丙酮酸激酶测定的原理

原理:在二磷酸腺苷(ADP)存在的条件下丙酮酸激酶(PK)催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)转化成丙酮酸,在辅酶Ⅰ还原型(NADH)存在情况下,丙酮酸被LDH转化为乳酸,若标记荧光于NADH上,此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD。......阅读全文

PKA(蛋白激酶A)的活性如何测定

目的研究蛋白激酶C(protein KinaseC,PKC)和蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)在甲状腺癌发生过程中的作用.方法利用酶的放射分析方法测定手术切除经病理证实的18例甲状腺癌患者和17例甲状腺癌患者手术切除的肿瘤组织中PKC和PKA活性水平.结果甲状腺癌组织中胞膜和胞浆

链激酶试验的基本原理

  链激酶试验:鉴定A群溶血性链球菌的一个重要试验。  原理:A群链球菌群能产生链激酶,该酶能使血液中的纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶,而后溶解纤维蛋白,使血凝块溶解,为阳性反应。  步骤:吸取草酸钾血浆0.2mL,加0.8mL灭菌生理盐水,混匀,再加入链球菌18-24h36℃肉浸液肉汤培养物0.5mL

丙酮酸的作用

在代谢中的作用丙酮酸是一种酸性较弱的有机酸,分子中同时具有羰基和羧基两个官能团,它除具有羧酸和酮的性质外,还具有α-酮酸的性质,是最简单的α-酮酸(属于羰基酸)。丙酮酸是体内产生的三碳酮酸,它是糖酵解途径的最终产物,在细胞浆中还原成乳酸供能,或进入线粒体内氧化生成乙酰CoA,进入三羧酸循环,被氧化成

丙酮酸铁氧还原蛋白还原酶的测定实验

实验方法原理丙酮酸合酶,丙酮酸:铁氧还原蛋白 2-氧化还原酶(乙酰-CoA 化)丙酮酸 + CoA + 氧化型细胞色素 c ⇌ 乙酰-CoA + CO2 + 还原型细胞色素 c实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl细胞色素 c丙酮酸CoA仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」

丙酮酸铁氧还原蛋白还原酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 丙酮酸合酶,丙酮酸:铁氧还原蛋白 2-氧化还原酶(乙酰-CoA 化)丙酮酸 + CoA + 氧化型细胞色素 c ⇌ 乙酰-CoA +

丙酮酸激酶缺乏症PK缺乏症所致溶血性贫血的诊断标准

  (1)红细胞PK缺乏症所致新生儿高胆红素血症:  ①生后早期(多为1周内)出现黄疸 成熟儿血清总胆红素超过205.2μmol/L(12mg%) 未成熟儿超过256.5μmol/L(15mg%) 主要为间接胆红素升高;  ②溶血的其他证据(如贫血、网织红增多 尿胆原增加等);  ③符合PK缺陷的实

血清肌酸激酶(CK)测定的临床意义

升高:心肌梗塞4-6小时开始升高,18-36小时可达正常值的确20-30倍,为最高峰,2-4天恢复正常。另外,病毒性心肌炎、皮肌炎、肌肉损伤、肌营养不良、心包炎、脑血管意外及心脏手术等都可以使CK增高。 

肌酸激酶测定的注意事项有哪些

  (1)AMI诊断时注意CK-MB与CK的时效性。AMI发病8h内查CK不高,不可轻易排除诊断,应继续动态观察;24小时CK测定意义最大,因为此时CK应达峰值,如小于上限,可除外AMI;发病48h内多次测定CK不高,且无典型的升高、下降过程,可怀疑AMI的诊断;但要除外两种情况:①CK基础值极低的

红细胞腺苷酸激酶的作用原理

  红细胞腺苷酸激酶是红细胞溶酶体中的一种转移酶,主要参与核酸及脂类代谢。测定ADK对于揭示人类的某些疾病具有重要意义。如丙酮酸激酶缺乏症,是发生频率仅次于G-6-PD缺乏症的一种红细胞酶病。现已证实PK缺乏症是由PK基因异常所致,主要是PK基因点突变,小部分患者表现为缺失或插入。ATP缺乏是PK缺

酶法测定钠的原理

  酶法测定钠的原理是利用钠依赖的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG(邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷);分解释放出有色产物邻硝基酚,在波长420nm处测吸光度变化。  酶法测钾的原理是利用对丙酮酸激酶的激活作用,后者催化磷酸烯醇式丙酮酸变为乳酸同时伴有还原型辅酶Ⅰ的消耗,在波长340nm处测NADH的

酶法测定血清离子的原理

酶法测定钠的原理是利用钠依赖的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG(邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷);分解释放出有色产物邻硝基酚,在波长420nm处测吸光度变化。 酶法测钾的原理是利用对丙酮酸激酶的激活作用,后者催化磷酸烯醇式丙酮酸变为乳酸同时伴有还原型辅酶Ⅰ的消耗,在波长340nm处测NADH的吸光

酶法测定血清离子的原理

酶法测定钠的原理是利用钠依赖的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG(邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷);分解释放出有色产物邻硝基酚,在波长420nm处测吸光度变化。酶法测钾的原理是利用对丙酮酸激酶的激活作用,后者催化磷酸烯醇式丙酮酸变为乳酸同时伴有还原型辅酶Ⅰ的消耗,在波长340nm处测NADH的吸光度下

丙酮酸的去路介绍

糖酵解过程的产物丙酮酸有多种分支去路1.生成乙酰辅酶A:丙酮酸在有氧气和线粒体存在时进入线粒体,经丙酮酸脱氢酶复合体(表5-1-2)催化氧化脱羧产生NADH、CO2和乙酰辅酶A,乙酰辅酶A进入三羧酸循环和氧化磷酸化彻底氧化为CO2和H2O,释放的能量在此过程中可产生大量ATP。这是糖的有氧氧化过程。

注射用尿激酶的效价测定方法

取本品5支,分别加适量巴比妥氯化钠缓冲液(pH7.8)溶解,并全量转移至同一100ml量瓶中,用上述缓冲液稀释至刻度,摇匀。精密量取适量,用上述缓冲液定量稀释制成适宜浓度的溶液(应在标准曲线浓度范围内)。照尿激酶项下的方法测定酶活力,即得

血液的化学检验项目红细胞腺苷酸激酶介绍

红细胞腺苷酸激酶介绍:  红细胞腺苷酸激酶是红细胞溶酶体中的一种转移酶,主要参与核酸及脂类代谢。测定ADK对于揭示人类的某些疾病具有重要意义。如丙酮酸激酶(pyruvatekinase,PK)缺乏症,是发生频率仅次于G-6-PD缺乏症的一种红细胞酶病。现已证实PK缺乏症是由PK基因异常所致,主要是P

临床化学检查方法介绍红细胞腺苷酸激酶

红细胞腺苷酸激酶介绍:  红细胞腺苷酸激酶是红细胞溶酶体中的一种转移酶,主要参与核酸及脂类代谢。测定ADK对于揭示人类的某些疾病具有重要意义。如丙酮酸激酶(pyruvatekinase,PK)缺乏症,是发生频率仅次于G-6-PD缺乏症的一种红细胞酶病。现已证实PK缺乏症是由PK基因异常所致,主要是P

结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒微量法

结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒微量法测定意义:GBSS(EC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀粉的合成。测定原理:GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP;进一步通过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激

丙酮酸盐利用试验

酵母浸出粉  5g 磷酸氢二钾  5g 氯化钠  5g 丙酮酸钠  10g 麝香草酚蓝  104mg 蒸馏水  1000ml 除指示剂外,上述试剂加热溶解,调整 pH7.1~7.4后,再加指示剂,用13mm×l00mm试管分装,高压121℃ 15min。 方法:接种被检菌株于上述培养基中,孵育35℃

关于吡哆醛的体内转化的介绍

  维生素B6以吡哆醛、吡哆醇和吡哆胺等三种同效维生素存在于食物中,它们都由哺乳动物的肝脏转化为其活化形式磷酸吡哆醛。维生素B6存在于许多食物中,但是,维生素B6的缺乏比人们所想像的要广泛得多。没有任何疾病与维生素B6的缺乏有关,但是,在那些喂养含维生素B6量不足的食物的婴儿中,曾经观察到惊厥的症状

可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒

测定意义:SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。测定原理:SSS 催化ADPG 与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为

关于血液丙酮酸的简介

  丙酮酸是糖代谢酵解过程中的产物,能氧化成二氧化碳和水。正常情况下,血内乳酸和丙酮酸维持一定比值(9左右)。当机体处于缺氧代谢情况下,丙酮酸则被还原成乳酸,使比值上升,缺氧越严重比值越高。血清丙酮酸测定可推测循环衰竭的严重程度。  血液丙酮酸的正常值:空腹休息状态下,静脉血丙酮酸浓度为0.03-0

烯醇丙酮酸的概念

中文名称烯醇丙酮酸英文名称enolpyruvic acid定  义丙酮酸的异构体,可自动转化成丙酮酸。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代谢(二级学科)

丙酮酸的基本信息

中文名称:丙酮酸。中文同义词:2-氧代丙酸;乙酰甲酸;丙酮酸;A-酮基丙酸;乙醯甲酸;丙酮酸PYRUVICACID;乙酰基甲酸;丙酮酸。英文名称:Pyruvicacid。

丙酮酸的合成方法

酒石酸脱水脱羧法此法工艺简单易行:将酒石酸与硫酸氢钾混合物在220℃下蒸馏,馏出物再经真空精馏即得丙酮酸。此法的特点是加入导热油之后,在一个均匀体系中进行反应,降低了反应温度,减少氧化程度,可操作性大幅度提高,适合继续反应生成丙酮酸系列产品。其缺点是丙酮酸产率较底,得1g丙酮酸需消耗5g硫酸氢钾。仅

3磷酸甘油酸激酶的测定

实验材料 酶样品试剂、试剂盒 三乙醇胺-NaOH3-磷酸甘油酸ATPNADHEDTA硫酸镁3-磷酸甘油酸激酶GAPDH仪器、耗材 分光光度计实验步骤 0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 25 ℃ 时于 340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。注意事项

在测定肌酸激酶的过程中注意事项

  (1)AMI诊断时注意CK-MB与CK的时效性。  AMI发病8h内查CK不高,不可轻易排除诊断,应继续动态观察;  24hCK测定意义最大,因为此时CK应达峰值,如小于参考值上限,可排除AMI。  发病48h内多次测定CK不高,且无典型的升高、下降过程,可怀疑AMI的诊断,但要除外两种情况: 

糖异生反应过程

糖异生反应过程: 糖异生反应过程基本上是糖酵解反应的逆过程。由于糖酵解过程中由己糖激酶、6-磷酸果糖激酶1及丙酮酸激酶催化的三个反应释放了大量的能量,构成难以逆行的能障, 因此这三个反应是不可逆的。这三个反应可以分别通过相应的、特殊的酶催化,使反应逆行(图6-19),完成糖异生反应过程。 (一)

糖异生反应过程

糖异生反应过程:糖异生反应过程基本上是糖酵解反应的逆过程。由于糖酵解过程中由己糖激酶、6-磷酸果糖激酶1及丙酮酸激酶催化的三个反应释放了大量的能量,构成难以逆行的能障, 因此这三个反应是不可逆的。这三个反应可以分别通过相应的、特殊的酶催化,使反应逆行(图6-19),完成糖异生反应过程。(一)丙酮酸转

促分裂原活化的蛋白激酶激酶激酶的基本信息

中文名称促分裂原活化的蛋白激酶激酶激酶英文名称mitogen-activated protein kinase kinase kinase;MAPKKK定  义受体外促分裂信号(包括生长因子、细胞因子、细胞应急)等的刺激而激活的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。包括Raf、MEKK1~4等。此酶被GTP结

促分裂原活化的蛋白激酶激酶激酶的基本信息

中文名称促分裂原活化的蛋白激酶激酶激酶英文名称mitogen-activated protein kinase kinase kinase;MAPKKK定  义受体外促分裂信号(包括生长因子、细胞因子、细胞应急)等的刺激而激活的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。包括Raf、MEKK1~4等。此酶被GTP结