冷冻电镜样本制备新技术在新冠病毒结构解析的应用1

前言近日,由新型冠状病毒引起的肺炎疾病在武汉和全国各地都形成了一定规模的爆发,已经引起了中国甚至全球的高度重视,那么这个冠状病毒究竟是什么?冠状病毒在系统分类上属冠状病毒科(Coronaviridae),是具外套膜(envelope) 的正链单股RNA病毒,直径约80~120nm。冠状病毒可以引起中东呼吸综合征、严重急性呼吸综合征以及目前正在爆发的新型肺炎。近日,国家病原微生物资源库发布了由中国疾控制中心病毒预防控制所成功分离的我国第一株病毒的电镜照片。 下图中(电子显微镜下的新型冠状病毒武汉株01),黑色箭头所示就是新型冠状病毒,可以看出,病毒的大小约为100纳米。 解析冠状病毒结构,助力疫苗和药物研发目前,我们已知新型冠状病毒是RNA病毒,它的蛋白结构序列还没有确定出来,在分离完毒株之后,则要用冷冻电镜来全面解析病毒的三维结构,从而为开发疫苗和相关的药物奠定基础。2019年,中国科学家利用冷冻电镜技术......阅读全文

冷冻蚀刻电镜技术的应用介绍

1.冷冻蚀刻表面标记免疫电镜技术(1)新鲜或固定的细胞进行直接法或间接法免疫标记。(2)PBS(pH7.5)冲洗3min×2,加入1mmol/l MgCl2蒸馏水洗洗3min×3,离心沉集细胞。(3)将细胞团置于小纸板上,入液氮冷却的Freon中,取出入冷冻蚀刻仪中进行断裂操作,再于-100℃蚀刻1

冷冻电镜解决膜蛋白的结构

冷冻电子显微镜技术已经发展成为一个成熟的方法,应用于各种复杂的生物分子体系的高分辨结构研究。按照目前的发展势头,解决生物分子结构组(structural proteome)的问题已经不是遥不可及的了。在解决单一静态结构的基础上,冷冻电镜也展示了其研究多构象体系的潜力。下面对冷冻电镜在结构生物学研究领

全球第一!赛默飞最大客户体验中心在沪揭幕!

  该中心坐落于上海中国芯科技园,是赛默飞全球最大、最先进的客户体验中心,标志着赛默飞深化携手客户及本地产学研生态合作伙伴提升科技技术,践行“扎根中国,服务中国”的发展战略。  上海市科委副主任、上海市外国专家局副局长傅国庆,中国(上海)自由贸易试验区临港新片区管委会专职副主任武伟,东南大学电子科学

高分辨率冷冻电镜首次解析超级复合物结构

  在国家重点研发计划“蛋白质机器与生命过程调控”重点专项的支持下,“光合作用重要蛋白质机器的结构、功能与调控”和“蛋白质机器的高分辨率冷冻电镜前沿技术及应用”项目联合攻关,取得突破进展,发现了植物的光适应与捕光调节新机制。图片源自网络   光合作用为世界上几乎所有的生命体提供赖以生存的物质和能量,

冷冻电镜重建法解析γ管蛋白环形复合物的结构

  近日,美国洛克菲勒大学等科研机构的科研人员在Cell上发表了题为“Asymmetric Molecular Architecture of the Human γ-Tubulin Ring Complex”的文章,解析了人类γ-管蛋白环复合物的不对称分子结构。  γ-微管蛋白环形复合物(γ-tu

冷冻电镜发展过程

冷冻电镜发展过程冷冻电子显微镜技术(cryo-electron microscopy)是在20世纪70年代提出的,早在20世纪70年代科学家们就利用冷冻电镜研究病毒分子的结构,首次提出了冷冻电镜技术的原理、方法以及流程的概念。到了20世纪90年代,随着冷冻传输装置、场发射电子枪以及CDD成像装置的出

BCEIA-2021——新冠疫情下诊疗技术发展高峰论坛

BCEIA 2021——新冠疫情下诊疗技术发展高峰论坛 业界人士翘首以盼的第十九届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA 2021)将于2021年9月27-29日在北京•中国国际展览中心(天竺新馆)举办。本届展会将继续秉承“分析科学 创造未来”的愿景,围绕“生命 生活 生态——面向绿色未来”的主

新冠病毒在体外到底能存活多久-?

  一项新的研究表明,这种病毒可以在物体表面存活3天。  随着美国冠状病毒疫情的持续加剧,在美国,清洁用品正在从货架上消失,人们担心他们接触到的每一个地铁轨道、熟食柜台和马桶座圈。  但是新冠状病毒究竟能在表面停留多久呢?简而言之,我们不知道。一项新的分析发现,这种病毒可以在空气中存活3小时,在铜上

2024年度北京市电子显微学年会:探讨最新微观成像技术

2024年7月20日,由北京理化分析测试技术学会电子显微学专业委员会主办的“2024年度北京市电子显微学研讨会暨第十三届全国实验室科学管理交流会”在辽宁丹东成功举办。此次会议旨在推动电子显微技术的发展,提升相关领域工作者的专业技能,并促进电镜分析技术在国内的应用与发展,分享透射电镜、扫描电镜等先进分

二氧化氯消毒剂在杀灭新冠病毒的应用

  国家卫健委高级别专家组成员、中国著名传染病学专家李兰娟院士表示:新型冠状病毒本身对外界抵抗力不强,含氯消毒液,温度56℃,75%的乙醇,Ether(,乙米,乙氧基乙烷),任何一项就能杀死新型冠状病毒NCP。   56℃温度物理杀灭法虽绿色健康,但温度较难把控,且超过了人体能够承受的体温42℃,

《科学》:饶子和团队又一新冠最新研究,和瑞德西韦有关

  在新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起疫情爆发的当下,抗病毒药瑞德西韦(remdesivir)在全世界备受关注,用于治疗COVID-19患者的临床结果牵动无数人的心。  瑞德西韦是一款尚未获批的抗病毒药,原本计划被用于治疗埃博拉病毒引起的疾病。而人们对瑞德西韦抗新冠病毒感染的潜力寄予厚望,与

冷冻电镜技术等解析多巴胺受体DRD1Gs信号复合物

   西安交通大学物理学院教授张磊团队与四川大学、山东大学、国家蛋白质中心(上海)、香港中文大学等单位合作,采用冷冻电镜技术在多巴胺受体调节机制方面取得重大进展。近日,该研究相关成果以《DRD1-Gs信号复合物的配体识别和变构调控》为题在线发表在《细胞》上。  作为一种能够给人带来愉悦感受的神经递质

PRIMO冷冻电镜在标准化细胞观察的应用(一)

(一) 总述:冷冻电镜( Cryo-EM)是观察细胞内分子构造的有力工具。然而,用冷冻电镜观察细胞样本是具有挑战性的,细胞经常粘附在金属网格框架上,影响最终的成像质量。用法国 Alveole 公司的 PRIMO“定制化细胞微环境制备系统”,其无掩模、非接触式的微图案( micropatterning

PRIMO冷冻电镜在标准化细胞观察的应用(二)

图 4. ( j-k 图):冷冻电镜图像:分别是(图 3, h 图)中 P1 和 P2 两个位置的断层扫描切片。根据十字弓形状的 RPE1 细胞的肌动蛋白图谱( actin map),在预期的位置发现了大致等同于肌动蛋白横向弧( actin transverse arcs)(与细胞边缘平行但有一定距

Nature综述丨冷冻电镜在药物发现中的应用前景

  6药物筛选中X-ray晶体学与Cryo-EM的比较  与Cryo-EM相比,X-ray晶体学在药物筛选方面的关键优势在于,能够快速提供高分辨率结构数据。一旦建立了合适的结晶系统,通过X-ray晶体学快速连续获得后续结构或筛选化合物所需的时间非常短:1小时内可以通过结晶自动工作站设置约2,000个

又1篇Science!施一公组发表冷冻电镜新成果

  这篇题为《完全组装的酿酒酵母剪接体激活前结构》(Structures of the Fully Assembled Saccharomyces cerevisiae Spliceosome Before Activation)的论文报道了酿酒酵母剪接体处于被激活前阶段的两个完全组装的关键构象——

新冠病毒检测方法

  新冠肺炎仍在持续,如何更快、更准确诊断,已成为社会各界关注的热点。  核酸检测、抗体检测、抗原检测……不同检测方式有何特点、效果如何?  为此,《中国科学报》采访了中国工程院院士、河南农业大学校长张改平。  他表示,不同的检测方法各有优缺点,不能单说某种技术优劣,而是要将其放在一定的条件下去评价

新冠病毒已突变

  新冠病毒是否已经发生突变?如何突变?这是目前学界研究的焦点之一。中国科研团队最新发现显示:新冠病毒已于近期产生了149个突变点,并演化出了两个亚型,分别是L亚型和S亚型。研究发现,在地域分布及人群中的比例,这两个亚型表现出了很大测差异。其中S型是相对更古老的版本,而L亚型更具侵略性传染力更强。对

新冠病毒近日播报

   8月22日0—24时,31个省(自治区、直辖市)和新疆生产建设兵团报告新增确诊病例12例,均为境外输入病例(河北5例,天津2例,广东2例,陕西2例,福建1例);无新增死亡病例;新增疑似病例2例,均为境外输入病例(均在福建)。  当日新增治愈出院病例44例,解除医学观察的密切接触者1478人,重

饶子和、杨海涛团队成功解析新冠病毒主蛋白酶三维结构

  由上海科技大学饶子和/杨海涛团队与合作者组成的“抗新冠病毒攻关联盟”,率先在国际上成功解析新型冠状病毒关键药物靶点——主蛋白酶(Mpro)的高分辨率三维空间结构,并综合利用3种不同的药物发现策略,找到针对新冠病毒的潜在药物。  北京时间4月9日下午5点,经《自然》杂志邀请投稿,上述团队在该期刊上

新型冠状病毒患者出现呼吸驱动过强的原因

新型冠状病毒患者出现呼吸驱动过强的原因是什么?答:要从一个基因讲起,它就是ACE2。因为从SARS,MERS到新冠病毒,每一个得病的人,都和它有关。新冠病毒彩色电镜图,来源于NIH官网ACE2是个什么玩意儿?ACE2,全名是【血管紧张素转换酶2】。虽然直到2000年才发现,但它却是个非常非常重要的细

清华大学揭示新冠病毒侵染细胞的结构基础

  《自然》杂志以“Accelerated Article Preview”方式在线发表了题为“新冠病毒刺突蛋白受体结合结构域与受体ACE2复合物的结构”(Structure of the SARS-CoV-2 spike receptor-binding domain bound to the A

清华再发Nature:这次揭示了新冠病毒什么结构?

  3月30日,《自然》期刊以“Accelerated Article Preview”方式在线发表了题为“新冠病毒刺突蛋白受体结合结构域与受体ACE2复合物的结构”(Structure of the SARS-CoV-2 spike receptor-binding domain bound to

人肺脏类器官培养在探究新冠病毒感染肺的机制的应用

 引言     众所周知,新冠病毒是会引起肺部损伤的。为助力您探究其感染机制,PeproTech在此为您提供一份全面的人肺脏类器官培养方案。 肺类器官由ESCs/iPSC分化而来,hESCs体外肺分化实际上是通过加入多种细胞因子和小分子化合物模拟体内肺发育各阶段的过程,hE

Science-Advances:-扫描新技术探讨新冠病毒蛋白生物物理约束

提高SARS-CoV-2刺突蛋白(spike, S)的表达水平对于COVID-19疫苗的研发至关重要。之前的研究主要集中在设计受体结合结构域(RBD)和S2亚基,而氨基末端结构域(NTD)由于对其生物物理约束的理解有限而长期被忽视。2022 年11月23日,伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校Nichola

《Nature》:冷冻电镜蛋白解析再获重大突破!

   ATP-柠檬酸裂解酶(ACLY)是一种中心代谢酶,催化ATP依赖性柠檬酸和辅酶A(CoA)转化为草酰乙酸和乙酰-CoA1-5。哥伦比亚大学的科学家们与Nimbus Therapeutics的研究人员合作,利用冷冻电镜技术揭开了这种代谢酶的神秘面纱,这种酶可能成为癌症治疗的下一个主要分子靶点,这

新冠疫苗在国内的应用情况介绍

2020年10月8日,中国同全球疫苗免疫联盟签署协议,正式加入“新冠肺炎疫苗实施计划”。这是中国秉持人类卫生健康共同体理念、履行自身承诺推动疫苗成为全球公共产品的一个重要举措 。10月,新冠疫苗暂不入医保,但新冠肺炎相关治疗用药都将纳入医保目录新增范围 。截至2020年10月20日,中国共计接种了约

科学家拓展冷冻电镜解析生物大分子结构的分辨极限

  冷冻电镜(cryo-EM)单颗粒分析技术已经成为结构生物学众多结构解析方法中异军突起的一支,在膜蛋白的结构解析中更是发挥着与日俱增的作用。目前的冷冻电镜单颗粒技术已经能较容易地将分子量大于300千道尔顿且生化性质稳定的蛋白质解析至近原子分辨率(约3 埃水平)。但由于小分子量蛋白质(一般为小于20

我国学者首次解析非视觉阻遏蛋白复合物冷冻电镜结构

  近日,中国科学院上海药物研究所徐华强课题组、余学奎课题组和中国科学院分子细胞科学卓越创新中心/生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)丛尧课题组合作在GPCR跨膜信号转导领域取得新进展——首次解析了非视觉阻遏蛋白(Arrestin2)与神经降压素受体(NTSR1)复合物冷冻电镜结构,

追随诺贝尔足迹——2017年北京市电子显微学年会在京召开

  2017年度北京市电子显微学年会在北京天文馆召开。  分析测试百科网讯2017年12月19日,2017年度北京市电子显微学年会在北京天文馆召开,本次会议年会由北京市电镜学会、北京理化分析测试技术学会主办,旨在推动北京及周边地区广大电子显微学的学术及技术水平,促进电子显微学工作者在材料科学,生命科