能影响酶免疫测定结果的标本外源性干扰因素

外源性干扰因素包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长和标本凝固不全等。 1.标本溶血 要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。 2.标本被细菌污染 样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的p—半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。 3.标本贮存时间过长 标本在2~8~C下保存时间过长,IgG可聚合成多聚体,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性。血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8~C下保存1周,如为有菌操作,则建议冷冻保存。样本的长时间保存,应在一70~C以下。 4.......阅读全文

人降钙素(PCT)酶联免疫分析

人降钙素(PCT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中降钙素(PCT)含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人降钙素(PCT)水平。用纯化的人降钙素(PCT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依

免疫酶细胞化学实验技术4

三、ICC在细胞功能研究中的应用  形态学研究目的之一是揭示组织细胞结构特征及其功能意义。利用ICC显示给与细胞增殖标记物,是组织细胞学研究中形态和功能相结合的重要手段之一。目前常用的细胞增殖标记物有4种,Brdu (5—bromo—2--deoxyuridine), DNA polymerase

人肝糖原酶联免疫分析

人肝糖原酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中肝糖原的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肝糖原水平。用纯化的人肝糖原抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肝糖原,再与HRP标记

人褪黑素-(melatonin)酶联免疫分析

人褪黑素 (melatonin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,组织及相关液体样本中褪黑素 (melatonin)的含量。实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人褪黑素 (melatonin)水平。用纯化的人褪黑素(melato

犬醛固酮(ALD)酶联免疫分析

犬醛固酮(ALD)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定犬血清,血浆及相关液体样本中醛固酮(ALD)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬醛固酮(ALD)水平。用纯化的犬醛固酮(ALD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中

关于酶免疫技术的分类介绍

  酶免疫技术一般分成酶免疫组化技术和酶免疫测定两大类。酶免疫组化技术与荧光抗体技术相似,酶标记抗体与组织切片上的抗原起反应,然后与酶底物作用,形成有色沉淀物,可以在普通光学显微镜下观察。如酶作用的产物电子密度发生一定的改变,则可用电子显微镜观察,称为酶免疫电镜技术。  酶免疫测定根据抗原抗体反应后

酶联免疫法的检测方法

  双抗体夹心法  双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:  一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。  二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。  三、加酶标抗

人梅毒(TPPA)酶联免疫分析

人梅毒(TPPA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中梅毒(TPPA)水平。实验原理:  本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人梅毒(TPPA)。用纯化的人梅毒(TPPA)抗体包被微孔板,制成

桔霉素(Citrinin)酶联免疫分析

桔霉素(Citrinin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中桔霉素(Citrinin)残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有桔霉素(C

免疫酶细胞化学实验技术3

一、对照实验  1.吸收实验  应用尚无文献报告的抗血清/自己制备的抗血清进行ICC染色时,需用相应的抗原吸收抗血清后,再孵育标本,判断结果的可信性(结果应为阴性)。常用的吸收实验分固相吸收和液相吸收两种(见本书第一章 ),对于不能形成沉淀,难以用离心沉降法分离的一些小分子多肽类抗原,以固相吸收为佳

免疫酶技术的具体步骤

ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对照孔中加

大鼠降钙素(CT)酶联免疫分析

大鼠降钙素(CT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中降钙素(CT)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠降钙素(CT)水平。用纯化的大鼠降钙素(CT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依

酶联免疫法的效果测定

  酶标抗体标记效果测定:测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。

酶联免疫法的检测步骤

  ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性

人疟疾抗原酶联免疫分析

人疟疾抗原酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中疟疾抗原。实验原理:  本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人疟疾抗原。用纯化的疟疾抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中疟疾相结合,经洗涤除去

免疫酶组织化学技术

免疫酶组织化学技术 1.酶标直接法和间接法 Nakane(1966)将辣根过氧化物酶(HRP) 标记在抗体免疫球蛋白分子上,创建了酶标记免疫组化的直接法、间接法和桥法。 2.PAP法 Stemberger(1969)在酶桥法的基础上,建立了非标记抗体法,先将HRP免

大鼠醛固酮(ALD)酶联免疫分析

大鼠醛固酮(ALD)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中醛固酮(ALD)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠醛固酮(ALD)水平。用纯化的大鼠醛固酮(ALD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗

酶联免疫法的检测步骤

  ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性

酶联免疫检测仪

  为保证测量数据的准确可靠,开机后应预热15分钟以上。   1.波长设定   在开机或复位状态下,按屏幕提示操作即可。波长一经设定好,则全部功能均为在该波长下的操作。显示波长应与仪器上安装的滤光片波长相一致。   2.手动测量   该功能只测样品的吸光度值,按一次测量键显示一个OD值,不打

小鼠褪黑素-(melatonin)酶联免疫分析

小鼠褪黑素 (melatonin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,组织及相关液体样本中褪黑素 (melatonin)的含量。实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠褪黑素 (melatonin)水平。用纯化的小鼠褪黑素 (m

酶免疫技术中酶和酶作用底物是怎么样的呢?

  酶和酶作用底物  (一)酶的要求:  一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:  1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。  2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。  3.作用专一性强 ,酶活性不受样品

犬免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析(ELISA)

犬免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定犬血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)含量。实验原理:    本试剂盒应用间接法测定标本中犬免疫球蛋白G(IgG)水平。用纯化的犬IgG抗体包被微孔板,制成固相抗体,往

免疫学实验固相酶免疫测定技术介绍

  固相酶免疫测定技术介绍:   固相酶免疫测定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被),并保持其免疫活性;用酶标记(另一种)抗原或抗体,保留其免疫活性和酶活性;在测定时,把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起

猪免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫分析(ELISA)

猪免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定猪血清,脾B细胞及相关液体样本中免疫球蛋白M(IgM)含量。实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪免疫球蛋白M(IgM)水平。用纯化的猪免疫球蛋白M(IgM)抗体包

小鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析(ELISA)

小鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白E(IgE)含量。实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用纯化的IgE抗体包被微孔板,制成固

人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析(ELISA)

人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G(IgG)水平。用纯化的抗-IgG抗体包被微孔板,制成固相抗体,

酶联免疫检测仪的免疫诊断方法

  我国免疫诊断方法主要有如下三种:酶免(EIA)、放免(RIA)和发光,在市场上的情况如下:  方法所处市场周期  放免衰退期  酶免成长期  发光进入期  放免技术由于试剂的污染和有效期等问题在国际和国内市场逐渐被淘汰,而化学发光试剂和设备比较昂贵,使得其在国内的普及特别在计生系统普及需要较长时

鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)酶联免疫分析(ELISA)

鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定鸡血清,血浆及相关液体样本中卵黄免疫球蛋白(IgY)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)水平。用纯化的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)抗体包被

小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫分析(ELISA)

小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白M(IgM)含量。实验原理:    本试剂盒应用间接法测定标本中小鼠免疫球蛋白M(IgM)水平。用纯化的小鼠IgM抗体包被微孔板,制成固相

大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)酶联免疫分析

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,组织及相关液体样本中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平。用纯化的大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗