Antpedia LOGO WIKI资讯

如何选择蛋白印迹实验中的印迹膜

硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白和核酸杂交zui常用的印迹膜,是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的应用。目前市场上的NC膜产品数量众多,品质参差不齐。 从膜的质地上来看,zui重要的指标就是单位面积上能够结合的蛋白的量。硝酸纤维素膜的结合能力主要与膜的硝酸纤维素的纯度有关,市场上有些硝酸纤维素膜通常会还有大量的醋酸纤维素,因而降低了蛋白的结合量。如果采用的是纯度的硝酸纤维素,保证了zui大的蛋白结合量,可达80-150μg/cm2。Sartorius的NC膜是致密的硝酸纤维素滤膜,是用于Western、Northern和Southern杂交的优良滤膜。由于的纯度,因而也大大减少了非特异性的结合,降低杂交背景,保证zui大的蛋......阅读全文

如何选择蛋白印迹实验中的印迹膜?

硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白和核酸杂交最常用的印迹膜,是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的应用。目

如何选择蛋白印迹实验中的印迹膜

  硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白和核酸杂交zui常用的印迹膜,是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的

印迹膜的用途

中文名称印迹膜英文名称blotting membrane定  义在印迹时接受被转移样品的膜介质。如硝酸纤维素膜、尼龙膜等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

Southern 印迹实验——印迹法

Southern印迹法是将DNA片段从电泳凝胶中转移至膜支持物上,使DNA片段固定,因此该膜半永久性地重现出凝胶电泳的带型。实验方法原理本方案是专门为将琼脂糖凝胶印迹至不带电荷或带正电荷的尼龙膜上而设计的,稍作修改后同样可用于硝酸纤维素膜方法。实验材料DNA试剂、试剂盒HClNaClTrisNaOH

免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项

  免疫印迹western实验中内参基因的选择和注意事项   Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。   虽然,顺利的时候Western blot做

免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项

Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然,顺利的时候Western blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、

DNA印迹法实验膜处理的介绍

  1)剪下一张与凝胶面积相同的硝酸纤维素膜(NCP)或尼龙膜,NL,。注意NCP也要剪去一角且不可用手触摸,粘有油腻的膜不能被湿润,也不能结合DNA。同时剪8,10张与NCP等大的干净滤纸  2)将NCP与3,4张滤纸依次漂浮于盛有双蒸馏水的带盖方盘中,使水自然从NCP的下面向上浸润,待其完全浸湿

方案14 电印迹膜上的蛋白质消化实验

实验材料含有电泳分离的目标蛋白质的凝胶试剂、试剂盒乙酸胺黑(Amido Black)10B染料(0.1%)的水溶液 乙酸 甲醇消化缓冲液NaOH丽春红S染料PVP-40仪器、耗材电印记装置小离心管硝酸纤维膜或 PVDF 膜RP-HPLC 层析柱实验步骤一、电印迹和染蛋白1.将蛋白质电印迹到硝酸纤维膜

如何选择蛋白印迹成像与定量分析技术

  ——western blot技术在蛋白定量分析中的选择应用   蛋白质印迹(western blot),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot 是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹(western blo

蛋白质印迹实验

试剂、试剂盒 甘氨酸TrisSDS甲醇实验步骤 1. 溶液配置(1) 连续缓冲系统甘氨酸 39 mmol/L;Tris 48 mmol/L;SDS 0.0375% ( W/V);甲醇 20% (V/V)。溶液均需用双蒸水配置。这个缓冲系统可用作阳极缓冲液,也可用作阴极缓冲液。(2) 不连续缓冲系统阳