HPLC的线性动态范围(LinearDynanicRangeLDR)及其测试方法
1)线性动态范围的定义 国际上科技工作者对HPLC的线性动态范围的定义是：最大线性区(保证1%相对误差的线性区域)的吸光度值Amax，除以最小线性区(保证1%相对误差的线性区域)的吸光度值Amin。即LDR=Amax/Amin;或最大线性区的浓度Cmax除以最小线性区的浓度Cmin，即LDR=Cmax/Cmin。 2)HPLC的线性动态范围的重要性(对分析测试误差的影响) 定量分析检测时，如果HPLC使用在非线性动态区，肯定会因非线性而产生误差。为了保证分析测试结果的可靠性，我们应使用在HPLC的线性动态区。因此，线性动态范围是一切HPLC使用者必须高度重视的技术指标。 一般来说，使用者拿到一台HPLC仪器后，总是希望对很稀的样品分析时，其分析测试的结果在所要求的误差范围内。对很浓的样品分析时，其分析测试的结果也在所要求的误差范围内。这就只有HPLC的线性动态范围很宽的时候才能做到。有人认为，样品太稀时，浓缩......阅读全文
HPLC系统由哪些部分组成
HPLC仪一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统（色谱柱）、检测系统和数据处理与记录系统组成。1、溶剂输送系统储液器：用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器，以防止流动相中的颗粒进入泵内。脱气器：脱气的目的是为了防止流动相从色谱柱内流出时释放出气泡进入检测器，从而引起噪声，不能正常检测。
HPLC系统的酸清洗和钝化
30%磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂/洗涤剂的共同作用，可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害（特别是对日常使用低紫外波长的应用来说）。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用，但它是系统钝化前清洗的第一步。一般来说，对于阳离子的离子色谱分析或配有氧化方
减少HPLC分析中的纯水干扰
图1. 图4.带空心过滤器的 Barnstead-Nanopure-UV 试剂级纯水机与某一类似纯水机所得基线的比较（经用8升水预冲洗）。无论是质谱分析、气相色谱还是高效液相色谱，几乎没有一种分析方法可以不用纯水能够进行的。本文讨论了以下几个问题：水的纯度如何影响HPLC，水中有机物的污
HPLC/53种缓冲液配制
HPLC/53种缓冲液配制 乙醇—醋酸铵缓冲液（PH3.7） 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60 ml和水20 ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节PH值至3.7，用水稀释至1000 ml即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（PH8.0） 取三羟甲基氨基甲烷12.
HPLC－保留时间漂移的故障排除
正文保留时间不重现有两种不同的情况：既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机
HPLC色谱系统的功能介绍
主要功能 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附 -解吸的分配过程，
用HPLC分析与纯化的区别
用于分析的就是普通的高效液相色谱仪，主要的配置就是根据不同需要选择的泵（包括三元的、二元的、四元的等），柱温箱，检测器，进样器（自动的，手动的），可选的包括脱气机和控温装置。用于纯化的叫做制备液相，原理和普通的液相相似，不过他的泵叫做制备泵，他比普通液相多了几个模块，制备池、馏分收集器。高通量收集软
HPLC最低保留时间限制多少
HPLC只是分离的手段，如果保留时间太短，说明被分离物质在固定相上面的保留较差，就有可能与不保留的杂质混在一起而干扰待测物的测定，当然，这只是在使用UV、ELSD等特异性不是很强的检测器时的常见情况，但是如果使用荧光、质谱等特异性较强的检测器时，这种干扰会被大大降低或者排除。保留时间与使用的液相系统
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P
HPLC的应用以及方法开发。。
据2004年数据统计，世界上化合物总数多达4700多万种；在全部有机化合物中仅有20％左右的样品适用于GC分析，而HPLC可对80％左右的有机化合物进行分离和分析；HPLC特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物以及生物活性物质的分离和分析并且可以做制备；在医药、食品、农业、生命科学
HPLC紫外灯的维护和更换
HPLC紫外灯的维护和更换 一、HPLC紫外灯的维护 对紫外灯的最根本维护就是在不进行测定时应及时关灯。具体的做法为： 1.缩短检测前的开灯时间 尽量在检测前1小时开紫外灯，具体时间根据系统的稳定时间而定。太早会缩短灯的使用寿命太晚会浪费流动相，对色谱柱也不好。 2.检测
HPLC维修保养注意事项
液相色谱法又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等，是色谱法的一个重要分支。这种色谱分析法以液体为流动相，采用高压输液系统，具有高压、高速、高灵敏度的特点，凭借检测范围广、样品需求量少、检验效果好的优点，成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中
HPLC系统的酸清洗和钝化
30％磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂／洗涤剂的共同作用，可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害特别是对日常使用低紫外波长的应用来说。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用，但它是系统钝化前清洗的第一步。 一般来说，对于阳离子的离子色谱分
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P
液相色谱仪（HPLC）的保养
HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一，由于其精度较高，对实验人员和实验室条件要求较高，因此保养也很重要，应引起注意：1．HPLC的日常操作条件：温度：10～30℃； 相对湿度
液相色谱仪（HPLC）的保养
HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一，由于其精度较高，对实验人员和实验室条件要求较高，因此保养也很重要，应引起注意：1．HPLC的日常操作条件：温度：10～30℃； 相对湿度
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P
HPLC保留时间漂移现象原因分析
1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P
HPLC系统的酸清洗和钝化
30％磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂／洗涤剂的共同作用，可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害特别是对日常使用低紫外波长的应用来说。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用，但它是系统钝化前清洗的第一步。 一般来说，对于阳离子的离子色谱分
良好的HPLC色谱柱使用规范
1、在使用前过滤溶剂2、完全润湿在运输中变干的色谱柱3、了解溶剂对样品的溶解性及分离的影响4、对含有保留性较强的杂质组分的样品要进行预处理5、清除柱填料的局限性：pH、温度、化学兼容性6、使用新鲜的水溶液，并考虑使用生物稳定剂（如叠氮化钠）7、定期用强极性的溶剂清洗色谱柱8、储存色谱柱时，应冲净缓冲
akta与hplc操作有什么不同
1.蛋白纯化过程中很多操作习惯和HPLC有很多不同，你用HPLC做蛋白层析会很不方便2.一般的hplc不具备电导和ph的在线测量，而蛋白纯化一般需要测量此两项3.蛋白流路需要生物惰性材质，如peek、PFA红宝石、蓝宝石等，而HPLC是不锈钢系统，有些地方会有特异性吸附，甚至使蛋白变性。4.蛋白纯化
HPLC检测三聚氰胺
1、反相高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的含量2、高效液相色谱- 二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺建立用高效液相色谱- 二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺的检测方法。对不同样品采用不同的前处理方法,然后用Agilent TC2C18 4. 6 ×250 mm色谱柱,柱温为40 ℃,流动相为
HPLC高压输液泵日常保养
1. 使用高纯度试剂和HPLC级纯度的溶剂；流动相使用前必须经过过滤和脱气处理。 2. 实验开始前和实验结束后，用纯甲醇冲洗整个液体流路一定时间，可避免许多麻烦发生；不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中。 3. 平时应备有泵密封垫、单向阀、泵头装置、各式接头、保险丝等配件和工具，定期更换垫圈，需要时圆
一切完备的HPLC系统
【适用于过程控制分析的高效液相色谱系统】 仪器设备的精密性和稳定性是过程分析中获得可靠分析结果的前提，除此之外，还必须排除操作过程中的误差来源，通过适当的软件设置和易于操作的系统即可实现上述目标。 过程分析对于所应用的分析系统及其操作提出了特殊要求。要获得准确、可靠的结果，必须保证仪器
HPLC色谱流动相的脱气方法
HPLC系统的管路流体如有气泡生成，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰有的甚至影响HPLC的灵敏度.如今在使用HPLC时为防止气泡生成，主要是对色谱流动相做脱气处理，其主要的方法如下：1.吹氦脱气法使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min
如何提高－hplc－理论塔板数
方法如下 可以改变以下条件： 1，实用适当细粒度和颗粒度均匀的载体，并尽量填充均匀，是减少涡流扩散、提高柱效的有效途径 。 2，改变色谱柱的柱长，因为色谱柱的塔板数一定时，色谱柱长越短，虚拟塔板间距离越短，柱效越高。 理论塔板数 理论塔板数（theoretical plate numb
HPLC故障排除：峰形问题（二）
1.3.色谱图中所有峰拖尾或峰变形通常是由物理作用导致的，而非化学作用。如果色谱图中的峰形均表现相同类型的变形（图3），则问题最早应出现在分析物通过色谱柱迁移之前（主要问题发生在分析物在色谱柱中迁移之前）。这种峰形变形最常见的致因是：玻璃料或柱头的空隙部分堵塞（此类峰变形最常见的原因是筛板部分堵塞或
选择UPLC－还是HPLC？这是个问题
某网友：“由于所在实验室即将添置一台新质谱，质谱已经选好了，但是在液相的选择上很是犹豫，不知是否该买一台UPLC。因为经常是一次分析几百个样品，高速液相的速度会快一些。但是，生物样品的前处理要求也相应提高。而且价格也比较贵。是否需要买UPLC?还是买HPLC?想了解一下大家的使用经验和看法。”
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器，其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器，如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应，ECD，FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器，HPLC通常配置的P