16-17.11g/L;1

关于血清免疫球蛋白G(IgG)的基本介绍

  免疫球蛋白G(IgG)是在脾脏和淋巴结中合成,在人体血清中的含量最高(占Ig量的75%),而且在血清中半衰期长,主要分布在血清和组织液中,是抗细菌、抗毒素和抗病毒抗体的主要组成部分,也是机体抗感染免疫的过程中的重要物质基础。由于IgG的含量最高,是人体免疫反应的最重要的物质基础,而且它也是唯一能

血清免疫球蛋白G(IgG)的注意事项

  一、抽血前的注意事项  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。  3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。  二、抽血后应注意  1、抽血后,需在针孔

血清免疫球蛋白G(IgG)的临床意义

  (1)升高:  ①结缔组织病:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、硬皮病、Sjögren综合征(斯约格伦氏综合征、干燥综合征)等。  ②IgG型多发性骨髓瘤、原发性单克隆丙种球蛋白血症。  ③肝脏病:慢性病毒性活动性肝炎、隐慝性肝硬化、狼疮样肝炎等。  ④传染病:结核、麻风、黑热病、传染性单核细胞增