微粒体(microsome)的分离

细胞通过匀浆破碎时,细胞质膜碎成片段,这些膜片段的末端融合形成的直径小于100nm的小泡。来自不同细胞器(细胞核、线粒体、质膜、内质网等)的小泡有不同的特性,所以可以将这些小泡相互分离。由内膜系统衍生而来的小膜泡形成相似大小的膜泡异质性集合体,称微粒体(microsome)。分离微粒体的方法是利用分级离心方法,去掉细胞核、线粒体后,经超速离心法而制备。具体步骤如下。1. 将体重约为300g饥俄20h后的大鼠断头,取出肝脏,洗涤,剪碎,加2倍体积的介质溶液(含0.15mol/L蔗糖,0.025mol/L KCl,0.1mol/L Tris-HCl pH7.4, 0.005mol/L MgCl2),在玻璃匀浆器中匀浆;2. 15000g×10min离心,弃沉淀,取上清;3. 100000g×60min离心,弃上清,取沉淀,沉淀即为微粒体;4. 将微粒体保存在介质溶液中。......阅读全文

抗甲状腺微粒体抗体TMA测定的临床意义及注意事项

  临床意义  在桥本甲状腺炎患者,阳性率可达95%;甲状腺功能亢进、原发性黏液水肿患者阳性率85%~95%;亚急性甲状腺炎、甲状腺癌患者阳性率约15%。由于TPO与髓过氧化物酶可能存在交叉反应性,因此,核周型抗嗜中性粒细胞胞质抗体阳性的患者,也有可能阳性。  阳性(或滴度升高):桥本氏甲状腺炎、系

抗甲状腺微粒体抗体TMA测定的参考值及临床意义

  参考值  放射免疫法:0-10%  临床意义  在桥本甲状腺炎患者,阳性率可达95%;甲状腺功能亢进、原发性黏液水肿患者阳性率85%~95%;亚急性甲状腺炎、甲状腺癌患者阳性率约15%。由于TPO与髓过氧化物酶可能存在交叉反应性,因此,核周型抗嗜中性粒细胞胞质抗体阳性的患者,也有可能阳性。  阳

薄层色谱分离法分离原理

薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。

RNA分离与分析实验_分离RNA

实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60

线虫分离器的分离原理

线虫的危害不仅仅只是直接危害植物那么简单,而是该类虫害具有极强的传播性,如果控制不好,那么就会导致大面积危害损失,因此面对此类危害,最重要的就是 做好线虫的检测检疫工作。线虫成虫虫体长约14~16微米,雌虫尾部近圆锥形,末端圆;雄虫尾部似鸟爪,向腹面弯曲。要开展线虫检测检疫工作,首先需要采 取有效方

分离胶的分离原理和特点

蛋白质 或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶, 由于分子筛作用,小分子的物质容易通过, 阻力小,迁移速度快;大分子的则受到较大 的阻力而被滞后。因此即使净电荷相似、泳 动率相等的物质分子也会由于分子筛效应, 根据其各自分子量的大小而在分离胶中被分 开。常用于检测蛋白质纯度、测定蛋白质分 子量以及DN

场流分离的分离模式介绍

  正常模式下,当尺寸远小于扁平通道高度时,分离模式分为两步:  第一,聚焦+进样模式(focus+inject):流体对流,将样品推入指定区间:  当流体对流时,因为底部为超滤膜,溶剂分子可以渗透并排到废液;而样品分子无法渗透至膜下,而靠近膜的上表面-聚集壁(accumulated wall);液

原生质体分离的分离方法

(1)机械法分离:缺点:产量极低;应用的材料受限制;操作极费力(2)酶法分离:Cocking最早开展这方面研究,克服了机械法分离的缺陷,可分为直接法和顺序法两种。酶法可在短时间内获得大量原生质体,缺点是:不纯的酶制剂所含杂质对原生质体可能有不同程度的毒害作用。

植物质膜蛋白的提取和溶解实验

实验材料拟南芥属植物试剂、试剂盒超纯水EGTA 贮存液NaF 贮存液洗涤缓冲液(WBSC )微粒缓冲液仪器、耗材华林式搅拌器细胞破碎器实验步骤3.1 质膜的分离1. 分离微粒体部分从机械破坏的叶、根组织或悬浮细胞中分离 PM 部分首先需要分离含有 PM 的微粒体膜部分。然后经过两相分离从微粒体部分分

植物质膜蛋白的提取和溶解实验

实验材料 拟南芥属植物试剂、试剂盒 超纯水EGTA 贮存液NaF 贮存液洗涤缓冲液(WBSC )微粒缓冲液仪器、耗材 华林式搅拌器细胞破碎器实验步骤 3.1 质膜的分离1. 分离微粒体部分从机械破坏的叶、根组织或悬浮细胞中分离 PM 部分首先需要分离含有 PM 的微粒体膜部分。然后经过两相分离从微粒

植物质膜蛋白的提取和溶解实验

实验材料:拟南芥属植物试剂、试剂盒:超纯水                                                                  EGTA 贮存液                                                      

重力沉降分离与离心机分离

一、重力沉降分离:  1、重力沉降作用:悬浮液静置时,在重力作用下,密度大于周围溶液的颗粒逐渐下沉。  2、特点:缓慢,沉降不完全。  3、影响重力沉降分离的因素:颗粒大小、颗粒形状、颗粒密度和溶液粘度等。二、离心机分离:  1、离心机分离技术:利用离心机旋转产生的离心力代替重力,加速颗粒沉降的分离

简介旋风分离器的分离优势

  1、旋风分离器的使用寿命长  旋风分离器出厂设计都要求设备的使用时间不得少于20年,回报率高。  2、旋风分离器的分离效果好  在规定的压力和气体通过量的条件下,它可以去除10微米以上的固体颗粒,在工况点处的工作效率可以达到99%,在工况点±15%的范围内,分离效率可以达到97%。  3、旋风分

重力沉降分离与离心机分离

一、重力沉降分离:  1、重力沉降作用:悬浮液静置时,在重力作用下,密度大于周围溶液的颗粒逐渐下沉。  2、特点:缓慢,沉降不完全。  3、影响重力沉降分离的因素:颗粒大小、颗粒形状、颗粒密度和溶液粘度等。二、离心机分离:  1、离心机分离技术:利用离心机旋转产生的离心力代替重力,加速颗粒沉降的分离

淋巴细胞分离液的分离原理

外周血中单个核细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同。淋巴细胞分离液是一种密度介于1.075∽1.090之间而近似于等渗的溶液,用它做密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离。

生物样品分离技术膜分离法

膜分离技术包括超滤、反渗析、电渗析、微孔过滤等。利用膜分离技术可将样品小分子化合物和大分子的蛋白质很好地分离。超滤是一种除去样品中蛋白质和其他大分子的方法,是能用分子分离的薄膜分离技术,依靠薄膜两侧压力差作为推动力来分离溶液中不同分子量的物质。与沉淀法相比,其优点是适用于小量样品,不用稀释样品也不用

场流分离的分离方法是什么?

电场流分离 (electrical FFF) 仰赖垂直于分离(流动)方向上的电场,以间接分离流液。流液因带电成分荷质比不同,所受的电场作用力即不相同。当微粒所受的电力与扩散力达到平衡时,不同的微粒距离积聚壁有所不同,从而流速不同。粒子的漂移速度取决于其电泳淌度μ。 热场流分离 (Thermal

分离核仁实验——高镁法分离核仁

实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液:0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4,pH 7.0蔗糖 A

从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离

实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.

生化分离技术--柱层析分离

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望 能有所帮助。 柱子可以分为:加压,常压,减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所 以其他条件相同的时候

抗肝肾微粒体抗体测定(lkm)的正常值及临床意义

  正常值  间接免疫荧光法阴性。  临床意义  抗LKM-1抗体为AIH-II型血清特异性抗体,敏感性为90%,在AIH中检出率较低(约10%左右)。慢性丙型肝炎患者中约2%~10%也可检测到抗LKM-1抗体。AIH中抗LKM-1抗体阳性患者,较多具有典型的自身免疫现象,大多为青年女性,自身抗体滴

抗肝肾微粒体抗体测定(lkm)的注意事项及检查过程

  注意事项  一、抽血前的注意事项:  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。  3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。  二、抽血后应注意:  1、

分离纯化常用的色谱分离方法有哪些

1、色谱方法根据分离机制的不同可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶过滤(分子筛)色谱和亲和色谱等。2、(1)吸附色谱法是指混合物随流动相通过吸附剂时,由于该吸附剂对不同物质有不同的吸附力而使混合物分离的方法。(2)分配色谱系法是利用固定相与流动相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离。(3)

淋巴细胞分离液可以分离哪些细胞?

淋巴细胞分离液主要用于分离人外周血淋巴细胞的分离,也适用于大多数哺乳动物单个核细胞的分离。具有低毒、高得率、高纯度等特点。  有专业的小动物脾脏淋巴细胞分离出来液试剂盒。通常试剂盒构成:全血及机构封闭液150ml体细胞清洗液150ml实验试剂C100ml实验试剂F100ml使用说明1份。重庆市华雅干

分离纯化蛋白质的分离方法介绍

  * 透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。  * 超滤法,应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜,达到浓缩蛋白质溶液的目的。  *丙酮、乙醇等有机溶剂沉淀法,可破坏蛋白质的水化层,在0~4℃低温下,使蛋白质沉淀。环境温度高等不良因素影响下,有

线粒体分离实验—从组织中分离线粒体

实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏,注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中,剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片,用匀浆缓冲液(1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的

PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理

pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...

气液分离器的分离原理介绍

  重力沉降的原理简述  由于气体与液体的比重不同,液体在与气体一起流动时,液体会受到重力作用较大,产生一个向下的速度,而气体仍然朝着原来的方向流动,也就是说液体与气体在重力场中有分离的倾向,向下的液体附着在壁面上,汇聚在一起,通过排放管排出。  折流分离原理简述  由于气体与液体的比重不同,液体与

分离方法之电化学分离方法

电化学分离方法除上述电泳、电渗析以外,还有:①控制电位的电解分离法。采用饱和甘汞电极作参比电极,在电解过程中不断调整电阻R以控制并保持阴极电位不变,可以将溶液中氧化还原电位相近的一些金属离子进行电解分离。②汞阴极电解分离法。利用H+在汞阴极上被还原时有很大的超电压,可以在酸性溶液中电解分离掉一些易被

分离纯化常用的色谱分离方法有哪些

1、色谱方法根据分离机制的不同可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶过滤(分子筛)色谱和亲和色谱等。2、(1)吸附色谱法是指混合物随流动相通过吸附剂时,由于该吸附剂对不同物质有不同的吸附力而使混合物分离的方法。(2)分配色谱系法是利用固定相与流动相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离。(3)