细胞凋亡的检测方法综述3
4、DNA 5’末端32P标记（1）将脱磷酸样品DNA置冰浴上，再加双蒸水10μl，10×缓冲液2μl，T4多核苷酸激酶10U，32P-ATP 740kBq（20μCi），双蒸水加至20μl。（2）混合后，37℃水浴60min。（3）加入1μl的0.5mol/L EDTA，90℃灭活5min。5、观测（1）取一定量的标记DNA稀释后在1.8％琼脂糖凝胶上点样，50V电泳约2h。（2）电泳后的凝胶置滤纸上烘干，进行放射自显影。（3）含32P标记DNA电泳干凝胶进行同位素液闪测定，计算放射活性。6、结果判断：正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状（LADDER）条带；坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带。三、酶联免疫吸附法（ELISA）核小体测定凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小体由组蛋白及其伴随的DNA片断组成，可由ELISA法检测。（一）检测步骤1、将凋亡细胞裂解后高速离心，其上清液中含有核小体；2、在微定量板上吸附......阅读全文
细胞坏死与细胞凋亡的区别
区别点坏死凋亡起因病理性变化或剧烈损伤生理性或病理性范围大片组织或成群细胞单个散在细胞细胞膜破损保持完整，一直到形成凋亡小体染色质呈絮状凝聚在核膜下呈半月状细胞器肿胀、内质网崩解无明显变化细胞体积肿胀变大固缩变小凋亡小体无，细胞自溶，残余碎片被巨噬细胞吞噬有，被邻近细胞或巨噬细胞吞噬基因组DNA随机
细胞凋亡和细胞坏死的区别
在机制方面：凋亡是基因调控的程序化细胞死亡，是主动进行的，坏死是意外事故性的细胞死亡，是被动过程。死亡范围中：凋亡多为散在的单个细胞，坏死多为连续的大片细胞。区别生物学意义不同细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡；细胞坏死被认为是因病理而产生的死亡。导致原因不同细胞凋亡涉及
细胞的死亡形式介绍细胞凋亡
凋亡是程序性细胞死亡的严格控制的模式，其特征在于明显的形态变化以及特定 caspase 和线粒体控制通路的激活。可以通过内在或外在通路触发。内在通路可以通过细胞应激、DNA 损伤、发育信号、存活因子缺失被激活。通过检测来自其他细胞的细胞外死亡信号来触发外在通路。可以通过区分形态特征来鉴定凋亡细胞。它
细胞凋亡和细胞增殖的意义
细胞凋亡和细胞增殖都是生命的基本现象，是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施。在胚胎发育阶段通过细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞，保证了胚胎的正常发育；在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老和病变的细胞，保证了机体的健康。和细胞增殖一样细胞凋亡也是受基因调控的精确过程。
细胞凋亡和细胞坏死的区别
细胞凋亡和细胞坏死的区别：1、本质区别：细胞凋亡：细胞凋亡(apoptosis)是细胞主动的死亡过程，其发生是受程序控制，逐步激活凋亡通路引起的，不产生炎症。细胞坏死：而坏死由于细胞内含物释放到细胞外，导致炎症。2、细胞变化：细胞凋亡：细胞对环境的生理性病理性刺激信号，环境条件的变化或缓和性损伤产生
细胞死亡与细胞凋亡的区别
区别点坏死凋亡起因病理性变化或剧烈损伤生理性或病理性范围大片组织或成群细胞单个散在细胞细胞膜破损保持完整，一直到形成凋亡小体染色质呈絮状凝聚在核膜下呈半月状细胞器肿胀、内质网崩解无明显变化细胞体积肿胀变大固缩变小凋亡小体无，细胞自溶，残余碎片被巨噬细胞吞噬有，被邻近细胞或巨噬细胞吞噬基因组DNA随机
细胞凋亡和细胞坏死的区别
细胞凋亡和细胞坏死的区别是：生物学意义不同、导致原因不同、主动性不同。1、生物学意义不同：细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡；细胞坏死被认为是因病理而产生的死亡。2、导致原因不同：细胞凋亡涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，
细胞坏死与细胞凋亡的区别
细胞程序死亡(programmed cell death，PCD)也常常被称为细胞凋亡，是生物体发育过程中普遍存在的，是一个由基因决定的细胞主主动的有序的死亡方式。具体指细胞遇到内、外环境因子刺激时，受基因调控启动的自-杀保护措施，包括一些分子机制的诱导激活和基因编程，通过这种方式去除体内非必需细胞
细胞凋亡的mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因，检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道，Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells）等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X （长） 作为抗凋亡（bcl-2 和bcl-X）的调节物，它们
细胞凋亡的观察介绍
细胞凋亡的观察介绍：1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体医`学教育网搜集整理。3、台盼蓝
细胞凋亡的研究方法
Important notes： Morphological data so far are most reliable and convincing evidence for apoptosis， especially with electromicroscopy Morphologica
细胞凋亡的的意义
细胞凋亡和细胞增殖都是生命的基本现象，是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施。在胚胎发育阶段通过细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞，保证了胚胎的正常发育；在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老和病变的细胞，保证了机体的健康。和细胞增殖一样细胞凋亡也是受基因调控的精确过程。
细胞凋亡的检测方法
（一） 测原理细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。（二） 用价值流式细胞仪检测有下列特点：（1）检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡
细胞凋亡的mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因，检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道，Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells）等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X （长） 作为抗凋亡（bcl-2 和bcl-X）的调节物，它们
细胞凋亡的早期检测
1) PS（磷脂酰丝氨酸）在细胞外膜上的检测：PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生，可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV，一个钙依赖性的磷脂结合蛋白，能专一性的结合暴露在膜外侧的PS，再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测（悬浮细胞和贴壁细胞都
细胞凋亡的效应机制
凋亡细胞的特征性表现，包括DNA裂解为200bp左右的片段，染色质浓缩，细胞膜活化，细胞皱缩，最后形成由细胞膜包裹的凋亡小体，然后，这些凋亡小体被其他细胞所吞噬，这一过程大约经历30-60分钟，Caspase引起上述细胞凋亡相关变化的全过程尚不完全清楚，但至少包括以下三种机制：凋亡抑制物正常活细胞因
细胞凋亡的晚期检测
晚期检测细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。对于这一现象的检测通常有以下两种方法：1) TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP n
细胞凋亡有什么意义
1、细胞凋亡在个体发育和组织稳态的维持中具有重要的作用：如蝌蚪尾巴退化涉及细胞凋亡。2、细胞凋亡也与许多疾病的发生和防治密切相关：多种病毒感染可引起细胞凋亡，细胞凋亡可有效地阻止病毒繁殖，但大量细胞凋亡可使机体严重致病。3、通过细胞增殖与细胞凋亡共同调节成体的组织器官稳态的维持。
细胞凋亡的过程介绍
细胞凋亡过程可分为两阶段：开始阶段和效应阶段。在开始阶段又可分为两个途径：外始式和内始式。外始式途径：外始式途径是通过TNF受体家族（如CD95）的受体与配体结合开始的。这些配体有癌症坏死因子（TNF），和其他细胞因子，后者可以由如T淋巴细胞分泌。 在FADD（Fas偶联死亡区域蛋白Fas-asso
简述细胞凋亡的意义
细胞凋亡和细胞增殖都是生命的基本现象，是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施。在胚胎发育阶段通过细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞，保证了胚胎的正常发育；在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老和病变的细胞，保证了机体的健康。和细胞增殖一样细胞凋亡也是受基因调控的精确过程。
细胞凋亡的研究方法
Important notes：Morphological data so far are most reliable and convincing evidence for apoptosis， especially with electromicroscopyMorphological anal
细胞凋亡的染色观察
细胞凋亡 1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、
ELISA法测细胞凋亡
细胞凋亡时，Ca2+,Mg2+离子依靠的内源性核酸内切酶将双链DNA从各核小体间连接区裂断，发生单或寡合苷酸小体，各核小体的DNA与核组蛋白H2A,H2B,H3,H4构成严密的复合物而对内源性核酸酶有抵抗使之不被内源性核酸酶裂解。主要运用单克隆抗DNA抗体和抗组蛋白抗体直接检测DNA和组蛋白。愈加安
TUNEL细胞凋亡检测程序
实验概要本实验用TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可
早期细胞凋亡的标志
细胞凋亡的检测细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1 光学显微镜和
关于细胞凋亡的简介
人体内的细胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡则是病理性的，有关细胞死亡过程的研究，已成为生物学、医学研究的一个热点。人们已经知道细胞的死亡起码有两种方式，即细胞坏死与细胞凋亡（apoptosis）。细胞坏死是早已被认识到的一种细胞死亡方式，而细胞凋亡则是逐渐被认识的一种细胞死亡方式。
简述细胞凋亡的意义
细胞凋亡和细胞增殖都是生命的基本现象，是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施。在胚胎发育阶段通过细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞，保证了胚胎的正常发育；在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老和病变的细胞，保证了机体的健康。和细胞增殖一样细胞凋亡也是受基因调控的精确过程。
细胞凋亡晚期检测技术
晚期检测： 细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 。对于这一现象的检测通常有以下两种方法： 1.TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d
细胞凋亡的活化机制
Caspase的活化是有顺序的多步水解的过程，Caspase分子各异，但是它们活化的过程相似。首先在caspase前体的N-端前肽和大亚基之间的特定位点被水解去除N-端前肽，然后再在大小亚基之间切割释放大小亚基，由大亚基和小亚基组成异源二聚体，再由两个二聚体形成有活性的四聚体。去除N-端前肽是Cas
细胞凋亡的染色观察
细胞凋亡1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台