酶法测定血清离子的原理
酶法测定钠的原理是利用钠依赖的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG(邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷);分解释放出有色产物邻硝基酚,在波长420nm处测吸光度变化。 酶法测钾的原理是利用对丙酮酸激酶的激活作用,后者催化磷酸烯醇式丙酮酸变为乳酸同时伴有还原型辅酶Ⅰ的消耗,在波长340nm处测NADH的吸光度下降。 酶法测氯的原理是利用氯使α-淀粉酶与钙离子结合变成有活性的形式,然后与α-和β-葡萄糖苷酶共同催化人工合成底物2-氯4-硝基苯酚-口-D麦牙庚糖苷(CNP-G7)使其水解产生2-氯4-硝基苯酚,此产物在波长405nm处有最大吸收医学|教育网搜集整理,血氯浓度与淀粉酶活性成正比,同时也与2-氯4-硝基苯酚的生成量成正比。酶法的优点是不需特殊仪器,缺点是价格较贵。......阅读全文
血糖测定实验——酶法
实验方法原理血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料葡萄糖试剂、试剂盒邻联甲苯胺
酶联免疫法的效果测定
酶标抗体标记效果测定:测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。
测定酶活性浓度测试——固定时间法
固定时间法(取样法、终点法、两点法)先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。
测定酶活性浓度测试——固定时间法
固定时间法(取样法、终点法、两点法) 先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。 用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。 该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变
测定酶活性浓度的固定时间法
先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。 用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。 该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。
脂肪酶的测定实验——荧光分析法
实验方法原理此实验同样适用于胰凝乳蛋白、胆碱酯酶和酰基转移酶。可以用作底物的并非只是联丁酰荧光素,乙酰胆碱酯酶荧光素亦可。联丁酰荧光素 → 荧光素(无荧光性) (有荧光性)实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl联丁酰荧光素仪器、耗材荧光光度计实验步骤0.1 mol/L Tris-HCl,pH 8
琥珀酸脱氢酶测定方法MTT法
MTT法MTT是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formazana),经异丙醇作用颗粒溶解显色。在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比,因此可根据光密度570nm处OD值推测出活细胞的数目。
单胺氧化酶活性测定_同位素法
实验材料大鼠试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液蒸馏水盐酸苯乙胺甲苯5-羟色胺双草酸盐β-乙基-苯乙胺盐酸盐苯-醋酸乙酯闪烁液仪器、耗材制冰机水浴锅试管试管架计数瓶离心机离心管移液枪漩涡振荡仪单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO,也有称为含黄素胺氧化酶的。EC
自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法酶免疫测定
①试剂条上标注有所需编码(1是食品测试样品)。试剂盒提供每一系列测试所需的阳性对照(C1),阴性对照(C2)和抗原标准液(S1)。试剂条需恢复至室温。②混合均匀每一阳性对照、阴性对照和抗原标准液。③各吸取0.5mL 阳性对照、阴性对照、抗原标准液和按(5)④步骤煮沸的M肉汤加入到试剂条的测试孔中。④
非酶重法与粗纤维测定仪法之间的比较分析
粗纤维含量的测定不论是在饲料还是在我们常规的饮食上均有一定的帮助,在饲料上通过使用粗纤维测定仪或者是其他方法对粗纤维含量的测定,为动物之定量好的套餐,能够提高动物的品质,比如奶牛,控制纤维含量能够提高乳脂含量,而对于我们的事物进行测定也有一定的帮助,人体每天摄入一定量的粗纤维能够帮助我们进行消化,同
单胺氧化酶活性测定_高效液相色谱法
实验材料大鼠试剂、试剂盒苯胺β-苯乙胺优降宁过氯酸苯甲醛磷酸钠缓冲液甲醇仪器、耗材HPLC紫外检测器制冰机水浴锅离心机离心管移液枪试管试管架比色皿酶标仪微量注射器单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO,也有称为含黄素胺氧化酶的。EC1.4.3.4。作
胆碱酯酶的测定实验_pH-稳定计法
实验材料胆碱酯酶试剂、试剂盒Tris-HCl氯化乙酰胆碱氯化镁NaOH仪器、耗材自动滴定器实验步骤空白对照:保持 pH 7.4,持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。样品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.4,并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢
多酚氧化酶活性的测定(氧电极法)
原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化生成醌。多酚氧化酶活性可以用氧电极测量反应耗氧的速度,或用比色法测量产物的形成,常用的底物如儿茶酚(邻苯二酚)和多巴(3,4-二羟苯丙氨酸)。 仪器药品 测氧仪
琥珀酸脱氢酶活力测定方法MTT法
MTT法MTT是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formazana),经异丙醇作用颗粒溶解显色。在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比,因此可根据光密度570nm处OD值推测出活细胞的数目。
NK细胞活性测定实验——乳酸脱氢酶释放法
实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)存在于细胞内,正常情况下,不能透过细胞膜。当细胞受到损伤时,由于细胞膜通透性改变,LDH可从细胞内释放至培养液中。释放出来的LDH再催化乳酸的过程中,使氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)变成还原型辅酶(NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑
超氧化物歧化酶同工酶活性测定_亚硝酸法
超氧化物歧化酶同工酶是指催化超氧化物自由基氧离子和氢离子反应形成过氧化氢和分子氧反应,但分子结构与超氧化物歧化酶不同的酶。超氧化物歧化酶同工酶活性测定方法有:化学发光免疫法、化学法、亚硝酸法,下面简单介绍化学发光免疫法测定其活性的原理、操作步骤以及注意事项实验材料血清试剂、试剂盒核黄素N-甲萘基二氨
血糖的测定(OTB法和葡萄糖氧化酶法)(1)
一、改良的邻甲苯胺硼酸法(O-TB法)要 求1.了解血糖微量测定的基本原量。2.掌握血糖正常水平及其测定的临床意义。3.复习血糖的来源、去路及其调节的有关理论知识。原 理葡萄糖为一含醛基的己糖,在酸性条件下加热,可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛,后者与邻甲苯胺缩合成一绿青色的化合物,其颜色的深浅与
血糖的测定(OTB法和葡萄糖氧化酶法)(2)
三、激素对血糖浓度的影响实验目的通过观察家兔在注射胰岛素和肾上腺素前后血糖浓度的变化,了解血糖微量测定的基本原理,掌握血糖正常水平及其测定的临床意义,以及复习血糖的来源、去路及其调节的有关理论知识。实验原理对两只家兔,分别在注射激素(胰岛素、肾上腺素)前后静脉取血,采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度,以
超氧化物歧化酶同工酶活性测定_化学发光法
实验材料血浆血清试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液乙二胺四乙酸钠黄嘌呤生理盐水乙醇三氯甲烷双蒸水氰化钾海蜇荧光素诱导剂超氧化物歧化酶仪器、耗材离心机离心管漩涡振荡仪冰箱电子天平药匙容量瓶发光仪超氧化物歧化酶同工酶是指催化超氧化物自由基氧离子和氢离子反应形成过氧化氢和分子氧反应,但分子结构与超氧化物歧化酶不同的
酶联免疫法和化学发光法在测定CA―125中对比分析
肿瘤死亡率仅次于心血管疾病,位居全球第二,已成为严重危害人类健康的疾病,每年都有许许多多的肿瘤患被确诊,其中不少患者由于就诊晚,已出现全身严重症状,或是转移到远处,治疗效果均不佳、预后差。随着检验医学的不断发展,对肿瘤的早起诊断已经成为患者的需求,CA125是1983年由Bast等从上皮性卵巢癌
超氧化物歧化酶活性测定——光化增强法
超氧化物歧化酶别名肝蛋白、奥谷蛋白,简称SOD。它是一种源于生命体的活性物质,能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。1969年McCord发现这种蛋白,并且发现了它们的生物活性,弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质,所以正式将其命名为超氧化物歧化
超氧化物歧化酶同工酶活性测定_化学发光免疫法
超氧化物歧化酶同工酶是指催化超氧化物自由基氧离子和氢离子反应形成过氧化氢和分子氧反应,但分子结构与超氧化物歧化酶不同的酶。超氧化物歧化酶同工酶活性测定方法有:化学发光免疫法、化学法、亚硝酸法,下面简单介绍化学发光免疫法测定其活性的原理、操作步骤以及注意事项。实验材料人血试剂、试剂盒PBS聚乙二醇Na
非标记抗体酶法PAP法
PAP复合物是离体制备的HRP抗HRP复合物,它的制备方法较多,现简介其中之一。(1)制备抗HRP血清:健康雄性家兔(2.Okg以上),可先于足趾皮下注射灭活的卡介苗(共lOmg),2周后重复1次,刺激机体免疫系统功能,1周后于背部脊柱两旁皮内多点注射1.Oral乳剂[福氏完全佐剂,含HRP3。3m
关于酶法多肽的传统法介绍
传统获得肽的方法有很多。传统法主要有:酸法、碱法、电法、人工嫁接法、基因表达法等。 ·酸法:用化学强酸催化蛋白质获得多肽的方法叫酸法,此法投资大、占地多、工艺复杂、污染大、分子量难以控制,产品有化学残留,难以形成功能,很难实现工业化生产,至今仍停留在实验室; ·碱法:用化学强碱催化蛋白质的方
什么是酶谱法
每一种酶都有自己的特征谱线值,利用酶的这一特性,可以对生物的各种酶进行检测。
中医降酶五法
不论急性肝、慢性肝炎或肝硬化,在肝细胞病变活动时,都可表现谷丙转氨酶(G.P.T.)的增高,所以谷丙转氨酶的下降是衡量肝功能恢复的重要指标。 中医对肝炎病理的认识:初期(急性肝炎)多是湿热蕴结;中期(慢性肝炎)多是肝脾失调,脾气虚弱,肝血(阴)不足;后期(肝硬化)多是气滞血瘀,气血水搏
明胶酶谱法操作
明胶酶谱法原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条
明胶酶谱法操作
明胶酶谱法 原理: Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲 系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝
酶联免疫法简介
酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,用血清来进行检测。 酶联免疫法是利用抗体与酶复合物结合显色的原理,并保持抗体免疫活性,其已成为分析化学领域中的前沿课题。
酶标仪酶标法介绍
酶联免疫吸附试验方法简称酶标法,是标记技术中的一种,是从荧光抗体技术,同位素免疫技术发展而来的一种敏感,特异,快速并且能自动化的现代技术。酶标法的基本原理是将抗原或抗体与酶用胶联剂结合为酶标抗原或抗体,此酶标抗原或抗体可与固相载体上或组织内相应抗原或抗体发生特异反应,并牢固地结合形成仍保持活性的免疫