能影响酶免疫测定结果的标本外源性干扰因素
外源性干扰因素包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长和标本凝固不全等。 1.标本溶血 要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。 2.标本被细菌污染 样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的p—半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。 3.标本贮存时间过长 标本在2~8~C下保存时间过长,IgG可聚合成多聚体,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性。血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8~C下保存1周,如为有菌操作,则建议冷冻保存。样本的长时间保存,应在一70~C以下。 4.......阅读全文
酶联免疫法的原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原
免疫多聚酶链反应
实验概要免疫多聚酶链反应(PCR)是一种抗原检测系统,将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上,再用PCR方法将这段DNA扩增,然后用常规方法检测PCR产物。由于PCR具有强大的扩增能力,因而比常规的免疫学检测法,如ELISA和放射免疫测定(RIA)的敏感性提高好几个数量级。实验原理免疫PC
什么是酶联免疫法
酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked
免疫酶测定法简介
免疫酶测定法是一种用酶标记一抗或二抗检测特异性抗原或抗体的方法。本法将抗原抗体反应的高度特异性与酶对底物高效催化作用结合起来,根据酶作用底物后显色,以颜色变化判断实验结果。目前常用的方法有酶免疫组化技术和酶联免疫吸附试验(ELISA)。前者测定细胞表面抗原和组织内的抗原,后者主要测定可溶性抗原或抗体
酶免疫电泳技术
一,酶免疫电泳技术的原理抗原与抗体在琼脂糖凝胶中电泳时,在碱性缓冲液的条件下,抗原带负电,向正极移动。不同分子量或还不同电荷的抗原,在相同条件下,移动距离不等。这些在不同部位的抗原,再与相关抗体经扩散形成免疫沉淀线。酶免疫电泳技术中的抗原与抗体就是酶和它的相应抗体球蛋白。酶抗原与酶抗体形成的免疫复合
免疫酶技术的操作步骤
(1) 用微量移液器分别加待检血清、阳性对照、阴性对照各100μl于1、2、3孔中,370C水浴箱温育30min。(2) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干。(3) 每孔加入酶结合物2滴,370C水浴箱温育30min。(4) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干(5) 每孔分别加入显色A液、B
酶免疫测定的应用
酶免疫测定具有高度的敏感性和特异性,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用以检测。它的最小可测值达ng甚至pg水平。与放射免疫分析相比,酶免疫测定的优点是标记试剂比较稳定,且无放射性危害。因此,酶免疫测定的应用日新月异,酶免疫测定的新方法、新技术不断发展。但酶免疫测定在医学检验中的普及应归功于商品试
小鼠酶联免疫分析(ELISA)
小鼠酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中(Insulin)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体
酶联免疫法的原理
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原
免疫多聚酶链反应
实验概要免疫多聚酶链反应(PCR)是一种抗原检测系统,将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上,再用PCR方法将这段DNA扩增,然后用常规方法检测PCR产物。由于PCR具有强大的扩增能力,因而比常规的免疫学检测法,如ELISA和放射免疫测定(RIA)的敏感性提高好几个数量级。实验原理免疫PC
人Apelin酶联免疫分析
人Apelin酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中Apelin的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Apelin水平。用纯化的人Apelin抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次
免疫酶细胞化学实验技术
免疫酶细胞化学免疫酶细胞化学是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下,借助于酶细胞化学的手段,检测某种物质(抗原/抗体)在组织细胞内存在部位的一门新技术:即预先将抗体与酶连结,再使其与组织内特异抗原反应,经细胞化学染色
免疫组化方法免疫酶标方法简介
免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是最常用的技术。该方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准
免疫电镜相关技术实验——酶标记免疫电镜技术
实验方法原理该技术是以酶为抗原—抗体反应的标记物,在不改变抗原抗体的免疫反应特异性,亦不降低酶活性条件下,与相应底物作用后形成不溶性的反应物。在电镜下形成为电子散射力强的终末产物。用于免疫电镜标记的酶有辣根过氧化物酶 (HRP)碱性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
脂蛋白脂肪酶(LpL)酶联免疫分析
脂蛋白脂肪酶(LpL)酶联免疫分析说明书实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中脂蛋白脂肪酶(LpL)水平。用纯化的脂蛋白脂肪酶(LpL)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入脂蛋白脂肪酶(LpL),再与HRP标记的脂蛋白脂肪酶(LpL)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物
酶免疫技术对酶的要求是什么?
酶的要求:一个酶蛋白分子每分钟可催化103~104个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合: 1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。 2.易与抗体或抗原偶联,标记后酶活性保持稳定,且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。 3.作用专一性强,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检组织或
大鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析
大鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的大鼠乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相
大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析
大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中胃蛋白酶(Pepsin)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胃蛋白酶(Pepsin)水平。用纯化的大鼠胃蛋白酶(Pepsin)
大鼠钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析
大鼠钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中钙调磷酸酶(CaN)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠钙调磷酸酶(CaN)水平。用纯化的大鼠钙调磷酸酶(CaN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,
酶免疫技术对酶的要求是什么?
酶的要求:一个酶蛋白分子每分钟可催化103~104个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合: 1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。 2.易与抗体或抗原偶联,标记后酶活性保持稳定,且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。 3.作用专一性强,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检组织或
人凝血酶(Thrombin)酶联免疫分析(ELISA)
人凝血酶(Thrombin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,组织及相关液体样本中凝血酶(Thrombin)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人凝血酶(Thrombin)水平。用纯化的人凝血酶(Thromb
昆虫乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析
昆虫乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定昆虫血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的昆虫乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相
人端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)
人端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中端粒酶(TE)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人端粒酶(TE)水平。用纯化的人端粒酶(TE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微
山羊端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)
山羊端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定山羊血清,血浆及相关液体样本中端粒酶(TE)的活性。 上海裕平生物科技公司高品质ELISA试剂盒供应商,品质卓越,价格实惠,售后完善,并提供免费代检测服务。咨询热线:021-60545848-5512
人乙酰肝素酶(HPA)酶联免疫分析(ELISA)
人乙酰肝素酶(HPA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中乙酰肝素酶(HPA)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人乙酰肝素酶(HPA)水平。用纯化的人乙酰肝素酶(HPA)抗体包被微孔板,制成固
酶免疫技术对酶的要求是什么?
酶的要求:一个酶蛋白分子每分钟可催化103~104个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合: 1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。 2.易与抗体或抗原偶联,标记后酶活性保持稳定,且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。 3.作用专一性强,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检组织或
大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析
大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中胃蛋白酶(Pepsin)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胃蛋白酶(Pepsin)水平。用纯化的大鼠胃蛋白酶(Pepsin)
沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程酶免疫检测
①FS法 a.接通荧光计和打印机电源,至少预热1h。 b.从铝箔袋中取出所需数量的微孔测试板每个食品样品一个孔,另加4个孔做对照用。将板稳固地卡入托架中。各移取100μL 阴性对照抗原于A-1,A-2和A-3的每个孔中。移取100μL 阳性对照抗原于A-4中。移取每100μL 加热的M肉汤样
大鼠免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析
大鼠免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白G(IgG)水平。用纯化的抗-大鼠IgG抗体包被微孔板,制成
大鼠免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫说明
本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T0.5μg/ml -12μg/ml使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹