HPLC的线性动态范围(LinearDynanicRangeLDR)及其测试方法
1)线性动态范围的定义 国际上科技工作者对HPLC的线性动态范围的定义是:最大线性区(保证1%相对误差的线性区域)的吸光度值Amax,除以最小线性区(保证1%相对误差的线性区域)的吸光度值Amin。即LDR=Amax/Amin;或最大线性区的浓度Cmax除以最小线性区的浓度Cmin,即LDR=Cmax/Cmin。 2)HPLC的线性动态范围的重要性(对分析测试误差的影响) 定量分析检测时,如果HPLC使用在非线性动态区,肯定会因非线性而产生误差。为了保证分析测试结果的可靠性,我们应使用在HPLC的线性动态区。因此,线性动态范围是一切HPLC使用者必须高度重视的技术指标。 一般来说,使用者拿到一台HPLC仪器后,总是希望对很稀的样品分析时,其分析测试的结果在所要求的误差范围内。对很浓的样品分析时,其分析测试的结果也在所要求的误差范围内。这就只有HPLC的线性动态范围很宽的时候才能做到。有人认为,样品太稀时,浓缩......阅读全文
液相色谱(HPLC)入门(三)
高效液相色谱量级 [分析,制备和工程]我们已经讨论了高效液相色谱如何提供分析数据,用于定性和定量样品中的化合物。然而,高效液相色谱也可以用来纯化和收集所需的每一个化合物,在流通池下游使用组分收集器。这个过程被称为制备液相[如图 K].在制备液相中,科学家可以收集每个流出色谱柱的组分[例如:在本例中,
VE中苯并芘的HPLC检测
苯并芘是由5个苯环构成的多环芳烃化合物,是一种强致癌物,在生产植物油的过程中可能因环境污染、原材料携带或加工时温度过高而产生。目前,维生素E的生产都是以植物油生产脱臭过程的副产物-脱臭馏分作为原料,因此苯并芘也不可避免地残留于脂溶性的维生素E产品中。为了评价维生素E中苯并芘含量是否超标,本方法
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话,最好还是用(水:乙腈=9:1)先冲洗一下,如果柱子里盐不冲洗干净的话,再用小极性的流动相冲柱子时,盐就会析出,影响色谱柱寿命。要是没有盐的话,就无所谓了,用甲醇乙腈冲洗都行,冲洗到什么程度,主要看柱压是否已经回落,稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂(乙腈最好)中,避
HPLC基础知识教程(四)
III.HPLC系统 HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的,不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度,要求k在1~10范围内(可用范围)或2~5(最佳范围)。k值太小,不利于分离;k值太大,可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时,不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气:由于流动
离子色谱和HPLC的区别
从色谱原理上分类,离子色谱属液相色谱的一种,但由于离子色谱与普通高效液相色谱在结构和分析对象上有一些差异,一般作为独立的一个色谱大类考虑。离子色谱与高效液相色谱的差别主要体现在仪器结构和应用范围两个方面。 1)在仪器结构方面:离子色谱和高效液相色谱均有溶剂输送系统、进样系统、检测系统和信号记录
HPLC与GC有什么差别?
HPLC可通过高效液相色谱(HPLC)被称为(高效液相色谱)也称为高压液相色谱法。与气相色谱最重要的区别如下:高效液相色谱流动相为液体(液-液分配原理)。GC的流动相(载气)为气体(气-液分配原理)。但是,这两项工作所采用的分离原理基本相同,都是用色谱理论分析的,都可以使用多种检测器,常用于定量分析
hplc进样浓度多少合适
3ug/ml。HPLC高效液相色谱法,High Performance Liquid Chromatography缩写,进样浓度为3ug/ml,S/N为180,一针一针试,先配一个浓度进针再根据结果调整,6次进样,最小检测浓度不超过1×10-7g/ml萘/甲醇溶液, 高效液相色谱法(HPLC)是应用
HPLC常见故障排除小贴士
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。 鉴于HPLC在全行业运用越来越广泛,因此每一个实验室分析人员都应该熟练掌握并应用HPLC,对于一些常见的故障分析应该做到游刃有余,才能在运行故障的时候即使解决问题,提高工作效率。
水质对-HPLC-分析的影响
简介: 优化的高效液相色谱法分析需要高纯度溶剂和试剂。同时,在流动相准备阶段,色谱柱中盐和有机溶剂的选择十分谨慎,所以水质是非常重要的。在洗脱液中,中痕量有机物的存在可能会导致长期不好的结果。随着时间推移,柱效可能会阻塞,导致分辨率降低,峰拖尾。大量实验表明,水中的有机物可能极大地影响液相色谱
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的,不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度,要求k在1~10范围内(可用范围)或2~5(最佳范围)。k值太小,不利于分离;k值太大,可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时,不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气:由于流动
HPLC的故障及处理(二)
(五) 鬼峰1.进样阀残余峰 每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗。2.样品中未知物 处理样品。3.柱未平衡 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)。4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂。5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水。(六) 基线
HPLC基础知识教程(三)
4.相平衡参数 分配系数(distributioncoefficient,K)——在一定温度下,化合物在两相间达到分配平衡时,在固定相与流动相中的浓度之比。K=。 分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中,K有不同的概念:吸附色谱法为吸附系数
HPLC基础知识教程(六)
1.柱的构造 色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话,最好还是用(水:乙腈= 9:1)先冲洗一下,如果柱子里盐不冲洗干净的话,再用小极性的流动相冲柱子时,盐就会析出,影响色谱柱寿命。要是没有盐的话,就无所谓了,用甲醇 乙腈冲洗都行,冲洗到什么程度,主要看柱压是否已经回落,稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂(乙腈最好)中
HPLC基础知识教程(九)
5)、池体积:除制备色谱外,大多数HPLC检测器的池体积都小于10µ;l。在使用细管径柱时,池体积应减少到1~2µ;l甚至更低,不然检测系统带来的峰扩张问题就会很严重。而且这时池体、检测器与色谱柱的连接、接头等都要精心设计,否则会严重影响柱效和灵敏度。 3.紫外检测器(ul
HPLC是做什么的
HPLC是高效液相色谱,英文全称是HighPerformanceLiquidChromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、
赛默飞在HPLC-2018推出最新HPLC色谱柱--提供更高分辨率
分析测试百科网讯 第47届高效液相分离及相关技术国际研讨会于2018年7月29日-8月2日在华盛顿举行,为了支持高效液相色谱的创新和应用,赛默飞在会上展示其最新的HPLC色谱柱产品。 “我们的客户不断面临新的分析挑战,因为他们使用用HPLC来加深对分析样品,”赛默飞色谱和质谱分析的副总裁兼总经
依利特将参加HPLC-2011-Dalian
依利特分析仪器有限公司将参加2011年10月8日至11日在大连世界博览广场览馆举办的第37 届国际高效液相色谱及相关技术会议(含仪器展览会)(HPLC 2011 Dalian)。 期间我们将向您展出大流量工业制备型高效液相色谱仪、P1201高效液相色谱仪、LU23
HPLC紫外灯的维护和更换
HPLC紫外灯的维护和更换 一、HPLC紫外灯的维护 对紫外灯的最根本维护就是在不进行测定时应及时关灯。具体的做法为: 1.缩短检测前的开灯时间 尽量在检测前1小时开紫外灯,具体时间根据系统的稳定时间而定。太早会缩短灯的使用寿命太晚会浪费流动相,对色谱柱也不好。 2.检测
HPLC色谱系统的功能介绍
主要功能 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附 -解吸的分配过程,
液相色谱仪(HPLC)的保养
HPLC为广大药学工作者日常工作中必不可少的仪器之一,由于其精度较高,对实验人员和实验室条件要求较高,因此保养也很重要,应引起注意:1.HPLC的日常操作条件:温度:10~30℃; 相对湿度
分享|HPLC的酸清洗和钝化!
HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸,暴露在实验室化学环境,与零部件制造相关的残留物,或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗,但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上,因而会降低总的性能。 •磷酸清洗:通常用于从系统中除去有机杂质。
用HPLC分析与纯化的区别
用于分析的就是普通的高效液相色谱仪,主要的配置就是根据不同需要选择的泵(包括三元的、二元的、四元的等),柱温箱,检测器,进样器(自动的,手动的),可选的包括脱气机和控温装置。用于纯化的叫做制备液相,原理和普通的液相相似,不过他的泵叫做制备泵,他比普通液相多了几个模块,制备池、馏分收集器。高通量收集软
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器,其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器,如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应,ECD,FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器,HPLC通常配置的P
HPLC-保留时间漂移的故障排除
正文保留时间不重现有两种不同的情况:既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上,保留时间漂移的多半原因是不同机
HPLC最低保留时间限制多少
HPLC只是分离的手段,如果保留时间太短,说明被分离物质在固定相上面的保留较差,就有可能与不保留的杂质混在一起而干扰待测物的测定,当然,这只是在使用UV、ELSD等特异性不是很强的检测器时的常见情况,但是如果使用荧光、质谱等特异性较强的检测器时,这种干扰会被大大降低或者排除。保留时间与使用的液相系统
HPLC出峰太早怎么办
液相色谱出峰时间有死时间和保留时间..一般来讲死时间是指溶剂从通入到被检测到的时间,而死时间是被检测物质的特征时间,用来判断物质是什么,所以无所谓好不好。
HPLC中的响应因子是什么
进样单位检测物质时检测器的响应值。响应因子=A/W。HPLC以及GC是制药行业应用最多的分析仪器,其配置的各种检测器包括通用型检测器以及一些化合物特异性检测器,如GC通用型FID检测器对几乎所有有机化合物均有较好的响应,ECD,FPD检测器则是检测谱相对比较窄的化合物特异检测器,HPLC通常配置的P