siRNA脂质体Onpattro中阳离子磷脂PEG2000CDMG的作用
Onpattro,这是首款已上市的siRNA脂质体，之前AVT小编在介绍DLin-MC3-DMA时提到过siRNA脂质体Onpattro的处方，其中除DLin-MC3-DMA外还有一个新面孔PEG2000-C-DMG。那么它又是什么，阳离子磷脂PEG2000-C-DMG在siRNA脂质体Onpattro中发挥怎样的功效？与我们熟悉的DSPE-PEG2000有什么联系和区别吗? PEG2000-C-DMG在处方中的作用一是防止粒子间聚集，二是利用PEG2000的“隐形”作用实现长循环及被动靶向。那为何不用DSPE-PEG2000而是要费劲研制一个新辅料呢？根据原研公司Alnylam的研究，处方所用PEG化脂质的类型和数量不仅决定了脂质体的粒径大小，更会强烈影响基因沉默能力，明显DSPE在这一点上相较于C-DMA是不具有任何优势的。PEG2000-C-DMG可降低脂质体与细胞间的相互作用及吸附ApoE的能力，同时，使用含有......阅读全文
磷脂酰肌醇的生理作用
DG通过两种途径终止其信使作用：一是被DG-激酶磷酸化成为磷脂酸，进入磷脂酰肌醇循环；二是被DG酯酶水解成单酯酰甘油。由于DG代谢周期很短，不可能长期维持PKC活性，而细胞增殖或分化行为的变化又要求PKC长期活性所产生的效应。现发现另一种DG生成途径，即由磷脂酶催化质膜上的磷脂酰胆碱断裂产生的DG，
磷脂酰甘油的作用和来源分布
广泛分布于生物界，在微生物中，有时也是磷脂的主要成分。与心磷脂，磷脂酰肌醇一样，是一种酸性磷脂。在生长中的大肠杆菌中，它的代谢速率较其它磷脂为高。它是由CDP甘油酯与磷酸甘油生物合成为磷酸磷脂酰甘油，再通过脱磷酸而形成为磷脂酰甘油。天然的磷脂酰甘油是二酰基-L－3-磷酸甘油-D－3-甘油。通过磷脂酶
RNA疗法的现状与未来
使用反义寡聚核苷酸（antisense oligonucleotide）作为疗法的概念早在1978年就被提出，对RNA干扰（RNA interference， RNAi）的研究也在2006年获得了诺贝尔奖的认可。但是，RNA疗法的研发却并不是一帆风顺。直到最近两年，Ionis Pharmaceu
细胞生物学名词解释（五）
9. 带3蛋白(band 3 protein)与血型糖蛋白一样都是红细胞的膜蛋白,因其在PAGE电泳分部时位于第三条带而得名。带3蛋白在红细胞膜中含量很高，约为红细胞膜蛋白的25%。由于带3 蛋白具有阴离子转运功能，所以带3蛋白又被称为“阴离子通道”。带3蛋白是由两个相同的亚基组成的二聚体,
简述脂质体的组成和功能
脂质体(Liposomes)是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心)，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同，对皮肤有优良的保湿作用，尤其是包敷了保湿物质如透明质酸、聚葡糖苷等的脂质体是更优秀的保湿性物质。[1]脂质体的组成与结构脂质体的组成：类脂质（磷脂）及附加剂。1、磷脂类：包括天然磷脂和合成
朗缪尔张力仪
朗缪尔张力仪芬兰Kibron公司生产的单通道DeltaPi和四通道DeltaPi-4朗缪尔张力仪用于测量药物、肽和蛋白质在脂膜上的结合。 生物膜和脂类正在进入生物科学、生物技术和新药发现的前沿。在这些研究中，脂单层已经为肺表面活性剂、抗菌肽、脂质信号转导、凝血和细胞粘附的分子作用机理阐明取得突
siRNA的设计方法
关于设计siRNA以及siRNA设计对siRNA功能的影响，至今还没有可靠的规律。虽然我们可以通过对mRNA实验分析准确的找到一段基因的全部siRNA最佳作用位置，但这个过程十分耗时且昂贵，不推荐常规实验使用。一种做法是每个目标序列设计3-4对siRNAs，实验选择较有效的siRNA。方法一、根据T
siRNA的制备方法
化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高，定制周期长，特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高，为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了，比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于：已经找到最有效的siRNA的情况
siRNA的制备方法
化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高，定制周期长，特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高，为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了，比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于：已经找到最有效的siRNA的情况
siRNA－的设计方法
关于设计siRNA以及siRNA设计对siRNA功能的影响，至今还没有可靠的规律。虽然我们可以通过对mRNA实验分析准确的找到一段基因的全部siRNA最佳作用位置，但这个过程十分耗时且昂贵，不推荐常规实验使用。一种做法是每个目标序列设计3－4对siRNAs，实验选择较有效的siRNA。 目前
siRNA的设计方法
关于设计siRNA以及siRNA设计对siRNA功能的影响，至今还没有可靠的规律。虽然我们可以通过对mRNA实验分析准确的找到一段基因的全部siRNA最佳作用位置，但这个过程十分耗时且昂贵，不推荐常规实验使用。一种做法是每个目标序列设计3-4对siRNAs，实验选择较有效的 siRNA。方法一、
概述慢病毒的基本应用
慢病毒也被广泛地应用于表达RNAi的研究中。由于有些类型细胞脂质体转染效果差，转移到细胞内的siRNA半衰期短，体外合成siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的，因而使其应用受到较大的限制。采用事先在体外构建能够表达siRNA的载体，然后转移到细胞内转录siRNA的策略，不但使脂质体有效转染的
长循环脂质体的概述
脂质体是磷脂依靠疏水缔合作用在水中自发形成的一种分子有序组合体，为多层囊泡结构，每层均为类脂双分子膜， 层间和脂质体内核为水相，双分子膜间为油相，膜厚度约为95+。脂质体之所以引起人们的极大兴趣，因为其粒子大小处于纳米级的介观范围，有许多独特的物理、化学性质，而且它是由磷脂在水中自发形成，制备
红细胞膜磷脂检查作用
通过检测红细胞膜磷脂含量反映有无各类型红细胞增多症的情况。若有皮肤、粘膜呈绛红色，尤以两颊、口唇、眼结合膜、手掌等为主、脾肿大、高血压等症状的人群建议做此检测。
siRNA体外转染——GenMuteTM－siRNA体外转染的优化
GenMuteTM siRNA转染试剂（Cat#SL100568）是市场上最有力的siRNA传递工具之一。最佳的siRNA浓度范围是1.0nM到10nM，过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”。我们实验室已经使用GenMuteTM转染试剂成功敲除了内源表达的生长因子。以24孔板为例，如下步
脂质体的特点及组成结构
特点 1、靶向性和淋巴定向性：肝、脾网状内皮系统的被动靶向性。用于肝寄生虫病、利什曼病等单核-巨噬细胞系统疾病的防治。如肝利什曼原虫药锑酸葡胺脂质体，其肝中浓度比普通制剂提高了200～700倍。 2、缓释作用：缓慢释放，延缓肾排泄和代谢，从而延长作用时间。 3、降低药物毒性：如两性霉素B脂
细胞转染脂质体的选择
脂质体靶向制剂及质量控制评价一、靶向制剂的定义与分类 靶向制剂亦称靶向给药系统(targeting drug delivery system，TDDS)。系指载体将药物通过局部给药或全身血液循环而选择性地浓集定位于靶组织、靶器官、靶细胞或细胞内结构的给药系统。 靶向制剂特点：定位浓集、控制释药、
上海药物所在双阳离子型核壳脂质体纳米粒研究中获进展
眼部疾病的常用治疗方式是局部给以药物溶液（例如滴眼液），这些传统剂型占据市售制剂的90%左右。然而，眼部的生理屏障以及候选药物的低溶解性为眼部给药系统的发展带来许多难题。 最近，各种旨在提高难溶性药物生物利用度的眼部给药方式大量出现。中科院上海药物所甘勇课题组专题综述了这些眼
脂质体的组成与结构讲解
avestin品牌均质设备可用于细胞破碎、脂质体药物、乳剂的研制、悬浊液精细分散、饮料、食品等领域。 脂质体是一种人工膜，在水中磷脂分子亲水头部插入水中，疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体，直径25-1000nm不等。脂质体可用于转基因，或制备的药物，利用脂质体可以和细胞膜融合
叔丁醇在冻干制剂中的应用研究（二）
■制备多种分散体系制备脂质体 以叔丁醇作为溶剂溶解磷脂，经冻干后得到结构疏松的磷脂固体，加入水可以迅速水化制成脂质体。这种方法类似薄膜分散法，可以制得粒径较大的微米级多室脂质体，这种脂质体制备工艺已经应用于试验和规模生产。最近，沈阳药科大学的科研人员发明了一种新的脂质体制备工艺，即将相变温度低的大豆
SiRNA用户指南
Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequenceUsing Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et al. 1999), we have systematically analyzed t
siRNA表达框架
siRNA表达框架(siRNA expression cassettes，SECs)是一种由PCR得到的siRNA表达模版，能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。这个方法最早是由Castanotto和其同事采用，包括一个RNA polⅢ启动子，一段发夹结构siRNA，一个RNA pol I
siRNA表达载体
多数的siRNA表达载体依赖RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段45—50nt的发夹结构RNA（small hairpin RNA, shRNA）在哺乳动物细胞中的表达,shRNA在细胞内会自动被加工成为siRNA，从而引发基因沉默或者表达抑制。这一类启动子包括大家熟悉的人
siRNA－Design－Guidelines
Using siRNA for gene silencing is a rapidly evolving tool in molecular biology. There are several methods for preparing siRNA, such as chemical synthe
siRNA制备方法
体外制备1.化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高，定制周期长，特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高，为一个基因合成3―4对siRNAs 的成本就更高了，比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于：已经找到最有效的si
siRNA对照解析
A．普通阴性对照 1.siRNA实验应该有阴性对照；2.通用阴性对照为与目的基因的序列无同源性的普通阴性对照；3．Scrambled阴性对照和选中的siRNA序列有相同的组成，但是和mRNA没有明显的同源性；4．阴性对照需要确定和目的靶细胞中其它基因同源性很低。 B．荧光标记阴性对照 1. R
热敏脂质体的基本介绍
在研究的各种新型脂质体中，热敏脂质体（温度敏感脂质体）是一个很有发展前途的分支，它有效利用了脂质体和热疗的双重优势来提高治疗效果，降低毒副作用。 在正常的体温下，脂质体膜呈致密排列的胶晶态，亲水性药物很难透过脂质体膜而扩散出来。当脂质体随血液循环经过被加热的靶器官时，局部的高温使磷脂分子运动加强
SPOS技术激光粒度仪在脂质体检测方面的应用
摘要:磷脂脂质体是由磷脂制成的球形颗粒，用于制药和化妆品工业。脂质体的大小和表面电荷是两项重要特征需要检测和监控。动态光散射(DLS)是用于测量亚微米脂质体的大小最常见的分析技术，而单颗粒光学传感（SPOS）技术用来测量大于1um的脂质体，不仅可以检测脂质体的大小还可以进行颗粒计数。美国PSS粒度仪
脂质体的组成与结构
脂质体的组成与结构 脂质体的组成：类脂质（磷脂）及附加剂。 1、磷脂类：包括天然磷脂和合成磷脂二类。磷脂的结构特点为一个磷酸基和一个季铵盐基组成的亲水性基团，以及由两个较长的烃基组成的亲脂性基团。 天然磷脂以卵磷脂（磷脂酰胆碱，PC）为主，来源于蛋黄和大豆，显中性。 合成磷脂主要有DPP
脂质体的组成与结构
脂质体的组成与结构脂质体的组成：类脂质（磷脂）及附加剂。1、磷脂类：包括天然磷脂和合成磷脂二类。磷脂的结构特点为一个磷酸基和一个季铵盐基组成的亲水性基团，以及由两个较长的烃基组成的亲脂性基团。天然磷脂以卵磷脂（磷脂酰胆碱，PC）为主，来源于蛋黄和大豆，显中性。合成磷脂主要有DPPC（二棕榈酰磷脂酰胆