制备色谱分离纯化之流动相选择

制备色谱的目的,是从混合物中得到高纯单组份,和分析色谱不同,在选用流动相时,还要考虑后续溶剂去除等分离操作(旋蒸、冻干等方法)。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用,另溶剂的纯度也要考虑在其中。这里小编介绍下制备色谱做分离纯化的流动相选择。 一般常用的正相,反相流动相 制备色谱纯化工艺开发的难点1、合适填料的选择2、流动相方法的开发流动相方法的开发同填料选型一样重要,方法优化过程重复繁琐,开发出好的制备工艺需要丰富的制备经验支持,月旭科技分离纯化技术实验室能为您提供分离纯化工艺开发服务。 案例-某药企生物碱样品制备工艺开发 ......阅读全文

高效液相色谱仪流动相选择方法

流动相选择方法 1:由强到弱: 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。  2: 三倍规则 :每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调

反相色谱流动相的选择注意事项

  在液质联用中,一般均使用极性溶剂进行洗脱。反相色谱中洗脱强度顺序为:水

离子交换色谱的流动相的选择

  离子交换色谱的流动相必需是有一定离子强度的并对pH 有一定缓冲能力的溶液。为了避免目的蛋白失活,使用缓冲液可稳定流动相的pH,使之在色谱过程中不发生明显变化,同时可稳定目的分子上的电荷量,保证色谱结果的重要性。选择缓冲液一般按照以下原则:阳离子交换剂应选用阴离子缓冲液,可用柠檬酸盐、磷酸盐、醋酸

如何-选择-液相色谱流动相ph和-溶剂-要求

当然要根据你测定的物质来确定。一般极性小的物质,有机相会相对大一些,极性大的物质就可以小一些。有些特殊的物质会易溶于酸或碱,根据这些来进行调整。简单说就是保证你的测定物质可以溶于流动相。此外的一些缓冲盐比较复杂,最好在网上搜索类似的方法加以改进。注意的是要保证你的方法在色谱柱的适用范围内,如果方法特

气相色谱仪常识之气相色谱的分离原理

气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配使原来只有微小的性质差异产生很大的效果,而使不同组分得到分离。气相色谱仪主要特性:1、全气相色谱仪,可直接接驳HP5890微型单丝热导检测器、氢火焰离子化检

基于高压制备液相的多维色谱技术在中药分离纯化中应用

    中药广泛应用于疾病的预防和治疗LU。快速分离纯化技术对于理解中药复杂的物质基础、控制中药质量和发现潜在活性物质具有重要意义,也是目前中药研究的热点问题之一。作为分析型高效液相色谱系统的延伸,高压制备液相系统能够在保证样品分离度的前提下,大幅度提高载样量,从而快速获得高纯度的目标化合物。目前,

基于高压制备液相的多维色谱技术在中药分离纯化中应用

  1 引 言   中药广泛应用于疾病的预防和治疗[1]。快速分离纯化技术对于理解中药复杂的物质基础、控制中药质量和发现潜在活性物质具有重要意义,也是目前中药研究的热点问题之一。作为分析型高效液相色谱系统的延伸,高压制备液相系统能够在保证样品分离度的前提下,大幅度提高载样量,从而快速获得高纯度的目标

薄层色谱之吸附色谱的基本原理、流动相要求

薄层色谱,与其他色谱技术的原理一样,是一种利用样品中各组成成分的不同物理特性把它们分离开来的技术。这些物理特性包括分子的大小、形状、所带电荷、挥发性、溶解性及吸附性等。薄层色谱分离一般是由几种分离机理综合的结果,最多的是吸附和分配,也有离子交换或凝胶渗透。鉴于在薄层色谱的过程中,固定相和流动相的特性

高效液相色谱分离模式的选择

基于样品的一般性质选择分离模式的基本原则。

气相色谱分离操作条件的选择

气相色谱条件主要受载气种类、流速、柱温、汽化温度、柱长、柱内径、进样时间和进样量等因素影响。根据范第姆特方程,流速是影响塔板高度的重要因素,通常选择稍高于最佳流速的载气流速;载气流速大时,应选择相对分子量小,扩散系数大的H2,Ne等作载气,反之选择相对分子量大,扩散系数小的N2,Ar等作载气;提高柱

选择液相色谱流动相时应考虑以下几个方面?

选择流动相时应考虑以下几个方面:1)流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2)纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含

液相色谱对流动相选择的一般要求

液相色谱所采用的流动相通常为各种低沸点有机溶剂与水或缓冲溶液的混合物。为了保证色谱系统的分离过程可重复性,流动相所采用的溶剂必须具有较高的纯度和化学稳定性。从实用角度考虑,溶剂应价格低廉、容易购得且使用安全。对流动相选择的一般要求包括:  1 化学稳定性好,不与固定相和样品组分发生化学反应;  2 

流动相的选择原则

选择流动相时应考虑以下几个方面:1)流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2)纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含

HPLC流动相如何选择

对于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时,如果得到的色谱图出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质,要选用乙腈/水作流动相。

HPLC流动相如何选择

对于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时,如果得到的色谱图出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质,要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对

流动相的选择秘诀

  秘诀1:由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。  秘诀2: 三倍规则:每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明

HPLC流动相如何选择

对于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时,如果得到的色谱图出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质,要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对

液固吸附色谱仪流动相的选择

在液固吸附色谱仪中,除了固定相对样品的分离起主要作用外,流动相的恰当选择对改善分离效果也产生重要效应。一、使用极性固定相时:使用硅胶和氧化铝等极性固定相时,应以弱极性的戊烷、己烷和庚烷作为流动相的主体,再适当加入二氯甲烷、氯仿、异丙醚、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚等中等极性溶剂,或适当加入四氢呋喃、乙腈、

高效液相色谱仪流动相选择要求?

高效液相色谱仪流动相选择要求?1.流动相的性质要求液相色谱理想的流动相溶剂应具有粘度低、与检测器相容性好、易于获得纯产品、毒性低等特点。选择流动相时应考虑以下方面:流速不会改变填料的任何性质 离子交换树脂的低交联度和排斥色谱填料有时会使有机相发生一定的膨胀或收缩,从而改变填料床的性能。 碱性流动相不

液固吸附色谱仪流动相的选择

在液固吸附色谱仪中,除了固定相对样品的分离起主要作用外,流动相的恰当选择对改善分离效果也产生重要效应。一、使用极性固定相时:使用硅胶和氧化铝等极性固定相时,应以弱极性的戊烷、己烷和庚烷作为流动相的主体,再适当加入二氯甲烷、氯仿、异丙醚、乙酸乙酯和甲基叔丁基醚等中等极性溶剂,或适当加入四氢呋喃、乙腈、

流动相pH小于2,注意色谱柱选择哦!

例如中性化合物在反相色谱系统的保留与流动相pH无关;酸性化合物在pH 趋于酸性(pH变小,尤其低于化合物的pka 值)时会因状态趋于中性而增加保留;而碱性化合物在流动相pH 趋于碱性(pH 变大,尤其高于化合物的pka 值)时会因状态趋于中性而增加保留。 但是各位小伙伴知道吗,如果调节流动相的pH过

高效液相色谱仪流动相的选择原则

1、选择色谱醇的溶剂作为流动相不要随意加满溶剂瓶。作为分析流动相,应避免不必要的浪费,防止污染环境,危害身体健康。应该根据样哦数量,计算需要使用的溶剂体积,添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。因为有些有机溶剂长期放置易变质,比如在光照下就容易变质,甲醇或乙醇长期放置会生成酯类,乙腈水溶液会分解为醋酸

液相色谱仪流动相的选择与优化

    液相色谱是目前应用多的色谱分析方法,液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。液相色谱的流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。它是影响分离的一个非常重要因素。在实际工作中,流动相的选择和优化是确

液相色谱仪流动相过滤滤膜的选择

液相色谱仪所有流动相溶剂使用前都必须经0.45μm或0.22μm滤膜过滤,以除去杂质微粒。色谱纯试剂也不例外,除非在标签上标明已过滤。用滤膜过滤时,要注意分清有机相(脂溶性)滤膜和水相(水溶性)滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂,过滤水溶液时流速低或过滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液,严禁用于有

离子交换色谱的流动相简介及其选择

  离子交换色谱的流动相必须是有一定离子强度的并且对pH有一定缓冲能力的溶液。选择流动相时需要考虑以下几方面。  1、离子交换后,流动相pH的改变  基于离子交换的原理,目的分子在与介质上的反离子交换后,释放到溶液中的反离子可以使液相中的离子强度增大,pH可能会发生改变,有可能导致目的分子失活。所以

单抗制备、血细胞纯化、细胞器分离的离心条件选择

通用离心机在各行业应用得非常广泛。目前在科研单位应用比较多的离心机产品有高速离心机、血液离心机、细胞离心机等,种类繁多,功能也不尽相同。不同试验需要不同的离心条件,经常需要对细胞悬液离心,以增加细胞浓度或洗除有关试剂,可调节的台式离心机就能满足大多试验的需求,那么本文简单介绍一下在单抗制备、血细胞纯

制备型液相色谱仪分离和纯化优化方法介绍

 一、制备型液相色谱仪的选择方法  1、分离模式的选择(在样品可能分离的条件下使用分析色谱柱进行测试)  如果样品有多种可分离的模式,请在选择上考虑以下几点  1)分离的效率:分离能力、样品上样量、制备时间;  2)经济性:填料、流动相的成本、单位时间的处理量;  3)其他:安全性、目标成分的变性、

应用半制备液相色谱分离制备高纯度苜蓿素

竹茹BambusaeCaulisinTaenias作为药食两用的药材,在《中药辞海》中记载为禾本科刚竹属、箣竹属和牡竹属中一些竹种的茎秆所刮下的外皮层或其次一层,具有清热化痰、除烦止呕等功效,常用于治疗热痰引起的痰热咳嗽、痰火挟痰、烦热呕吐等病症,在《神农本草经》中列为中品,《药品化义》曰:“竹茹轻

气相色谱仪分离条件的选择

气相色谱仪分离条件的选择包括载气的种类及流速、载体的性质及粒度、固定液性质、固定液用量、进样速度、进样量、气化温度和柱温等方面。一、载气的种类及流速:在一定的温度下,塔板高度是载气流速的函数。对于一定的样品和色谱柱,有一个最佳载气流速,此时的塔板高度最小,柱效最高。当要求载气流速较小时,可选择分子量

气相色谱仪分离条件的选择

气相色谱仪分离条件的选择包括载气的种类及流速、载体的性质及粒度、固定液性质、固定液用量、进样速度、进样量、气化温度和柱温等方面。一、载气的种类及流速:在一定的温度下,塔板高度是载气流速的函数。对于一定的样品和色谱柱,有一个最佳载气流速,此时的塔板高度最小,柱效最高。当要求载气流速较小时,可选择分子量