免疫火箭电泳技术
一、原理 定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中,在电场作用下,引起抗原抗体的迁移和相互反应,当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰,由于电泳继续进行,样品孔不断有抗原移向抗原抗体复合物的沉淀峰,因抗原过剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗体复合物的沉淀峰。如此反复向前,直到再无游离抗原而反应终止,形成上行火箭状的沉淀峰,其沉淀峰高度和抗原的浓度成正比,与同样条件下的已知浓度的抗原血清比较,即可求得待测血清的抗原含量。 二、试剂(以apob为例) 1、琼脂糖。 2、巴比妥钠缓冲液(μ=0.05,ph=8.6):巴比妥钠10.30g,巴比妥1.84g、甘氨荎1.0g、peg 60004g,加900ml水加温助溶,待冷,加1mol/l调ph至8.6,混匀,转入1000ml容量瓶内,再加水到刻度,测试ph后装瓶待用。 3、羊抗人apob血清(效价1:128以上)。 4、......阅读全文
免疫电泳技术分别有哪些优点?
(一)加快了沉淀反应的速度;(二)电场规定了抗原抗体的扩散方向,使其集中,提高了灵敏度;(三)可将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开,再分别与抗体反应。
三种常用免疫电泳技术
免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反映的结合产物。这种技术有两大优点,一是加快反应的速度,二是将某些蛋白组分利用其带电荷的不同而将其分开,再分别与抗体反应,以此做更细微的分析。免疫电泳技术的种类有很多,这里仅将常用的技术介绍如下: 一、放射免疫电泳技术 将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体
火箭免疫电泳的实验材料介绍
(一)材料和试剂1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐剂)蒸馏水加热溶解并定容至500ml2、1%预复琼脂(或琼脂糖)1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。3、1.5%琼脂糖凝胶1.5g琼脂糖加50ml蒸馏水置水
火箭免疫电泳实验的材料介绍
(一)材料和试剂 1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液 巴比妥钠 10.3 g 巴比妥 1.84 g 硫柳汞 100 mg(防腐剂) 蒸馏水加热溶解并定容至500ml 2、1%预复琼脂(或琼脂糖) 1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。 3、1.5%琼脂糖凝
火箭免疫电泳实验材料和设备
(一)材料和试剂1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐剂)蒸馏水加热溶解并定容至500ml2、1%预复琼脂(或琼脂糖)1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。3、1.5%琼脂糖凝胶1.5g琼脂糖加50ml蒸馏水置水
逆向火箭免疫电泳的概念
中文名称逆向火箭免疫电泳英文名称reverse rocket immunoelectrophoresis定 义火箭免疫电泳的一种变化,电泳时使抗体走过含抗原的琼脂糖凝胶,由此形成的“火箭”形沉淀带的长度与抗体的量相关。用来对一系列抗体样品进行效价测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法
火箭免疫电泳实验的操作步骤
1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复
火箭免疫电泳基本原理
火箭免疫电泳(Rocket immunoelectrophoresis)基本原理:也称免疫扩散,抗原在含有定量抗体的琼脂糖中泳动,两者比例适宜时,在较短时间内生成锥形的沉淀峰。在一定浓度范围内,沉淀峰的高度与抗原含量成正比。
火箭免疫电泳实验原理及操作
一、实验原理火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉
火箭免疫电泳的实验材料和设备
(一)材料和试剂1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐剂)蒸馏水加热溶解并定容至500ml2、1%预复琼脂(或琼脂糖)1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。3、1.5%琼脂糖凝胶1.5g琼脂糖加50ml蒸馏水置水
火箭免疫电泳所需使用仪器和材料
(一)材料和试剂1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐剂)蒸馏水加热溶解并定容至500ml2、1%预复琼脂(或琼脂糖)1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。3、1.5%琼脂糖凝胶1.5g琼脂糖加50ml蒸馏水置水
火箭免疫电泳的定义和应用介绍
火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与
电泳技术基本原理和类型
基本原理:免疫扩散与电泳技术相结合。类型:对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳、双向免疫电泳(交叉免疫电泳)
免疫分析法相关
电泳技术 基本原理:免疫扩散与电泳技术相结合。 类型:对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳、双向免疫电泳(交叉免疫电泳) 对流免疫电泳 基本原理:多数蛋白质抗原在碱性缓冲液中带负电荷,在电泳时从负极向正极移动。抗体在碱性缓冲液只带微弱的负电 荷,且相对分子质量较大,电泳力较小,在琼脂电渗
什么是对流免疫电泳?
对流免疫电泳是免疫电泳技术中的一种,还包括免疫电泳、火箭电泳等方法。
关于火箭免疫电泳的实验操作步骤介绍
1、抗原、抗体浓度的选择 以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。 2、预复琼脂玻板的制备
火箭免疫电泳的实验操作注意事项
1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复
对流免疫电泳的基本信息
免疫电泳技术是将琼脂内电泳和凝胶内沉淀反应相结合的一种常用的免疫学方法,包括免疫电泳、对流免疫电泳和火箭电泳等方法。
关于对流免疫电泳的基本信息介绍
对流免疫电泳是免疫电泳技术中的一种,还包括免疫电泳、火箭电泳等方法。 在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,而且它分子又较大,所以泳动慢,受电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电渗作用,故在电泳时,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质常带较强的负电荷,分子又较小,所以泳动快,虽然由
电泳技术
电泳技术简介 电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。 电泳技术的基本原理和分类
电泳技术
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。 电泳技术的基本原理和分类 在电场中,推
电泳技术
电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具 有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷, 在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在 蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。 电泳现象早在1
逆向火箭免疫电泳的定义和应用介绍
中文名称逆向火箭免疫电泳英文名称reverse rocket immunoelectrophoresis定 义火箭免疫电泳的一种变化,电泳时使抗体走过含抗原的琼脂糖凝胶,由此形成的“火箭”形沉淀带的长度与抗体的量相关。用来对一系列抗体样品进行效价测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法
火箭免疫电泳的实验仪器和器材介绍
(一)材料和试剂1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐剂)蒸馏水加热溶解并定容至500ml2、1%预复琼脂(或琼脂糖)1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。3、1.5%琼脂糖凝胶1.5g琼脂糖加50ml蒸馏水置水
关于对流免疫电泳法的简介
对流免疫电泳法是将琼脂内电泳和凝胶内沉淀反应相结合的一种常用的免疫学方法为免疫电泳技术中的一种,还包括免疫电泳、火箭电泳等方法。在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,而且它分子又较大,所以泳动慢,受电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电渗作用,故在电泳时,反而向负极倒退。
火箭免疫电泳法测定补体C4、B因...
1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度;(3)电泳缓冲液 称
电泳技术概述
电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以
电泳技术概述
电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以
火箭电泳实验
实验方法原理 在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。实验材料 待检血清试剂、试剂盒 巴比妥缓冲液琼脂粉仪器、耗材 微量进样器打孔器玻璃板电泳仪实验步骤 1. 抗
火箭电泳试验
火箭电泳试验火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为:在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。材料:1.诊断血清(抗体):抗人IgG或IgA免疫血清2.待检血清(抗