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免疫胶体金技术3

为了得到颗粒均一的免疫金试剂,可将上述初步纯化的结合物再进一步用10%~30%蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。(2)凝胶过滤法:此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋,在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1/5~1/10。再经1 500r/min离心20min。取上清加至Sephacryl S-400(丙烯葡聚糖凝胶S-400)层析柱分别纯化。层析柱为0.8 cm×20cm,加样量为床体积的1/10,以0.02Mol/L PBS液洗脱(内含0.1%BSA,0.05%NaN3,pH8.2者用IgG标记物),流速为8ml/h。按红色深浅分管收集洗脱液。一般先滤出的液体为微黄色,有时略混浊,内含大颗粒聚合物等杂质。继之为纯化的胶体金蛋白结合物,随浓度的增加而红色逐渐加深,清亮透明,最后洗脱出略带黄色的为标记的蛋白组分。将纯化的胶体金蛋白结合物过滤除菌、......阅读全文

胶体金标记技术(制备方法和应用)

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细

免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶...

免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶体金胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学

胶体金免疫层析法检测蛋白A抗体实验方法与步骤

摘 要: 目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫层析法(GICA)。 方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记葡萄球菌A蛋白(SPA),将重组 的CagA抗原划线固定于硝酸纤维素膜上,制成免疫层析检测试条。 血清中IgG

胶体金及金标检测技术研究进展

继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶)之后,一种固相标记免疫测定技术--免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique, ICG)逐渐发展起来。它是以胶体金作为标记物,利用抗原抗体特异性反应,对抗原或抗体物质进行定性乃至定量研究的标记技术。近年来,该技术因其操作简

免疫组化技术的原理、分类和优点

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半

侧流免疫层析技术在真菌毒素检测中的应用

 1、侧流免疫层析检测技术    侧流免疫层析检测技术(LFIA) 也称横向流动免疫检测技术,是出现于20世纪60年代初期的一种独特的免疫分析方式,以条状纤维层析材料为固相,借助毛细管的吸附作用使样品在层析材料上移动,其中样品中的待测物与层析材料上一定区域的抗

免疫胶体金技术的基本知识

一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质

国家食药监针对6项食品快速检测方法公开征集意见

  总局办公厅公开征求《水产品中孔雀石绿的快速检测 胶体金免疫层析法》(征求意见稿)等6项食品快速检测方法意见  各有关单位:  按照食品安全法有关规定,为规范食品快速检测方法使用,我局组织制定了《水产品中孔雀石绿的快速检测胶体金免疫层析法》(征求意见稿)等6项食品快速检测方法,现向社会公开征求意见

常用的免疫组化技术方法介绍

   根据生物技术实验总结我们知道,免疫组化技术就是用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,其又称之为免疫细胞化学技术。下面简单介绍几种常用的免疫组化技术方法,希望能够加深大家对免疫组化技术的了解。    目前常用的几种免疫组化技术w

常用的免疫组化技术方法

根据生物技术实验总结我们知道,免疫组化技术就是用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,其又称之为免疫细胞化学技术。下面简单介绍几种常用的免疫组化技术方法,希望能够加深大家对免疫组化技术的了解。目前常用的几种免疫组化技术www.biovo

免疫组化技术实验原理及分类

   免疫组化技术实验原理: 抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。    众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将

免疫组化技术实验原理及分类

免疫组化技术实验原理: 抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某

胶体金快速斑点免疫分析-1

随着免疫分析日益广泛应用于以临床为主以及非临床领域的诊断工业(diagnostic industry),免疫分析向两个方向发展:一类为全自动化的免疫分析;另一类为以硝酸纤维膜为载体的快速免疫分析。前者需要价格昂贵的全自动仪器及与仪器严格配套的各种试剂盒,目前只能在医疗及检测中心应用,虽也能较快速

三聚氰胺检测方法比较

 2007年3月, 美国发生多起因食用宠物食品而导致宠物中毒死亡事件。2008 年9月, 中国发生因食用三鹿婴幼儿奶粉导致婴幼儿产生肾结石病症的严重事件。两起事件的原因都是在食品或饲料中非法添加大剂量三聚氰胺。因此, 如何快速准确的分析食品和饲料中的三聚氰胺成为食品企业、食品管理机构和广大

常用免疫组化方法

目前几种常用免疫组化方法简单介绍1)免疫荧光方法是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可

免疫组化技术全程原理剖析以及案例解答

1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞

免疫组化技术的原理、分类和优点

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半

一文了解抗原POCT检测原理、应用领域

  POCT 具有空间小、使用方便、高效以及准确度高等多项优势,并且价格普遍偏低,对于疾病预防、确定病因和预后效果、提高治疗有效性和减少医疗成本有重大意义,能满足各级各类医疗机构临床检测需要,尤其是在国家大力推进分级诊疗和第三方检测的时候,成本低、效率高的 POCT 产品对基层医疗卫生机构和第三方检

胶体金标记蛋白A技术

胶体金标记蛋白A技术(Protein A-gold technique, PAg法)   PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A

胶体金制备注意事项及应用

一、胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。 金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)

(一)  原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下

纯水中影响胶体金制备的因素分析

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态

江西省质监局对6项快检地方标准征求意见

  分析测试百科网 近日,江西省质量技术监督局对2017年第二批拟立项地方标准项目(见附件)公开征求意见。其中涉及6项快检方法,包括:饲料原料中呕吐毒素的快速筛查胶体金免疫层析法、饲料原料中玉米赤霉稀酮的快速筛查胶体金免疫层析法、饲料原料中黄曲霉毒素B1的快速筛查胶体金免疫层析法、饲料原料中T2/H

6项食品快速检测方法正式发布

  分析测试百科网讯 此前,国家食品药品监督管理总局办公厅曾公开征求《水产品中孔雀石绿的快速检测 胶体金免疫层析法》(征求意见稿)等6项食品快速检测方法意见,25日,该6项快速检测方法正式发布。如下为公告原文:  总局关于发布《水产品中孔雀石绿的快速检测 胶体金免疫层析法》等6项食品快速检测方法的公

免疫胶体金技术介绍

一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)大总结

(一) 原理免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原 抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分

胶体金法和化学发光免疫法联合检测血清β―HCG、假阳性分析

   人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)是受精卵着床后由胎盘合体滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素,分子量为3868.8u,结构中包括β链和α链2条非共价结合的亚基。α链亚基与黄体生成素(LH)、促卵泡成熟激素(FSH)、促甲状腺成熟激素(TSH)的α

临床检验技术发展及其在耐药基因检测中的应用进展

刘晓燕 (公安县人民医院检验科,湖北公安434300)王 红 (湖北中医药大学医学检验与技术学院,湖北武汉430065)[关键词] 临床检验技术;耐药基因;分子生物学技术一份准确全面的医学检验报告是医生做出准确诊断与制定正确治疗方案必不可少的依据。因此,临床医学检验是一门极其重要的医学学科

蒋士强:食品安全快检技术在我国的特需性

       原题目:食品安全快速检测技术在我国的特需性及其主流技术的进展 蒋士强 (中国农业科学院/中国仪器仪表学会)  一、 觧决我国食品安全问题必需实现二个根本性的转变   1、监管的环节上应从目前

胶体金标记蛋白A技术(Protein A-gold technique, PAg法)-2

(2)0、5mol/L,pH7.4 Tris-Hcl缓冲液:Tris,60.57g,1mol/L Hcl约420m1,调pH值至7.4,最后加双蒸水至1000m1,此为储备液。(3)0、05mo1/L Tris缓冲生理盐水:氯化钠8.5-9g;0.5mo1/L,pH7.4 Tris-Hcl缓冲液10