蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介

1、纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速凝胶。 经过浓缩的部分纯化的样品进行中级色谱(intermediate chromatography),目的是去除较难去除的杂质,此步最关心的是分辨率,常采用高分辨率的细颗粒凝胶。 最后为了得到符合要求的最终产品,去除残存的杂质以及目的蛋白的多聚物或者降解片断,进行精制色谱(polishing chromatography),常采用具有高分辨率的凝胶过滤凝胶进行凝胶过滤色谱。 2、纯化前的准备工作 (1)样品稳定性试验a、测定样品在pH 2-9的稳定性;b、测定样品在0-4......阅读全文

多肽是如何纯化的

“对多肽纯化常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是多肽类物质分析中常用的手段。”

水质纯化方法简介

无机和分析化学实验中,根据任务及要求的不同,对水的纯度要求也不同,纯水分为“纯水”和“超纯水”。我们一般在购买纯水机的过程中,常常会混淆这两个概念,造成用户选型困难,无故增加物资供应成本。要分清纯水的类别,必须要弄清纯水是怎样产生的-即纯水的制备过程。本篇文章将详细为您介绍了离子交换法、活性碳吸附法

水质纯化方法简介

水质纯化方法简介离子交换法    离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水,水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前,先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂,以两个钠离子交换一个钙离子或镁离

水质纯化方法简介

   离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水,水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前,先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂,以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软化水质。    

液相色谱柱注意事项和维护-液相色谱柱活化方法

  液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等

液相色谱泵常规维护方法

在高效液相色谱仪的日常保养中,柱塞后清洗,也是很重要的,尤其是流动相中含有缓冲盐,或者其他可凝固和可析出固体的情况下,柱塞后清洗尤为重要。以缓冲盐为例,经常时间使用的情况下,建议一周进行一次后柱塞后清洗:一般用纯水,或水中加10%的甲醇或者10%的乙腈。无论是国产还是进口的,只要是柱塞泵,都会有柱塞

液相色谱柱的保养方法

此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、    新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:首先,配好65%乙腈/水或者纯甲醇

保护液相色谱柱的方法

 保护柱可以简单的说是装在色谱柱前面的一支短的色谱柱。一般是1-2 cm长,装的填料和使用的色谱柱填料相匹配,而使用的筛板孔径不会比色谱柱中使用的筛板孔径大。保护柱有两种功能:  (1)可以阻挡可能堵塞色谱柱的颗粒;  (2)因为保护柱和色谱柱填料相匹配,任何可能和色谱柱填料产生不可逆作用而不出峰的

选择液相色谱柱的方法

 1)硅胶基质填料    1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其它具有极性官能团,如胺基和氰基的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其它极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份zui先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低

液相色谱柱的选择方法

一、液相色谱柱选择的简单思路 1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操纵本钱等等。 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。 二、液相色谱柱选择的条件 A填料基质

液相色谱柱的保养方法

一、    新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:首先,配好65%乙腈/水或者纯甲醇溶剂备用,所有进入HPLC仪器的溶剂必须经过0.2um或者0.45um过滤膜过滤并脱气;再按柱子的正确方向连接柱子进口端(连接时注意

液相色谱柱的保养方法

此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、    新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:首先,配好65%乙腈/水或者纯甲醇

液相色谱柱的保养方法

此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、    新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:首先,配好65%乙腈/水或者纯甲醇

液相色谱柱的保养方法

此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、    新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:首先,配好65%乙腈/水或者纯甲醇

液相色谱柱的安装方法

1、液相色谱柱的结构:a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ

液相色谱方法论证方案

HPLC标准方法的论证方案序号论证方案1应预备数据表明所需方法的性能2应有为其他操作者使用的书面分析步骤3以一个以上的系统或操作者,用包括期望组分和期望被测物浓度的样品系统地论证方法的性能,比较不同时间和不同实验室之间的实验数据4应得到色谱柱的期望寿命以及柱间重现性的数据5研究不正常的结果,以纠正潜

液相色谱柱的保养方法

一、    新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:首先,配好65%乙腈/水或者纯甲醇溶剂备用,所有进入HPLC仪器的溶剂必须经过0.2um或者0.45um过滤膜过滤并脱气;再按柱子的正确方向连接柱子进口端(连接时注意

液相色谱的制备拆分方法

制备规模的拆分方法通常是用于共价非对映异构体混合物的分离,在许多情况中,甚至通过快捷和简便的快速色谱技术(flash chromatography),用硅胶成功地拆分非对映异构体;而在这种情况下也只需将薄层层析(TLC)的展开系统稍做改动,就可以扩大到较大规模的柱层析拆分之中去。例如用棉酚(104)

液相色谱柱的安装方法

1、液相色谱柱的结构:a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ

液相色谱柱的选择方法

在选择色谱柱之前,先多了解自己的样品和杂质,他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。2.聚合物基质:应用pH值范围宽,

液相色谱柱的清洁方法

高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的一种分离分析技术,是现代分离和测定的重要手段。自问世以来,它以其分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高、沸点高但不能汽化热不稳定的生理活性物质等优点,在生物化学、医学和临床分析等领域得到了广泛的应用。高效液相色谱(HPLC)柱是一种消耗品,随着使

液相色谱柱的保养方法

此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、    新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间,因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理:首先,配好65%乙腈/水或者纯甲醇

InnovationTM高效强阳离子交换液相色谱柱为基因工程提升...

InnovationTM高效强阳离子交换液相色谱柱为基因工程提升效率基因工程是当前科技发展最为迅速的领域之一,随着基因组学和分子工程学的发展,特别是“人类基因组计划”的初步完成,标志着基因工程发展到一个新的历史阶段,更展示出基因产业的巨大潜力。然而在基因产业,尤其是基因药物产业中其成本的70%甚至更

液固吸附色谱仪流动相简介

液固吸附色谱仪中使用的流动相为有机溶剂,主要是非极性的烃类(如己烷和庚烷等),某些有机溶剂(如二氟甲烷、甲醇和三乙胺等)作为缓和剂加入以调节流动相的溶剂强度、极性和PH值。一、正相色谱:液固吸附色谱是正相色谱。流动相溶剂极性越大,洗脱能力越强,溶质保留越小。流动相溶剂极性越小,洗脱能力越弱,溶质保留

液固吸附色谱仪流动相简介

液固吸附色谱仪中使用的流动相为有机溶剂,主要是非极性的烃类(如己烷和庚烷等),某些有机溶剂(如二氟甲烷、甲醇和三乙胺等)作为缓和剂加入以调节流动相的溶剂强度、极性和PH值。一、正相色谱:液固吸附色谱是正相色谱。流动相溶剂极性越大,洗脱能力越强,溶质保留越小。流动相溶剂极性越小,洗脱能力越弱,溶质保留

简介实验室液相色谱的维护

  1.更换氘灯  当你的液相基线出现了毛刺,首先就应该检查氘灯是否能达到使用需求。虽然一般氘灯的使用寿命都有两三千个小时,单随着使用时间的增加,氘灯会老化,其强度会逐渐减低、基线噪音和漂移都会变大。  2.更换管路接头  实验室液相色谱除了会发生泵密封圈泄露,在连接处也是很容易松动,特别是经常需要

快速制备液相色谱的特色功能简介

  ● 灵活的无线控制方式,尤其适用于需要避光或置于操作箱内运行分离实验的场景  ● 账户安全登录,通过128/256位AES数据加密存储并传输,保障数据安全  ● 内设独立的气泵模块,实验结束后自动吹扫管路和色谱柱的残留溶剂,防止溶剂浪费和不安全因素  ● 全自动智能液位实时监测  ● 带LCD显

用高效液相色谱纯化小鼠腹水中单克隆抗体

实验概要本实验介绍了高效液相色谱(HPLC)纯化小鼠腹水中单克隆抗体的原理及操作步骤。实验原理从小鼠腹水中纯化mcab的方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤和亲合层析等。应用tsk deae-spw离子交换层析柱从小鼠腹水中纯化mcab不仅纯化速度快,回收率和得率高,而且保持良好的生物学活性。根据离子

高效液相色谱(HPLC)纯化小鼠腹水中单克隆抗体

从小鼠腹水中纯化mcab的方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤和亲合层析等。应用tsk deae-spw离子交换层析柱从小鼠腹水中纯化mcab不仅纯化速度快,回收率和得率高,而且保持良好的生物学活性。 一、原理 根据离子交换原理,将经硫酸铵粗提的含mcabγ球蛋白上样结合于层析柱上,通过增加洗脱液中的

清华大学采购5台快速纯化液相色谱系统

  分析测试百科网讯 近日,清华大学快速纯化液相色谱系统采购项目(项目编号:清设招第2019244号)进行公开招标,用于快速纯化多种生物分子,如蛋白质、多糖、肽类、寡核苷酸、核苷酸疫苗、病毒及天然小分子(TCM)等,适合分离纯化活性物质。详情如下:  项目预算:273.5万(人民币)  项目联系人: