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NC:分析酵母高效生产蛋白需要的全局性代谢调控

现代农业的集约化经营以及农药等化学试剂的大量使用,致使蜜蜂等多数授粉昆虫逐渐减少。这些昆虫给作物授粉,如果它们消失,大部分食物也会消失。油棕(Elaeis guineensis)属多年生单子叶植物,原来高度依赖于人工授粉和风媒,授粉效果差,产量低。自上世纪80年代,东南亚国家从非洲引种一种授粉昆虫——象鼻虫(Elaeidobius kamerunicus)后,提高了生产率,节约了劳动力成本,单株产量提高30-40%,异地引种授粉昆虫或能为现代农业提供参考。作为一个群体,象鼻虫因与油棕开花紧密相关而为人所知,它们作为传粉者的历史可追溯到距今1350万-1800万年前的侏罗纪和白垩纪时代,被认为是最古老的传粉昆虫之一,但其与油棕花之间的特异识别和调控机制,却知之甚少。中国科学院微生物研究所叶健课题组联合新加坡、印度尼西亚和美国等多个实验室的科研人员合作研究,揭示了调控油棕合成次生代谢物吸引象鼻虫授粉行为的分子机制。 研究人员对......阅读全文

如何获得精准的Western Blot实验结果

  蛋白质免疫印迹杂交实验(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单,但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差,导致刚进实验室的小伙伴们,实

如何获得精准的Western Blot实验结果

蛋白质免疫印迹杂交实验(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单,但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差,导致刚进实验室的小伙伴们,实验做

如何获得精准的Western Blot实验结果

蛋白质免疫印迹杂交实验(Western Blotting)是成熟 mRNA 翻译指导蛋白质合成量分析检测手段中最经典和最广泛为业界认可的一种,也是论文中最常见的数据呈现形式之一。虽然Western Blot实验原理比较简单,但是实验耗时长、步骤繁琐和实验结果重复性差,导致刚进实验室的小伙伴们

WB注意这些问题,新手也能做出满意结果!

Western blot(WB)是检测蛋白质及蛋白质翻译后修饰的经典方法,可在简单或复杂的生物样品中提供有关靶蛋白的半定量或定量数据。WB 步骤复杂,通常包括:蛋白样本制备→电泳→转膜→封闭→孵育一抗→孵育二抗→显影→分析。WB 任何过程出现 Bug 均可影响结果的重复性与灵敏度,因此必须注意将 W

满足这个4个条件才算成功完成Western Blot检测

  成功完成一项Western Blot检测,必须满足4个条件:   凝胶洗脱:转移期间蛋白质必须从凝胶中洗脱出来,如果蛋白质还截留在凝胶中,将无法在膜上进行分析。   吸附到膜上:在转移过程中蛋白质必须吸附到膜上,如果蛋白不吸附,将无法在膜上进行分析。   处理期间仍截留在膜上:在转移后的处

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧-1

硝酸纤维素膜又称为NC膜, 在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处.所以NC膜成为该试验中最重要的耗材,而由于其属于非标准器件,基本上每个项目开始阶段都会遇到如何选择合适的NC膜的问题.同时也存在是否要对NC膜进行后期处理及如何处理的讨论. 一. NC膜的生产原理这个

如何选择蛋白印迹实验中的印迹膜?

硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白和核酸杂交最常用的印迹膜,是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的应用。目

引物合成详解

  1. 引物是如何合成的?   目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,而Bioneer自行研制的专利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合成产率的高低,试剂消耗量的不

引物合成详解

  1. 引物是如何合成的?   目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,而Bioneer自行研制的专利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合成产率的高低,试剂消耗量的不

引物合成相关问题25答

  1. 引物是如何合成的?  目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,而Bioneer自行研制的专利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合成产率的高低,试剂消耗量的不同和

25 个引物相关的问题

1.      引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,而Bioneer自行研制的专利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合

25 个引物相关的问题

1.      引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,而Bioneer自行研制的专利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合

胶体金标记技术(制备方法和应用)

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细

Azure Biosystems Western blotting之实验秘籍

  蛋白分离、杂交、检测、分析   前瞻回顾   鉴于小编在《Azure Biosystems Western Blotting工作流程之实验方法的选择》中和大家聊了Western blot的实验方法选择,相信大家已经将您的western blot 实验方法选择好了,那么这期小编和大家聊聊wes

Western Blot详解-常见的问题指南(二)

4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别?解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物,价格最便宜;PVDF膜介于二者之间。就结合能力而言:尼龙膜结合DNA和RNA能力可达480-600μg/cm2,可结合短至10bp的核酸

免疫印迹法实验原理和常见故障分析

 免疫印迹法(western blot) 原理:    通过电泳区分不同的组分,并转移至固相支持物,通过特异性试剂(抗体)作为探针,对靶物质进行检测,蛋白质的Western印迹技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种特点,可检测到低至1~5n

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究 1

摘 要:腹泻性贝毒是一类分布较广的赤潮毒素,严重威胁到人类的健康和安全。本文用胶体金标记利用细胞融合技术制备的抗软海绵酸单克隆抗体,使用卵清蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,利用免疫层析技术原理,建立了快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。方法检出限12 ng/ mL (0

蛋白质印迹的实验原理、方法与步骤

实验概要本实验介绍了蛋白质印迹与探测(Western Blot)实验原理、方法与步骤。实验原理Western  Blot(蛋白质印迹或免疫印迹)技术,以蛋白质为检测对象,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。实验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将样品蛋白质分离,再转移到固相载体(PVDF

免疫印迹Western bloting实验原理

这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。材料(MATERIALS):o  试剂(R

免疫印迹Western bloting实验原理

  免疫印迹Western bloting    这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。

第一届全国石油化工分析技术报告会落幕 颁优秀论文奖

  分析测试百科网讯 2018年10月26日,由中国石油学会石油炼制分会主办,北京理化分测试技术学会和中国石化石油化工科学研究员承办的“第一届全国石油化工分析测试技术暨第十一届全国石油化工色谱学术报告会”(相关报道:第一届全国石油化工分析测试技术报告集锦(一);邂逅色谱——助力石化提质增效、低碳绿色

郑州大学王朝阳JACS发文:超原子银纳米簇研究获突破

  分析测试百科网讯近日,《美国化学会志》(Journal of the American Chemical Society,JACS,影响因子为13.18)报道了郑州大学化学与分子工程学院臧双全教授课题组的最新研究成果:《原子尺寸精确的超原子银纳米簇的精准修饰与定向组装》(Atomically P

脱发是因为头发变皮肤?

  衰老会使我们原本茂盛的头发越来越稀疏,甚至完全消失。二月四日Science杂志以两篇论文、一篇评论文章的形式,揭示了这一过程背后的神秘机制,阐述了衰老、脱发与干细胞之间的关系。   东京医科牙科大学的研究团队发现,衰老会损害毛囊干细胞,使它们变成皮肤。随着时间慢慢推移,这个问题发生在越来越多的

三篇Science:脱发是因为头发变皮肤?

  衰老会使我们原本茂盛的头发越来越稀疏,甚至完全消失。二月四日Science杂志以两篇论文、一篇评论文章的形式,揭示了这一过程背后的神秘机制,阐述了衰老、脱发与干细胞之间的关系。  东京医科牙科大学的研究团队发现,衰老会损害毛囊干细胞,使它们变成皮肤。随着时间慢慢推移,这个问题发生在越来越多的干细

三篇Science:揭秘“衰老、脱发与干细胞”的关系

  衰老会使我们原本茂盛的头发越来越稀疏,甚至完全消失。二月四日Science杂志以两篇论文、一篇评论文章的形式,揭示了这一过程背后的神秘机制,阐述了衰老、脱发与干细胞之间的关系。  东京医科牙科大学的研究团队发现,衰老会损害毛囊干细胞,使它们变成皮肤。随着时间慢慢推移,这个问题发生在越来越多的干细

连续流生物酶催化反应技术介绍

随着生物制药和绿色食品产业的发展,酶催化合成已经成为一股强劲的技术潮流,吸引了很多的技术人员和资金的投入。能否将高效的微反应技术和酶催化技术集成,应用于高效绿色合成过程呢? 2015年,康宁欧洲技术中心(法国)Daniela Lavric博士和斯洛文尼亚的卢布尔雅那大学(University of

影响蛋白与硝酸纤维素膜结合的四个主要方面

1、用于溶解捕获试剂的缓冲液2、膜本身3、捕获试剂本身4、蛋白结合时的周围环境(主要指湿度) 缓冲液的使用合适的缓冲液必需能够溶解捕获蛋白以达到应用所需浓度,并能保持稳定(换言之,即溶解蛋白并维持其结合能力)。要获得最佳的结合意味着创造利于蛋白分散于固相的最佳条件。随着捕获蛋白不同,蛋白与膜结合的优

现代化生物实验室设计要求有哪些方面?

现代化生物实验室工艺设计任务书的制定,包括:制定实验楼每个部门、每个实验室的面积和功能要求;制定生物实验室每间房的建筑、装修内容,门窗要求,环境控制、电力(照明、通讯及网络等)、气体管道、给排水、空调、消防控制、结构等工艺设计的要求;制定每间生物实验室所需固定实验设备清单。 具体地说,现代

生物实验室如何进行规划和设计

一、概述 生物实验室设计内容包括制定实验楼每个部门、每个实验室的面积和功能要求;制定生物实验室每间房的建筑、装修内容,门窗要求,环境控制、电力(照明、通讯及网络等)、气体管道、给排水、空调、消防控制、结构等工艺设计的要求;制定每间生物实验室所需固定实验设备清单。   现代

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究 2

1. 3. 5  贝类样品处理方法 贝类样品的测定:取新鲜的扇贝,去壳,匀浆,取少许匀浆,加入OA 标准品,使其含量为20μg/ 100 g ,取加标匀浆,用4 倍体积(m∶V = 1∶4) 的80 %甲醇2水超声萃取5 min ,离心,上清液用PBS 稀释3 倍,在96 孔加样板上,