如何在PCR检测过程中降低检测结果假阴性概率？
什么是PCR技术？PCR技术又称为聚合酶链式反应。是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。在新冠病毒检测中，核酸检测被定义为临床诊断的金标准，RT-PCR技术被反复提到，它是一种将RNA反转录与PCR相结合的技术。首先在反转录酶的作用下，将提取到的RNA合成cDNA,再以cDNA为模板，在DNA聚合酶作用下不断扩增（变性-退火-延伸多个循环）合成目的片段并进行分析。 PCR用水PCR技术目前多搭配试剂盒使用，也有用户自行制备反应体系，无论哪个过程都需要使用水。无论是近年来季节性爆发的甲流乙流，还是目前全球都在经历的新冠病毒，在检测过程中都涉及一个痛点，那就是如何尽可能提高核酸检测的准确性，减少假阴性结果出现的可能性。我们首先分析一下假阴性结果出现的可能性，以新冠病毒核酸检测为例，假阴性的主要原因有：病人病程：不同病程，患者体内病......阅读全文
如何在PCR检测过程中降低检测结果假阴性概率？
什么是PCR技术？PCR技术又称为聚合酶链式反应。是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。在新冠病毒检测中，核酸检测被定义为临床诊断的金标准，RT-PCR技术被反复提到，它是一种将RNA反转录与PCR相结合的
PCR仪PCR检测结果出现假阴性是什么原因？
假阴性假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解决方法有：重新设计引物，增加酶量或调换酶，增加模板量，调整退火温度，增加循环次数，及时检测扩增产物，一般在 48h 以内进行。
血培养检测:－MRSA结果或可呈假阴性
近日，美国食品与药品管理局（FDA）与Cepheid公司联合发布1级召回公告，宣布召回该公司在2008年10月21日～2010年6月21日期间生产和配发的用于GeneXpert Dx系统的Xpert耐甲氧西林金黄色葡萄球菌/金黄色葡萄球菌（MRSA/SA）血培养检测试剂盒。 本次召回产品
新冠病毒核酸检测结果假阴性的再思考
近期专家及民众对2019-新型冠状病毒核酸阳性检出率低、咽拭子屡次阴性、核酸检测与临床诊断不吻合等问题提出各种观点或疑惑。回顾近三年我们对呼吸道感染患儿不同取材部位多种呼吸道病原体检出率的研究，供大家参考，希望对2019-新型冠状病毒核酸检测有所指导，对临床医生选择采样位置以及解读结果有所启示，对民
ELISA假阳性结果和细胞假阴性结果
假阳性结果和假阴性结果1、标本的采集与保存ELISA试剂盒当标本采集保存不当产生溶血时，红细胞中的血红蛋白释放到血清中，血红蛋白具有过氧化物酶的性质，其通过吸附或“PP效应"（蛋白质间相互吸附的现象）结合后，可催化A、B液显色而造成假阳性标本采集保存不当致细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，会产生
PCR假阴性的原因
假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解决方法有：重新设计引物，增加酶量或调换酶，增加模板量，调整退火温度，增加循环次数，及时检测扩增产物，一般在 48h 以内进行。
什么是PCR假阴性？
假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解决方法有：重新设计引物，增加酶量或调换酶，增加模板量，调整退火温度，增加循环次数，及时检测扩增产物，一般在 48h 以内进行。
PCR假阴性的原因
造成PCR假阴性的原因是复杂的，也是多样的。主要有： 1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题（如：温控不准等）给临床带来了诸如非特异性扩增（假阳性）、扩增效率下降(假阴性）等问题. 2.离心机问题。离心机的质量或使用不正确，造成离心标本模板没有分离出来造成假阴性，窃
早早孕检测：警惕－βhCG－核心片段可致假阴性结果
众所周知，通过检测尿液中的人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG）水平，可判断是否为早期妊娠。hCG 是受孕后胎盘细胞分泌的糖蛋白激素, 胚胎着床 7 天, 尿中就可测出, 随妊娠期增加分泌含量呈一定规律, 测定 hCG 在尿液标本中的浓度可视为判断妊娠
PCR假阴性的原因分析
PCR的假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了，同时由于造成假阳性的因素相对单一，因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话，那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性，仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常被人忽略，严
PCR假阴性的原因分析
PCR的假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了，同时由于造成假阳性的因素相对单一，因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话，那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性，仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常被人忽略，严
PCR假阴性的原因分析
PCR假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了，同时由于造成假阳性的因素相对单一，因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话，那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性，仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常被人忽略，严重
造成PCR假阴性的原因
PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常 被人忽略，严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目，有什么样的诊断价值。造成PCR假阴性的原因是复杂 的，也是多样的。主要有：1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题（如：温控不准等）给临床
PCR假阴性问题总结
PCR的假阳性问题深受重视，但PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格的实验室管理，合理的环境设置，以及加入UNG酶抗污染基本可以解决，而引物的非特异性问题基本属于厂家试剂质量问题。而PCR的假阴性却不同，它
造成PCR假阴性的原因
PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常 被人忽略，严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目，有什么样的诊断价值。造成PCR假阴性的原因是复杂 的，也是多样的。主要有：1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题（如：温控不准等）给临床
PCR反应出现假阴性结果无扩增条带原因分析
PCR 反应的关键环节有 ： ① 模板核酸的制备; ② 引物的质量与特异性; ③ 酶的质量; ④ PCR循环条件; 寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究 ， 可能出现的原因有以下几点： 1 ) 模板： ① 模板中含有杂蛋白质; ② 模板中含有Taq酶抑制剂; ③
核酸检测的“假阳性”与“假阴性”指的是什么
一、概念理解。当你真的没有的时候，别人却说你有——假阳性(false positive)当你真的有的时候，别人却说你没有——假阴性(false negative)下面表格列出了四种情况，另外两张判断正确的情况分别是：你真的有，别人也说你有——真阳性（true positive）你真的没有，别人也说你
一文了解PCR假阴性
造成PCR假阴性的原因是复杂的，也是多样的。主要有： 1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题（如：温控不准等）给临床带来了诸如非特异性扩增（假阳性）、扩增效率下降(假阴性）等问题. 2.离心机问题。离心机的质量或使用不正回确，造成离心标本模板没有分离出来造成假阴
关于PCR假阴性问题总结
PCR的假阳性问题深受重视，但我个人认为PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格的实验室管理，合理的环境设置，以及加入UNG酶抗污染基本可以解决，而引物的非特异性问题基本属于厂家试剂质量问题。而PCR的假阴性
PCR的假阳性和假阴性如何解释
假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔
PCR实验中假阳性和假阴性的防治
1，标本采集必须合格，否则不做。2，严格按照操作规程，避免人为实验误差。3，用于操作的各种仪器，加样器，必须通过审核验收，仪器选贵的，进口的！4，最主要的就是试剂，选择公认的，优质试剂
核酸检测的假阴性和假阳性是什么意思？
假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔
金标法检测HBsAg假阳性和假阴性的原因
金标法假阴性原因1、检测时间短,金标法最适判读时间为15~30分钟,若时间太短就会发生一些弱阳性HBsAg标本出现假阴性。2、灵敏度较低，金标法>1ng/ml,而ELISA法
PCR产物的的假阴性的问题
不出现扩增条带。 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及溴乙锭的使用， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时
高灵数字PCR检测法+检测试剂盒=避免新冠肺炎假阴性问题
中国计量科学研究院（以下简称“中国计量院”）前沿中心生命科学计量团队成功研发了针对新型冠状病毒的新型检测方法和对应试剂盒——高灵敏数字PCR检测法和检测试剂盒。该方法较现行通用的RT-PCR法灵敏度显著提升，已进行验证测试，并将同步有序开展推广应用。 该方法和试剂盒主要基于数字PCR系统完成相
如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果？
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假 ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域，是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中，ELISA操作的各方面均对结果产生影响，如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外，一些非主观因
如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果？
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域，是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中，ELISA操作的各方面均对结果产生影响，如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外，一些非主观因素也会对结果
使用血液进行基因检测如何减少假阴性
基因检测-入门攻略什么是基因检测？肿瘤基因检测是通过特定检测设备对被检测者细胞中的DNA分子信息作检测，分析它所含有的各种基因突变情况，从而能针对性地为每位患者“量身定制”一套最合适的治疗方案。它是肿瘤精准医疗的基础。选择什么样本最合适？做基因检测，是检测肿瘤细胞的突变，因此需要获取肿瘤细胞。临床上
核酸检测结果阴性正常还是阳性正常
一般阴性代表没有感染，正常。新型冠状病毒是一种新发现的病毒，核酸检测阴性指的就是在患者的呼吸道标本或者是血液标本中没有检测出来新型冠状病毒。一般情况下，间隔一天以上进行连续两次的核酸检测，如果都是阴性就说明患者没有感染新型冠状病毒。对于已经感染的患者，经过治疗后检测阴性，说明患者已经治愈了。新冠病毒
耶拿新冠病毒核酸检测假阴性/阳性问题探索及解决方案
在此次新型冠状病毒疫情中，作为最终确诊的关键性技术，核酸检测发挥了极其重要的作用。但是近期关于核酸检测准确性问题的讨论甚嚣尘上，如何提高检测的准确性，如何减少假阴性/假阳性成为困扰检测工作者的重要难题。 从目前已有的资料来看，很多方面得到了讨论，如：冠状病毒感染人体后，病变主要发生肺部，即下呼