火箭免疫电泳法测定补体C4、B因...
1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度;(3)电泳缓冲液 称取10.30g巴比妥钠,1.83g巴比妥,溶于1000mL蒸馏水中。此液为pH8.6,离子强度0.05的巴比妥缓冲液; (4)凝胶缓冲液 以定量测定时用1:4稀释的电泳缓冲液,B因子定量时1:5稀释; (5)染色液 0.25%考马斯亮蓝,称取0.25g考马斯亮蓝R-250,溶于100mL脱色液中; (6)脱色液 甲醇900mL、冰醋酸200mL、蒸馏水900mL。 2、操作步骤 (1)1%琼脂糖凝胶板的制备:称取0.50g琼脂糖和1z聚乙二醇(PEG 6000)......阅读全文
火箭免疫电泳法测定补体C4、B因...
1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度;(3)电泳缓冲液 称
火箭免疫电泳
实验概要本文介绍了火箭免疫电泳的基本原理和主要操作流程。实验原理火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到
补体C4(C4)临床意义
正常参考范围:0.44~0.66g/L临床意义:增高:风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心梗、Reiter综合症和各种类型的多关节炎。减低:自身免疫性慢性活动性肝炎、SLE活动期、多发性硬化症、类风湿性关节炎、IgA肾病、链球菌感染后、肾小球肾炎早期等。
大鼠补体C4(C4)ELISA检测法
大鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 C4 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 C4与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠C4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid
单向定量免疫电泳(火箭免疫电泳)
实验原理单向定量免疫电泳又称火箭电泳(rocket immunoelectrophoresis)。在琼脂内掺入适量的抗体,在电场作用下,定量的抗原泳动遇到琼脂内的抗体,形成抗原—抗体复合物沉淀下来。走在后面的抗原继续在电场作用下向正极泳动,遇到琼脂内沉淀的抗原—抗体复合物,抗原量的增加造成抗原过
免疫化学法测定单个补体成分
分为单向免疫扩散、火箭免疫电泳、透射比浊法和散射比浊法。后两种方法可通过仪器对补体的C3、C4、B因子等单个成分进行自动化测定。待测血清标本中的C3、C4成分,经适当稀释后与相应抗体反应形成复合物,反应介质中的PEG可使该复合物沉淀,仪器对复合物产生的光散射或透射信号进行自动检测,并换算成所测成
补体c4偏高的危害
补体c4偏高的危害是免疫系统紊乱,机体发生炎症反应。补体C4参与机体内环境的稳定性,参与机体的适应性免疫应答,参与凝血等生物过程,可以监测疾病的炎症反应,监测机体内环境、凝血功能等。如果只有一项偏高,那么要结合其他检查、症状、体征来判断是否属于疾病,在正常的新陈代谢过程中,也会出现短暂的升高。需
血清补体C4检查作用
测定C4含量有助于系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的诊断和治疗。增高见于风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗死、肝癌及各种类型的多关节炎等。降低见于系统性红斑狼疮、慢性活动性肝炎、多发性硬化性全脑炎、IgA肾病、胰腺癌晚期。
补体C4溶血覆盖技术
电泳是通过电场作用将C4迁移率不同的同种异型分离开,然后依照分型标准定型。在某些情况下,C4A某种同种异型与C4B某种同种异型迁移率相同不易区分开,此时可用溶血覆盖技术加以区别。1、原理 用肼处理豚鼠血清,可灭活其补体成分C4,使之成为帜缺乏的血清。将C4缺乏的豚鼠血清与致敏的SRBC混合,因缺
单个补体成分的测定
单个补体成分的测定 C3、C4、C1q、B因子和C1酯酶抑制物等,常被作为单个补体成分的检测指标。常用免疫溶血法检测单个补体成分的活性;基于抗原抗体反应的血清学法(免疫化学法)测定其含量。目前应用自动化免疫散射比浊法可准确测定体液中C3、C4等多个单一的补体成分。 一、 免疫溶血法 该方法
火箭免疫电泳是什么?
火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与
火箭免疫电泳的电泳
火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。
火箭免疫电泳的简介
火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。 电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰
大鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 C4 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 C4与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠C4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,C4
血清补体C4检查过程
抽取静脉血,分离血清尽快进行测定
血清补体C4注意事项
(1)抗原、抗体比例要适宜。抗原过浓不能得到圆锥状尖峰,而抗体太浓使沉淀峰太低,影响试验的灵敏度。 (2)加样后马上电泳,且标本不要太多,以防止峰形变宽。 (3)C4不很稳定,在4℃贮存2周或―20℃60d均可使C4值增加36%左右。而在1周内还是相对稳定的。
火箭免疫电泳的操作步骤
1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
关于火箭免疫电泳原理简介
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制
火箭免疫电泳的操作步骤
1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的实验原理
电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与捡样中的抗原浓度呈正相关。因此,当琼脂中抗体浓度固定时,以不同稀释度标准抗原泳动后形成的沉淀峰为纵坐标,抗原浓度为横坐标,绘制标准
火箭免疫电泳的概念简介
火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰,峰的高度与
火箭免疫电泳的方法简介
火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。
血清补体C4裂解产物检查作用
血清补体C4裂解产物测定有助于系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的诊断和治疗。增高:见于风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗死、肝癌及各种类型的多关节炎等。 降低:见于系统性红斑狼疮、慢性活动性肝炎、多发性硬化性全脑炎、IgA肾病、胰腺癌晚期。
火箭免疫电泳实验的材料介绍
(一)材料和试剂 1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液 巴比妥钠 10.3 g 巴比妥 1.84 g 硫柳汞 100 mg(防腐剂) 蒸馏水加热溶解并定容至500ml 2、1%预复琼脂(或琼脂糖) 1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。 3、1.5%琼脂糖凝
逆向火箭免疫电泳的概念
中文名称逆向火箭免疫电泳英文名称reverse rocket immunoelectrophoresis定 义火箭免疫电泳的一种变化,电泳时使抗体走过含抗原的琼脂糖凝胶,由此形成的“火箭”形沉淀带的长度与抗体的量相关。用来对一系列抗体样品进行效价测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法
火箭免疫电泳基本原理
火箭免疫电泳(Rocket immunoelectrophoresis)基本原理:也称免疫扩散,抗原在含有定量抗体的琼脂糖中泳动,两者比例适宜时,在较短时间内生成锥形的沉淀峰。在一定浓度范围内,沉淀峰的高度与抗原含量成正比。