细胞物流系统如何调控中美联手借冷冻电镜开启解码之路
真核生物细胞内蛋白质、脂类等“大型货物”的运输，被生物膜这道屏障天然阻隔。上个世纪60年代，科学家开始认识到细胞内存在一套有条不紊的“物流系统”，即囊泡转运。作为细胞生命活动的基本过程，囊泡转运很快成为诺贝尔奖热门领域，1974年至今已累计五次与之相关。 “但是到今天为止，细胞内囊泡的功能、分选和转运的过程、动态调控的过程等，仍然还有很多未解之谜。对囊泡的一系列研究仍然是现代细胞生物学很重要的热点，很多新的发现也还在不断地被做出来。”清华大学生命科学学院院长王宏伟教授在接受澎湃新闻（www.thepaper.cn）采访时如此评价复杂而又精细的囊泡转运过程。 北京时间1月16日凌晨，王宏伟作为通讯作者的一篇最新成果发表在国际顶级学术期刊《自然》（Nature）子刊《自然-结构与分子生物学》（Nature Structural & Molecular Biology）。这一最新成果正是和囊泡转运有关，研究团队解析了该......阅读全文
冷冻电镜流形嵌入方法
流形嵌入方法(Manifold Embedding)自然界的分子过程通常是连续的，比如三磷酸腺苷(ATP)合成酶等分子结构的状态变化通常都是连续的。现有的方法只能得到有限的、若干个离散的构象变化，限制了我们对于分子结构的进一步观察。而流形嵌入法则是通过将颗粒图像映射到具有特定拓扑结构的参数空间(m
冷冻蚀刻电镜技术优缺点
折叠优点①样品通过冷冻，可使其微细结构接近于活体状态;②样品经冷冻断裂蚀刻后，能够观察到不同劈裂面的微细结构，进而可研究细胞内的膜性结构及内含物结构;③冷冻蚀刻的样品，经铂、碳喷镀而制备的复型膜，具有很强的立体感且能耐受电子束轰击和长期保存。折叠缺点冷冻也可造成样品的人为损伤;断裂面多产生在样品结构
冷冻蚀刻电镜技术装置型号
装置型号目前，冷冻蚀刻装置的型号很多，但主要分为两种类型:一种是专用冷冻蚀刻装置，如EIKO公司生产的FD2A型、FD3型，BALZERS公司生产的BAF300型;另一种是真空喷镀仪的冷冻蚀刻附件，如日立公司生产的HFZ1型，它与FE1型加温蚀刻装置一起安装在HUS5型真空喷镀仪中使用。以
冷冻电镜的当今应用
从高中生物课本中，我们了解到，蛋白质是由多种氨基酸通过脱水缩合构成的具有复杂空间结构的生物大分子。每一种氨基酸，都因由其R基的不同，从而有了不同的空间结构。科学家们就可以观测这种空间结构，从而确定该位置上氨基酸的种类。蛋白质的复杂结构普通的荧光显微镜下，我们只能观察到蛋白质的粗略影像。而通过冷冻电镜
最清晰端粒酶结构问世－向开发癌症新疗法迈出重要一步
据英国《自然》杂志4月25日发表的一篇论文，美国科学家团队使用冷冻电镜技术，以迄今最高的分辨率确定了端粒酶的结构。鉴于端粒酶与癌症和老化关系密切，该发现代表着人类向开发端粒酶相关疗法迈出了重要一步。 时至今日，科学家并不能完全肯定衰老和癌症的真正起因，而端粒功能的发现，被认为是开拓了一条抗衰老
迄今最清晰端粒酶结构图像问世
据英国《自然》杂志25日发表的一篇论文，美国科学家团队使用冷冻电镜技术，以迄今最高的分辨率确定了端粒酶的结构。鉴于端粒酶与癌症和老化关系密切，该发现代表着人类向开发端粒酶相关疗法迈出了重要一步。时至今日，科学家并不能完全肯定衰老和癌症的真正起因，而端粒功能的发现，被认为是开拓了一条抗衰老与癌症新疗法
南科大冷冻电镜中心揭牌，中国最大的冷冻电镜设施中心
2018年11月19日，南方科技大学冷冻电镜中心揭牌仪式在南科大生物楼举行。2017年诺贝尔化学奖获得者、冷冻电镜技术开创者之一Richard Hendersen，深圳市发改委副主任蔡羽，南方科技大学校长陈十一，中国科学院院士隋森芳等出席仪式。揭牌仪式现场 南科大冷冻电镜中心是深圳市政府出资、
细胞能量工厂——线粒体－如何解码神经元活动模态
中国科学院自动化研究所研究员韩华团队通过其自主研发的电镜三维成像和快速重建技术，首次展现小鼠运动皮层锥体神经元胞体和树突中数百个线粒体的三维形态，发现神经元树突中线粒体依靠较细的“线粒体纳米管道”连接在一起（管道直径30-50纳米）的现象，有力支撑线粒体解码神经元活动的研究。 相关成果“Bra
冷冻电镜是如何观测到原子级别的生命结构的
冰是一种大家再熟悉不过的物质了。在一个大气压下，当水的温度低于零度时，便会变成固态的冰。水分子在彼此之间的极性相互作用力(范德瓦尔斯力)之下，形成规则的排列形式，变成晶体状态。这是我们生活中常见的冰的存在方式。冰晶的内部通常是极为纯净的，只有水分子存在，任何其他杂质都会在结晶的过程中被挤出晶体之外。
冷冻电镜是如何观测到原子级别的生命结构的
冰是一种大家再熟悉不过的物质了。在一个大气压下，当水的温度低于零度时，便会变成固态的冰。水分子在彼此之间的极性相互作用力(范德瓦尔斯力)之下，形成规则的排列形式，变成晶体状态。这是我们生活中常见的冰的存在方式。冰晶的内部通常是极为纯净的，只有水分子存在，任何其他杂质都会在结晶的过程中被挤出晶体之外。
Nature：细胞大小究竟如何调控细胞增殖
近日，来自美国斯坦福大学的研究人员在著名国际学术期刊nature上发表了一项最新研究进展，他们在出芽酵母中发现在细胞分裂之前，周期蛋白Cln3的合成速率随细胞尺寸变化，而转录抑制因子Whi5的浓度会随细胞生长而得到稀释，通过这种机制实现了细胞尺寸对增殖的调控。 细胞的大小是影响细胞内所有生物合
借电阻进行电子细胞计数
实验方法原理 将细胞样品稀释在电解质（生理盐水或D-PBSA ) 中，然后移入带孔管子的下部，让0.5ml的样品溶液流过计数器以计算其中的细胞数。实验步骤 材料无菌：细胞培养物、D-PBSA、0. 2 5 % 粗制胰蛋白酶、生长培养基非无菌：计数杯操作步骤1. 用胰酶消化单层培养的细胞，或从悬浮培养
借电阻进行电子细胞计数
实验方法原理 将细胞样品稀释在电解质（生理盐水或D-PBSA ) 中，然后移入带孔管子的下部，让0.5ml的样品溶液流过计数器以计算其中的细胞数。 实验步骤
借电阻进行电子细胞计数
实验方法原理将细胞样品稀释在电解质（生理盐水或D-PBSA ) 中，然后移入带孔管子的下部，让0.5ml的样品溶液流过计数器以计算其中的细胞数。实验步骤材料无菌：细胞培养物、D-PBSA、0. 2 5 % 粗制胰蛋白酶、生长培养基非无菌：计数杯操作步骤1. 用胰酶消化单层培养的细胞，或从悬浮培养中收
大型透射电镜和冷冻电镜的简介
大型透射电镜 大型透射电镜（conventional TEM）一般采用80-300kV电子束加速电压，不同型号对应不同的电子束加速电压，其分辨率与电子束加速电压相关，可达0.2-0.1nm，高端机型可实现原子级分辨。 冷冻电镜 冷冻电镜（Cryo-microscopy）通常是在普通透射电镜
冷链物流温湿度监控系统
生活中常见的疫苗等运输需要冷藏的，一般储藏温度在2～8℃，有些需要在-18℃冷冻。其实还有更多的制品都对储运环境有着严格的要求，如冷冻食品、水果、花卉、血浆、血液制品、生物制剂等等，有些特殊的生物制品甚至要在-50℃低温下用干冰储运。一旦温度超过限定值，都将对这些生物制品的品质产生非常大的影响。 冷
迄今最清晰端粒酶结构问世：冷冻电镜技术功不可没
据英国《自然》杂志25日发表的一篇论文，美国科学家团队使用冷冻电镜技术，以迄今最高的分辨率确定了端粒酶的结构。鉴于端粒酶与癌症和老化关系密切，该发现代表着人类向开发端粒酶相关疗法迈出了重要一步。 时至今日，科学家并不能完全肯定衰老和癌症的真正起因，而端粒功能的发现，被认为是开拓了一条抗衰老与癌
PRIMO冷冻电镜在标准化细胞观察的应用（二）
图 4. （ j-k 图）：冷冻电镜图像：分别是（图 3， h 图）中 P1 和 P2 两个位置的断层扫描切片。根据十字弓形状的 RPE1 细胞的肌动蛋白图谱（ actin map），在预期的位置发现了大致等同于肌动蛋白横向弧（ actin transverse arcs）（与细胞边缘平行但有一定距
PRIMO冷冻电镜在标准化细胞观察的应用（一）
（一） 总述：冷冻电镜（ Cryo-EM）是观察细胞内分子构造的有力工具。然而，用冷冻电镜观察细胞样本是具有挑战性的，细胞经常粘附在金属网格框架上，影响最终的成像质量。用法国 Alveole 公司的 PRIMO“定制化细胞微环境制备系统”，其无掩模、非接触式的微图案（ micropatterning
冷冻蚀刻电镜技术的内容介绍
冷冻蚀刻(Freezeetching)技术是从50年代开始发展起来的一种将断裂和复型相结合的制备透射电镜样品技术，故而亦称冷冻断裂(Freezefracture)或冷冻复型(Freezereplica)。
冷冻电镜揭开表面看实质
揭开表面看实质冷冻电镜对更为复杂的结构并没有很好的处理方式，在一些分子量比较大，包含多层的病毒结构研究中，一直没有高分辨率的三维模型，这也是由于病毒普遍具有对称失配的特性，基因结构被壳体完全覆盖，无法通过二维图形处理的方式对内部结构直接进行重构。刘红荣教授通过改进衬度分离方法展示出了解决该类问题的
冷冻电镜技术发展历程
冷冻电镜技术发展历程发展历程
冷冻电镜技术发展历程
冷冻电镜技术发展历程发展历程
冷冻蚀刻电镜技术的应用介绍
1．冷冻蚀刻表面标记免疫电镜技术（1）新鲜或固定的细胞进行直接法或间接法免疫标记。（2）PBS（pH7.5）冲洗3min×2，加入1mmol/l MgCl2蒸馏水洗洗3min×3，离心沉集细胞。（3）将细胞团置于小纸板上，入液氮冷却的Freon中，取出入冷冻蚀刻仪中进行断裂操作，再于-100℃蚀刻1
冷冻电镜使用费用
冷冻电镜大数据收集使用费校内(元/24小时)4000 耗材自理 。基于结构的药物发现(Structure-based drug discovery, SBDD)是设计和优化创新药的必要方法。本篇综述将深入探讨冷冻电镜(cryo-EM)在SBDD领域中的快速崛起及它的主要作用，以及阐释它如何为高价值药
冷冻电镜三维重构
摘要：冷冻电子显微学从创立到现在已发展成为确定蛋白质分子，蛋白质复合物和细胞器结构的一种有效、的方法这表现在三位冷冻电镜技术的不同方面。这主要包括适合于显微镜真空环境的样品制备条件，减少辐射损伤的策略，提高未经染色的电子显微像的信躁比的方法和二位投影三位重构的不同方法。冷冻电镜通过高压快速液氮冷冻的
冷冻电镜的原理及应用
冷冻电镜全称冷冻电子显微镜（Cryoelectron Microscopy），简单理解为用电子显微镜去观察冷冻固定的样本，得出清晰三维结构。可实现直接观察液体、半液体及对电子束敏感的样品，如生物、高分子材料等。样品经过超低温冷冻、断裂、镀膜制样（喷金/喷碳）等处理后，通过冷冻传输系统放入电镜内的冷台
冷冻电镜模型重构和优化
模型重构和优化模型三维重构的基础是中心截面定理，重构过程中的关键问题是如何确定每个颗粒图像的空间角(orientation determination)。大多数模型重构和优化算法都是基于投影匹配(projection matching)的迭代方法。简单说就是，先利用粗糙的三维结构模型，进行投影得到参
冷冻电镜的发展前景
王宏伟教授表示，虽然冷冻电镜领域的研究获得了诺贝尔奖，但这绝不意味着有关冷冻电镜的研究走到了尽头。在未来，冷冻电镜的发展需要更多的学科交叉。基于物理学，我们可以得到更多分子结构的解析手段；基于计算机科学，我们可以开发新的结构解析算法并解决超大规模计算的需求；基于化学与生物化学，我们可以分离并标记重要
冷冻蚀刻电镜技术操作方法
操作方法冷冻蚀刻的操作方法按以下步骤进行。1.预处理取新鲜组织块，大小为15~3~5mm，用25%戊二醛固定1~3小时。为防止冰晶形成，用30%甘油生理盐水浸泡8~12小时。2.冷冻断裂是在冷冻条件下使样品变得又硬又脆，用刀劈裂样品，暴露观察面。因为是用刀劈裂的样品，断裂往往发生在细胞被冻结后较