一文了解细胞侵袭实验计数
实验原理 将细胞小室（Transwell小室）放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。 细胞小室（transwell） 应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。当然不同细胞其体积不同，具体选择时要考虑到细胞大小。 所应有的常见实验 共培养体系： 小于3.0µm孔径条件下，细胞不会迁徙通过，因此，若研究不涉及细胞运动能力，不需要细胞穿过聚碳酸酯膜，则应选择3.0µm以下孔径。常用0.4、3.0µm。我们实验室用的是0.4µm。 将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。 趋化性实验 可用......阅读全文
细胞计数与存活实验步骤
实验步骤1. 取50ml 细胞悬浮液与50ml trypan blue (or Erythrosin bluish) 等体积混合均匀于1.5ml 小离心管中。 2. 取少许混合液(约15ml) 自血球计数盘chamber 上方凹槽加入，盖上盖玻片，于100 倍倒立显微镜下观察，活细胞不染色，死细胞则
细胞计数及活力测定实验
台盼兰染色法 实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞
细胞计数及活力测定实验
台盼兰染色法 实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞
细胞计数及活力测定实验
一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用
网织红细胞计数实验
实验方法原理由于网织红细胞胞浆中还残存少量核蛋白体和核糖核酸（DNA）可被某些染料（如煌焦油蓝、新美蓝）染成蓝色颗粒和网状物质。故可区别于完全成熟的红细胞，（feticulocyte直径8－9.5cm）实验材料血液试剂、试剂盒新美蓝溶液仪器、耗材显微镜实验步骤一、实验试剂：过去用煌焦油蓝，近来国外多
细胞周期测定实验_细胞计数法
细胞周期测定可应用于：（1）作为生物相容性评价指标；（2）研究细胞凋亡；（3）作为选择细胞的依据。实验方法原理体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力，可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系，如随着分裂指数的不断提高，细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比，它是测定
Transwell侵袭实验总结－（4）
－Transwell的其他应用的实验步骤1．Transwell肿瘤细胞迁移实验过程与Transwell侵袭实验基本一致，不同的只是不需要铺Matrigel。个人认为，由于没有基质胶的阻挡，细胞穿过膜的速度较侵袭实验明显加快，所以细胞量要更大。我做侵袭实验的细胞密度是1×105，而迁移实验的密度是1×
Transwell侵袭实验总结－（2）－实验用品
我的课题涉及Transwell侵袭实验和Transwell迁移实验，其他方面的Transwell应用我不太清楚，因此这里主要谈谈Transwell侵袭实验。1．实验用品：① Transwell小室：多种厂家可提供，论坛里常用的是Costar、Corning、BD生产的小室，我们实验室用的是Chemi
Transwell细胞体外侵袭实验的注意事项
2. 1NIH3T3 细胞制备的趋化因子与胎牛血清 趋化因子是能使细胞产生趋化运动的一类细胞因子[2 ] 。目前利用NIH3T3 细胞制备趋化因子做细胞体外侵袭实验的实验室比较多,时间较长且实验步骤繁琐。众所周知,胎牛血清中有趋化因子,我们在不同浓度TNFα刺激下的HCCC29810 胆囊癌细胞体外
Transwell细胞体外侵袭实验的注意事项
2. 1NIH3T3 细胞制备的趋化因子与胎牛血清 趋化因子是能使细胞产生趋化运动的一类细胞因子[2 ] 。目前利用NIH3T3 细胞制备趋化因子做细胞体外侵袭实验的实验室比较多,时间较长且实验步骤繁琐。众所周知,胎牛血清中有趋化因子,我们在不同浓度TNFα刺激下的HCCC29810 胆囊癌细胞体外
Transwell细胞体外侵袭实验的材料与方法
1. 1Matrigel：Becton Dickinson Compary, - 20 ℃保存；Tanswell plate：Costar ,USA , # 3422 ,聚碳酯膜微孔直径为8μm；苏木素染液，梯度乙醇，二甲苯溶液。1. 2 趋化因子的制备 取传代第二天长势良好的NIH3T3细胞,无
细胞侵袭实验，用结晶紫染色方法如何做
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞② 染色：采用0.1%结晶紫染色。这种方法有如下优势：(1). 不需要固定细胞，直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色，将结晶紫完全洗脱下来，洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值，间接反映细胞数。结晶紫一染就出来了，我做的时候
细胞侵袭实验，用结晶紫染色方法如何做
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞② 染色：采用0.1%结晶紫染色。这种方法有如下优势：(1). 不需要固定细胞，直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色，将结晶紫完全洗脱下来，洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值，间接反映细胞数。结晶紫一染就出来了，我做的时候
细胞迁移和细胞侵袭检测方案
细胞迁移是正常细胞的基本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。因此通过对细胞迁移（包括细胞侵袭）的研究，对阻止癌症转移、异体植皮等医学应用方面具有一定意义。细胞迁移分析
细胞计数及活力测定实验的实验原理
培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞一般也要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用
细胞增殖生长方面实验_细胞计数法
实验方法原理细胞计数法：细胞计数法是测定细胞绝对增长数值常用最简便的方法。一般过程为接种21 孔/24 孔板细胞（如用培养瓶时则21 瓶）。分7 组，每组3 孔（或瓶），培养一周，期间逐日检测一组，计数。把7天中的细胞数值绘成图，即为细胞生长曲线。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材培养瓶恒温
细胞计数与存活测试实验介绍
实验材料 0.4 % w/v trypan blue (GibcoBRL 15250-061) Erythosin bluish stain 取0.1 gram Erythrosin bluish (Sigma E-9259) 及0.05 gram preser
嗜酸性粒细胞直接计数实验
实验方法原理用嗜酸粒细胞稀释液，将血液定量稀释，并破坏红细胞和大部分其他白细胞，使嗜酸性粒细胞饭颗粒着色，滴入计数室；计数一定范围内嗜酸性细胞数，然后计算成每升血中嗜酸性粒细胞数实验材料血液试剂、试剂盒Hillkelmar乙醇一伊红稀释液伊红一丙酮液甲醛甘油柠檬酸钠仪器、耗材试管实验步骤三、实验试剂
实验室细胞计数操作步骤
细胞计数操作步骤：1.将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上；2.轻轻吹打细胞悬液，使细胞均匀分布；吸出少许细胞悬液滴在细胞入口，使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间，静置1-2min，使细胞沉降；注意盖玻片下不要有气泡，也避免细胞悬液进入旁边的槽中；3.在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的
Transwell侵袭实验总结－（1）－概念
这里想明确两个概念，一个是Transwell，另一个是肿瘤细胞侵袭模型。1．Transwell关于Transwell这个词该如何解释，查了很多资料也未见准确的注解，我觉得可以这么理解吧，trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置
Transwell侵袭实验总结－（1）－概念
这里想明确两个概念，一个是Transwell，另一个是肿瘤细胞侵袭模型。1．Transwell关于Transwell这个词该如何解释，查了很多资料也未见准确的注解，我觉得可以这么理解吧，trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置
科研实验中细胞计数与存活测试
1、原理： （1）计算细胞数目可用血球计数盘或是Coultercounter粒子计数器自动计数。 （2）血球计数盘一般有二个chambers，每个chamber中细刻9个1mm2大正方形，其中4个角落之正方形再细刻16个小格，深度均为0.1mm。当chamber上方盖上盖玻片后，每个
血细胞分析仪计数法实验
实验方法原理 电阻抗法：电路和电流与计数小孔直径成正比，当细胞通过小孔时直径变小，电流变小，将内电极与电容相接每个细胞通过小孔时形成一个脉冲，从而达到分析全血的目的． 试剂、试剂盒 血细胞稀释液 仪器清洗液 溶血剂 实验步骤 严格遵照仪器说明书或操作手册进行，但一般仪器
血细胞分析仪计数法实验
实验方法原理 电阻抗法：电路和电流与计数小孔直径成正比，当细胞通过小孔时直径变小，电流变小，将内电极与电容相接每个细胞通过小孔时形成一个脉冲，从而达到分析全血的目的． 试剂、试剂盒 血细胞稀释液仪器清洗液溶血剂 实验步骤 严格遵照仪器说明书或操作手册进行，但一般仪器操
细胞计数和活力测定实验方法
器材和试剂： 1. 倒置相差显微镜，具有10×物镜；2. 标注体积刻度的试管（圆锥形底）；3. 改良的Neubauer血细胞计数器；4. 计数器盖玻片；5. 袖珍管或等体积的塑料容器，如试管或离心管；6. 巴斯德吸管（短型和长型）；7. 可调体积的微量加样器（100—250μl）；8. 无菌枪尖；9
嗜碱点彩红细胞计数实验
实验方法原理红细胞中的嗜碱性物质用瑞氏或美蓝染液显示出红细胞中的蓝色点彩、然后计数点彩红细胞占红细胞总数的百分数。实验材料血液试剂、试剂盒碱性美蓝溶液碳酸氢钠瑞氏染液实验步骤一、实验试剂：1、碱性美蓝溶液 美蓝0.5g 碳酸氢钠3.0g,蒸馏水 加至10
培养细胞的形态观察和计数实验
实验方法原理 体外培养的细胞主要有两种状态。一种是能贴附在培养支持物上的细胞，如HeLa 细胞、NIH3T3 等，叫贴壁型细胞，体外培养的细胞大多属于这种细胞。另一种细胞并不贴附在容器的壁上，而是悬浮在培养液中生长，如HL60 细胞，叫做悬浮型细胞，这类细胞主要是血液原性或癌原性细胞。在细胞
细胞计数
原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。操作步骤：1.将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上；2.轻轻吹打细胞悬液，使细胞均匀分布；吸出少许细胞悬液滴在细胞入口，使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间，静置1-2min，使细胞
Transwell侵袭实验总结－（3）－操作步骤
．步骤2．1 Transwell小室制备2．1．1 无基质胶Transwell小室制备① 包被基底膜：用50mg/LMatrigel 1:8稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面，4℃风干。如果需要在下室面铺FN的话，可将200ul枪头的尖端剪掉,吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原（col
细胞迁移与侵袭全攻略
当需要进行细胞共培养、细胞趋化、细胞迁移以及细胞侵袭等研究的时候，需要在培养板上放入小室。小室内通称上室，培养板内则称下室，小室的底部有通透性的膜，一般常用聚碳酸酯膜（PC）；根据实验需求选择不同孔径的聚碳酸酯膜, 并且经过不同处理，就可以进行上述的实验。因为聚碳酸酯膜具有通透性，下层培养液