石蜡切片的酶免疫组化注意事项

一. 石蜡切片在染色过程中出现脱片现象? 一般来说,如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话,如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。你可以试试一下的方法: 1.一般用APES:丙酮=1:50的处理液来处理片子,处理5min左右,然后水洗,烘干既可用于贴片。如果把水滴再处理好的片子上,水比较聚的话说明片子处理的好。 2.贴片子的时候,展片的时间要把握好,不要太长,否则不利于贴牢。 3.烤片子也很重要,切好的片子最好先不要马上收起来,而是水平至于烘片台上37度两个小时以上,一是水分彻底烘干。然后做染色前最好再在60度烘箱烘1个小时。 4.再补充一点 ,石蜡包埋时,酒精梯度脱水以及浸蜡等一点要充分,这对贴片也有影响。 如果这些导致掉片的因素都已经排除但是片子还是掉的厉害,那么也可能是以下原因造成的: 1、多聚赖氨酸玻片质量的问题。我原先......阅读全文

石蜡组织切片的保存方法和注意事项

许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下,而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。一些研究发现,切片在室温下保存3个月以上,免疫组化染色结果会出现减弱,甚至阴性。因此,有学者进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片,共110片,常温空气中放置1个月

石蜡切片制作基本技术

石蜡切片  石蜡切片(paraffin section) 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡

石蜡切片的制备指南(三)

E、细裂缝或微颤振夹持系统未安全锁定标本过硬或过大处理不足间隙角不足切片速度过快切片机磨损F、粗调颤振漂片技术不足固定和/或处理不足(支持不足)蜡块温度较高切片厚度过薄间隙角过大水浴温度过高G、褶皱处理不足(支持不足)蜡块温度较高切片速度过快刀刃较钝间隙角过大石蜡质量较低H、过度压缩漂片仪的底部和边

石蜡切片时的小技巧

一 、石蜡切片方法步骤:      在每次操作切片刀和标本,或更换标本前一定要锁定手轮,并用护刀罩将刀      刃遮住!锁定手轮, 应先夹紧标本再装切片刀!将预先休整好的石蜡块装在标本夹上, 在使用切片刀和一次性切片刀时,一定要十分小心,其刀刃锋利无比,误操作后会导致严重伤害!转动粗转轮,将标本退

石蜡切片的制备指南(五)

09了解切片机的设计特点及其使用方法回缩式切片机的设计理念在于标本上行冲程中回缩,让蜡块远离刀片。重要的是要知道您所使用的切片机是否具备此功能。回缩是切片机的设计特点之一,可在切片过程中提供独特的优势并可延长刀片寿命。当使用回缩式切片机时,蜡块下行冲程中必须将蜡块表面对齐刀口(即处于前出位置,而非退

石蜡切片的制备指南(二)

17彻底清洁和维护切片机使用后清除累积的组织和石蜡碎片将非常重要,定期预防性维护亦非常重要。每天对仪器进行清洁。在清洁之前,切记取下刀片。持刀架可以很容易地移除,从而方便清洁。最好采用干燥毛笔清除切片所产生的垃圾。切勿使用酒精或二甲苯清洗外表面,因为仪器不耐受这些溶剂,应避免暴露于二甲苯。推荐采用清

石蜡切片载玻片的处理

1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。这里选用ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:(1)APES:现用现配。将洗净的玻片

石蜡切片的基本信息

石蜡切片(paraffin section) 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的

石蜡切片的制备指南(一)

前言制备高质量的病理切片需要一定的技巧和经验—但我们都须从头开始学习。该教程的目的是协助初学者熟悉石蜡切片的制备,以及作为经验更丰富的技术专家的进修课程。涵盖轮转式切片机制备石蜡切片的设置和操作相关的基本内容。同时对切片过程中的部分常见故障进行具体说明,并提供故障排除建议。13学习厚薄一致、高质量、

植物组织石蜡切片的制作

一、实验目的 1.熟练掌握石蜡切片的方法。 2.掌握永久制片的制作过程,为研究植物的内部结构奠定基础。 3.学会植物内部结构的比较研究方法。 二、实验器具与 试剂1.器具 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻

石蜡切片的制备指南(四)

前言:制备高质量的病理切片需要一定的技巧和经验。该教程的目的是协助初学者熟悉石蜡切片的制备,以及作为经验更丰富的技术专家的进修课程。涵盖轮转式切片机制备石蜡切片的设置和操作相关的基本内容。同时对切片过程中的部分常见故障进行具体说明,并提供故障排除建议。06 设定最佳刀片间隙角刀片间隙角可调,必须进行

石蜡切片与冷冻切片的区别是什么

1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳

石蜡切片与冷冻切片的区别是什么

1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片,而那些稳定的

振动切片方法及与石蜡、冰冻切片的比较

振动切片用振动切片机,可以把新鲜组织(不固定不冰冻)切成厚片20~10μm,以漂浮法在反应板进行免疫组织化学染色,然后在解剖显微镜下检出免疫反应阳性部位,修整组织进行后固定,最后按电镜样品制备、脱水、包埋、超薄切片、染色观察等。组织不冰冻,无冰晶形成和组织抗原破坏,在免疫组化染色前避免了组织脱水、透

石蜡包埋切片有几个步骤

石蜡切片的制作过程主要包括:取材,固定,脱水,透明,透蜡,包埋,切片,贴片,染色,透明,封藏等步骤。

普通组织石蜡包埋切片步骤

  1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。  2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min

组织病理实验_石蜡切片法

实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。实验

石蜡切片有什么优缺点

教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。优点:1、组织细胞形态清晰2、切片可长期保存,供教学、科研及病理诊断及复察,并可利用蜡块作其他项目的回

病理制片技术——组织石蜡切片

组织经石蜡包埋后制成的蜡块,用切片机制成切片的过程为石蜡切片法。石蜡切片法现使用的切片机有平推式切片机、轮转式切片机两种。一、平推式切片机石蜡切片法1.切片前的准备:清洗过的载物片(或免清洗的),毛笔,铅笔,小竹片,水槽,雾化器,摊片器,切片刀,刀架。2.切片制作步骤:刀架的粗削部放在头端,在切片机

组织石蜡包埋和切片技术

包埋剂embedding agent   在制作切片或超薄切片时,由于组织是柔软的,或局部的软硬不均,这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部,整个组织一样硬化,以利于切成薄片,这种物质叫做包埋剂。一股用光学显微镜观察的切片,用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂;电子显微镜则

石蜡切片阴性染色产生的原因

⑴一抗和二抗浓度不合适或孵育条件不妥。⑵荧光素提前衰退。荧光素质量不佳或操作过程中没有注意避光等防止荧光素衰退的事项。⑶血清封闭时间过长。⑷抗体稀释液PH值不合适,影响抗原抗体反应。⑸组织切片不平、裂片或脱片很严重,易引起大块阴性着色。⑹组织标本不新鲜或已经冷冻组织制成的切片中抗原易弥散,易引起本来

石蜡切片术的制作过程

光学显微标本的制作技术【实验目的】了解光学显微镜切片制作技术的基本方法步骤。【实验原理】采用光学显微镜研究一般生物体的内部结构,在自然状态下是无法观察清楚的,多数动、植物材料都必须经过某种处理,将组织分离成单个细胞或薄片,光线才能通过细胞。为了适应这个需要,就产生了光学显微镜制片技术。光学显微镜的制

石蜡切片法在切片步骤后为什么二甲苯无法溶掉石蜡

你在粘片后,直接将玻片放入二甲苯里面了么,如果是这样的话,你看看玻片上面是否还存在多余的水分,如果有,我建议你在粘片后,先将之烘干,等水分完全干去,再将玻片投入二甲苯里,

组织免疫荧光是用石蜡切片还是冰冻切片

二者应该都是可以的,具体要看自身的实验条件哪个操作更方便以及抗体的性质。看你的实验要求,冰冻片要求较高(低温环境,液氮,冰冻切片机,OCT包埋剂等等),石蜡片的制作就比较简单,试剂也较便宜。另外看你购买的抗体适用于哪种片子免疫组化的话,一般大都使用石蜡切片。免疫荧光染色的话,都可以的,冰冻切片比较容

HE染色石蜡切片制作的基本过程

HE染色石蜡切片制作的基本过程:1、取材与固定从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林,Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。2、脱水透明一般用由低浓度到高浓度酒精作脱

做石蜡切片用的材料,该如何保存

FAA 里面有福尔马林,你放在4度或者室温放两个星期应该没关系

关于石蜡切片的抗原修复及方法介绍

  石蜡切片标本均用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。  常用的抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,

石蜡切片或细胞的原位杂交实验

细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。实验材料石蜡切片试剂、试剂盒HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤1.  准备脱蜡/再水化系统(可重复使用数次)及0.2 m

石蜡块做超薄切片的样品制作流程

石蜡块做超薄切片的样品制作流程如下: 1、取材:从石蜡块上相应部位切下约1mm3 的小块。 2、溶蜡:将取下的标本放在一张滤纸上,40℃烘箱内烘1小时,然后转放入二甲苯溶液中40℃烘箱内继续浸泡8—12h。 3、水化:纯丙酮30分钟、90%、80%、70%丙酮各15分钟。 4、漂洗:用缓冲液漂洗(0

石蜡切片或细胞的原位杂交实验

            实验材料 石蜡切片 试剂、试剂盒 HCl 二甲苯 乙醇 SSC