制备色谱分离纯化之流动相选择

制备色谱的目的,是从混合物中得到高纯单组份,和分析色谱不同,在选用流动相时,还要考虑后续溶剂去除等分离操作(旋蒸、冻干等方法)。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用,另溶剂的纯度也要考虑在其中。这里小编介绍下制备色谱做分离纯化的流动相选择。 一般常用的正相,反相流动相 制备色谱纯化工艺开发的难点1、合适填料的选择2、流动相方法的开发流动相方法的开发同填料选型一样重要,方法优化过程重复繁琐,开发出好的制备工艺需要丰富的制备经验支持,月旭科技分离纯化技术实验室能为您提供分离纯化工艺开发服务。 案例-某药企生物碱样品制备工艺开发 ......阅读全文

气相色谱仪分离条件的选择

气相色谱仪分离条件的选择包括固定相、固定液配比、柱内径、柱长、柱温、载气种类、载气流速、进样方式、进样量和气化温度等选择。一、固定相的选择:根据相似相溶的原则选择。二、固定液配比的选择:配比是指涂在载体上的固定液与载体的质量之比。配比通常在5%~25%。配比越低,载体上形成的液膜越薄,传质阻力越小,

气相色谱仪分离条件的选择

气相色谱仪分离条件的选择包括载气的种类及流速、载体的性质及粒度、固定液性质、固定液用量、进样速度、进样量、气化温度和柱温等方面。一、载气的种类及流速:在一定的温度下,塔板高度是载气流速的函数。对于一定的样品和色谱柱,有一个最佳载气流速,此时的塔板高度最小,柱效最高。当要求载气流速较小时,可选择分子量

气相色谱仪色谱柱的选择与制备

气相色谱仪色谱柱的选择与制备:一、固定相的选择:根据相似相溶的原则选择固定液。二、柱内径的选择:一般来说,柱内径不影响分离度和分析时间。目前,柱技术已发展到不同柱内径的柱子能够具有相同的性能,不同内径的柱子又各具特点。对相同的分离度和分析时间来说,内径小的柱子比内径大的柱子消耗地溶剂少。对相同的检测

气相色谱仪色谱柱的选择与制备

气相色谱仪色谱柱的选择与制备:一、固定相的选择:根据相似相溶的原则选择固定液。二、柱内径的选择:一般来说,柱内径不影响分离度和分析时间。目前,柱技术已发展到不同柱内径的柱子能够具有相同的性能,不同内径的柱子又各具特点。对相同的分离度和分析时间来说,内径小的柱子比内径大的柱子消耗地溶剂少。对相同的检测

液相色谱仪流动相和固定相选择标准

色谱柱是色谱仪分析系统中的核心,色谱柱分离度会影响到检测结果的速率和准确性。美国药典对色谱法规定较严,它规定了色谱柱的长度,填料的种类和粒度,填料分类也较详细,这样使色谱图易于重现;而中国药典仅规定填料种类,未规定柱的长度和粒度,这使检验人员难于重现实验,在某些情况下还浪费时间和试剂。因此,在液相色

液相色谱仪分析中流动相流速的选择

液相色谱仪分析中,柱效是色谱柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求最优柱效,最好使用最优流速。一、最优流速的选择:1、内径4mm色谱柱,流速一般为0.8mL/min。2、内径4.6mm色谱柱,流速一般为1mL/min。3、内径10mm制备柱,流速一般为

液相色谱仪流动相选择应考虑的因素

液相色谱仪流动相有两个作用,一是携带样品前进,二是给样品提供一个分配相,调节选择性,以达到样品的满意分离。流动相对样品的分离影响很大,通常是一些有机溶剂、水溶液和缓冲溶液等。液相色谱仪流动相选择应考虑与检测器相适应、与色谱系统相适应、流动相粘度和溶剂纯度等因素。一、与检测器相适应:1、紫外吸收检测器

反相离子抑制色谱仪流动相的选择

采用反相色谱分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相pH值,抑制样品组分的解离、增加组分在固定相上的保留和改善峰形的反相液相色谱仪,称为反相离子抑制色谱仪。一、弱酸样品:对于弱酸样品,流动相pH值越小,组分k值越大,当pH值远远小于弱酸pKa值时,弱酸主要以分子形式存

液质联用色谱仪流动相的选择

液质流相选甲醇水体系于液相色谱言物质离基于测物流相固定相间配比同获管性物质要两相间配比同离流相改变获取配比差异已液质流相选择:1、流性主要看结构极性溶解性酸碱敏性等等 体机相乙腈甲醇水相甲酸水乙酸水甲醇水或者加点乙酸铵等2、再看化合物质谱条件(+)则水相加甲酸乙酸般0.1%0.2%条件原则能浓度低要

正相色谱法流动相配比选择的原则

正相色谱选择原则与反相色谱相仿,正己烷相当于是在反相色谱中的水相,而乙醇、四氢呋喃或氯仿等相当然于反相色谱中的乙腈或甲醇,三氟乙酸和三乙胺也是用来调节PH值的,但有一个问题要注意,一般 正相色谱不用缓冲盐,因为正相色谱一般只用有机溶剂,不用水相,所以与缓冲盐不溶解。而通常正乙烷的量都是超过50%的。

流动相和流量的选择

ESI和APCI分析常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液,如甲酸铵、乙酸铵等。HPLC分析中常用的磷酸缓冲液以及一些离子对试剂如三氟乙酸等要尽量避免使用,不得已时也要尽量使用低浓度。    流量的大小对LC-MS成功的联机分析十分重要。要从所用柱子的内径

如何选择适当的流动相

要根据样品的性质、PH值、样品的溶解度,由样品在有机溶剂中溶解度的大小,初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物,进而推断用非极性溶剂戊烷、己烷、庚烷等,还是极性溶剂二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品,并通过实验判断.若样品溶于非极性溶剂,表明样品为非极性化合物,通常可以选吸附色谱法或

LCMS高效液相色谱质谱仪流动相的制备要求

高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法。

液相色谱流动相脱气

流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化,对分

液相色谱流动相小议

一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流

反相色谱分离极性物质的高水流动相的色谱填料塌陷

在如今的色谱分析应用中,反相色谱无疑是应用的zui为广泛的色谱分离模式.但是当用反相色谱法分离极性化合物时,因为溶解度的因素很多极性化合物更适用于用高水流动相,有的甚至要在非常高的水流动相时色谱柱才具有保留能力,一些非常高极性的化合物甚至要用100%的水作流动相.而反相色谱柱的固定相通常疏水性很强,

蛋白分离色谱与高压制备液相色谱异同讨论

蛋白分离色谱与高压制备液相色谱异同讨论快速蛋白液相色谱(FPLC)、中压液相色谱(MPLC)、低压液相色谱(LPLC)是近年来从HPLC基础上发展的新型色谱技术,其中FPLC能以极快的速度把复杂混合物分离,可在短时间内大量纯化样品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科学研究及

制备型高速逆流色谱分离纯化长松萝中的松萝酸

摘 要:利用制备型高速逆流色谱分离纯化长松萝中的松萝酸,经过高效液相色谱、核磁共振检测,确定其纯度及结构。将长松萝破碎后用石油醚(60~90℃)回流浸提4h,浸提液经过滤浓缩后得到松萝酸粗提物。采用正己烷:乙腈:乙酸乙酯:水(8:7:5:0.8,V/V)的两相体系将所得的粗提物进行制备型高速逆流色谱

高效液相色谱流动相的选择、使用及贮存需注意哪些?

高效液相色谱的流动相通常是各种低沸点溶剂和水溶液。它是影响分离的一个非常重要因素。在实际工作中,流动相的选择和优化是确定色谱分析的主要工作。流动相溶剂的选择1)所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2)溶剂应当不干

反相键合相色谱仪固定相和流动相的选择

在反相键合相色谱仪中, C18是常用的键合固定相,水是常用的流动相弱组分,重要的是选择流动相的强组分,常用的强组分有甲醇、乙腈和四氢呋喃。反相键合相色谱仪流动相的选择规则如下:一、若样品中含有两个以下氢键作用基团(如-COOH、-NH2和-OH等)的芳香烃邻、对位或邻、间位异构体,可选用甲醇-水为流

液相色谱HPLC流动相的溶剂怎么选择应遵循什么原则?

流动相溶剂的选择:正确选择流动相溶剂对高效液相色谱的成功至关重要。目前还没有理想的选择模式这主要取决于经验的积累。流动相溶剂选择的一般要求是:(1)溶剂应纯度高,不溶于固定相,并能保持色谱柱的稳定性;(2)溶剂的性能应与所用的检测器相匹配;(3)溶剂应具有足够的样品溶解能力;(4)溶剂应该具有低粘度

色谱分离条件选择

一. 减小柱内展宽,提高柱效 l. 固定相:①粒度小,均匀,以减小涡流扩散和流动相传质阻力;②改进结构,尽可能采用大孔径和浅孔道的表面多孔型载体或全多孔微粒型载体,减少滞留流动相传质阻力。 2. 流动相:选用低粘度的流动相,有利于增大组分在溶剂中的扩散系数Dm,减少传质阻力。 3. 流速:从H-U曲

色谱分离条件选择

一. 减小柱内展宽,提高柱效l. 固定相:①粒度小,均匀,以减小涡流扩散和流动相传质阻力;②改进结构,尽可能采用大孔径和浅孔道的表面多孔型载体或全多孔微粒型载体,减少滞留流动相传质阻力。2. 流动相:选用低粘度的流动相,有利于增大组分在溶剂中的扩散系数Dm,减少传质阻力。3. 流速:HPLC的最佳流

色谱分离条件选择

  一. 减小柱内展宽,提高柱效    l. 固定相:①粒度小,均匀,以减小涡流扩散和流动相传质阻力;②改进结构,尽可能采用大孔径和浅孔道的表面多孔型载体或全多孔微粒型载体,减少滞留流动相传质阻力。    2. 流动相:选用低粘度的流动相,有利于增大组分在溶剂中的扩散系数Dm,减少传质阻力。

气相色谱之毛细管柱的选择

一、毛细管柱固定液的选择 1. 如果不知道使用何种固定相,可以从非极性柱或弱极性柱开始试用,如效果不好,再按极性渐强的顺序选用中等极性直至高极性柱逐一尝试,直到有较令人满意的分析结果即可确定适用的柱极性。2. 低流失(“ms”)色谱柱通常更为惰性,有更高的温度上限,适用于MS检测器。3. 使用能够提

高效气相色谱仪色谱柱的选择与制备

高效气相色谱仪色谱柱的选择与制备:一、固定相的选择:根据相似相溶的原则选择固定液。二、柱内径的选择:一般来说,柱内径不影响分离度和分析时间。目前,柱技术已发展到不同柱内径的柱子能够具有相同的性能,不同内径的柱子又各具特点。对相同的分离度和分析时间来说,内径小的柱子比内径大的柱子消耗地溶剂少。对相同的

液相色谱仪的流动相选择时应注意什么

液相色谱仪的流动相选择时应注意:1、尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期积累而损坏色谱柱和使检测器噪声增加。2、避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子,如使固定液溶解流失、酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。3、样品在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀沉积在柱中。4、流动相应满足检测器

液相色谱仪的流动相选择时应注意什么?

液相色谱仪的流动相选择时应注意:1、尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期积累而损坏色谱柱和使检测器噪声增加。2、避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子,如使固定液溶解流失、酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。3、样品在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀沉积在柱中。4、流动相应满足检测器

色谱流动相如何调整?

  色谱流动相如何调整?还在模棱两可的看过来  开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况,大部分原因就是流动相没调好,那到底该怎么调,怎么选择呢?看完下文可能你就知道答案了。  秘诀1:由强到弱  一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水

色谱柱的流动相

1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用