常用血细胞化学染色原理和临床意义(一)
(1)过氧化物酶染色的原理和临床意义[原理] 粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶(peroxidase,POX)能将底物过氧化氢分解,产生新生态氧,它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化,显棕色四甲基苯醌二胺,再加入亚硝基铁氰化钠与联苯胺蓝结合,可形成稳定的蓝色颗粒,定位于细胞浆内酶所在的部位。[临床意义] 临床上主要用于急性白血病类型的鉴别:急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应;急性粒细胞白血病 原粒细胞POX染色呈局灶分布的阳性反应;急性早幼粒细胞白血病 颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。(2)过碘酸-雪夫染色的原理和临床意义[原理] 过碘酸-雪夫(Pexiodic acid-schiff,PAS)染色又称糖原染色。胞浆内存在的糖原或多糖类物质(如黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖酯等)中的乙二醇基(C......阅读全文
血细胞染色—吉姆萨染色法
吉姆萨(Giemsa)染色法吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为
关于血细胞分析仪的检测方法—激光散射和细胞化学染色技术介绍
在白细胞分类上,血细胞分析仪采用两个通道进行,一个为过氧化酶检测通道,另一个为嗜碱细胞检测通道。 过氧化酶反应(peroxidase,POX)是血涂片染色的一个常用细胞化学染色方法,用于鉴别原始细胞与成熟的粒细胞,鉴别粒细胞与非粒细胞。染色后的细胞内无蓝黑色颗粒出现为阴性反应,出现细小颗粒或稀
常用免疫组织化学染色方法-2
五)免疫组化双染色法。(ⅰ) (Ionmuno- Histochemistry double staimimg method) 1.切片脱蜡至水。2.0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。3.水洗。4.抗原修复。5.PBS洗3次,每次1分钟。6.加入非免疫性动物血清,孵育 10分钟。7.PBS洗3次
常用免疫组织化学染色方法-1
一)、ABC法: (注,下面各种方法,均为手工操作,如没特别说明,均在室温下进行)1.切片经二甲苯Ⅰ 5分钟。2.切片经二甲苯Ⅱ 5分钟。3. 无水酒精Ⅰ 30秒。4. 无水酒精Ⅱ 30秒。5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。6. 95%酒精Ⅱ 30秒。7. 90%酒精 30秒。8.80%酒精 30秒。9
血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)的介绍
(1)血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)的原理:中性粒细胞碱性磷酸酶在pH 9.6左右环境中,能水解磷酸萘酚钠底物释放出萘酚,后者与重氮染料偶联,可形成不溶性的有色沉淀(红色颗粒),定位于细胞酶活性所在处。 (2)血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP
血细胞化学染色法—-过氧化物酶染色(POX)的介绍
(1)过氧化物酶染色(POX)的原理:过氧化物酶能分解过氧化氢而释放出新生态氧,使无色联苯胺氧化成蓝紫色,后者与硝普钠结合形成蓝黑色的颗粒,沉淀于细胞质中。 (2)过氧化物酶染色(POX)的操作方法:将固定液滴加在新鲜骨髓或血涂片上,固定30秒,流水冲洗,晾干。将应用也滴加在血膜上,作用10~
革兰氏染色的原理及临床意义
①染色原理:1革兰阳性菌细胞壁结构比较致密,肽聚糖层厚,脂质含量少,乙醇不易透过;革兰阴性菌细胞壁结构比较疏松,肽聚糖层薄,含大量脂质,乙醇易渗入;2.革兰阳性菌等电点比革兰阴性菌低,在相同pH条件下,革兰阳性菌所带负电荷要多,故与带正电荷的结晶紫染料结合较牢靠,不易
铁染色时正常血细胞的染色反应
1)细胞外铁:观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。 2)细胞内铁:观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,根据
常用常用化学试剂的分类、存放和使用和使用
化学试剂又叫化学药品,简称试剂,它是工农业生产、文教卫生、科学研究以及国防建设等多方面进行化验分析的重要药剂。化学试剂是指具有一定纯度标准的各种单质和化合物(也可以是混合物)。要进行任何实验都离不了试剂,试剂不仅有各种状态,而且不同的试剂其性能差异很大。有的常温非常安定、有的通常十分活泼,有的受
化学发光常用的化学试剂及其原理
化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤,即化学激发和发光。因此,一个化学反应要成为发光反应,必须满足两个条件:第一:反应必须提供足够的能量( 170 ~ 300KJ / mol ) ,第二,这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态,并
化学发光常用的化学试剂及其原理
化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤,即化学激发和发光。因此,一个化学反应要成为发光反应,必须满足两个条件:第一:反应必须提供足够的能量( 170 ~ 300KJ / mol ),第二,这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态,并且有足
正常血细胞的染色反应
1)粒细胞系统:原始粒细胞为阴性反应;自早幼粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应,并随细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强;嗜酸性粒细胞的颗粒本身不着色,而颗粒之间的胞浆呈红色;嗜碱性粒细胞为阳性反应,阳性反应物质为大小不一的紫红色颗粒。2)红细胞系统:幼红细胞和红细胞均呈阴性反应。3)单核细胞系统:
正常血细胞的染色反应
1)粒细胞系统:原始粒细胞为阴性反应;自早幼粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应,并随细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强;嗜酸性粒细胞的颗粒本身不着色,而颗粒之间的胞浆呈红色;嗜碱性粒细胞为阳性反应,阳性反应物质为大小不一的紫红色颗粒。2)红细胞系统:幼红细胞和红细胞均呈阴性反应。3)单核细胞系统:
血细胞分析的常用设备
常用的设备为半自动或全自动生化检测仪。血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,随着近几年计算机技术的日新月异的发展,血细胞分析的技术也从三分类转向五分类,从二维空间进而转向三维空间,而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术,如散射光检测
血细胞分析的常用设备
常用的设备为半自动或全自动生化检测仪。血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,随着近几年计算机技术的日新月异的发展,血细胞分析的技术也从三分类转向五分类,从二维空间进而转向三维空间,而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术,如散射光检测
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:补体法原理和操...
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:补体法原理和操作指南一、原理与意义免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——补体法,是一种荧光抗体染色法。本法之荧光抗体不受免疫血清的动物种属的限制,因而一种荧光抗体可作更广泛的应用,敏感性亦较间接法高,效价低的免疫血清亦可应用,节省免疫血清,尤其是对检查形态小的如立克氏
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法原理和操...
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法原理和操作流程一、原理与意义免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——直接法,是一种荧光抗体染色法。该方法比较简单,适合做细菌、螺旋体、原虫、真菌及浓度较高的蛋白质抗原如肾、皮肤的检查和研究。此法每种荧光抗体只能检查一种相应的抗原,特异性高而敏感性较低。二、操作流程
尿液干化学分析原理及其临床意义(一)
尿液的干化学分析在各级医院甚至诊所的应用已经十分普遍,各品牌的尿分析仪及其配套试纸虽略有差异,项目代码也略有不同,但检测原理基本相同:一、葡萄糖(GLU)[反应原理]:采用酶法测试,用两种酶,分别是葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶。主要反应过程如下:现在几乎所有的试纸都是采用酶法,因为酶法具有特异性强、灵敏
铁染色正常血细胞的染色反应有哪些?
1)细胞外铁: 观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。 2)细胞内铁: 观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细
常用化学分析方法及原理
化学分析法分为: 1. 光学分析法:包括分光光度法,原子吸收法,发射光谱法,荧光光谱法等。 2. 电化学分析法:电位法,电导法,电解法,极谱法,库伦法等 3. 色谱分析法:气相色谱法,液相色谱法,薄层色谱法,纸上层析色谱法等 4. 质谱分析法:气质联用,液质联用,等离子体质谱,生物质谱。
革兰氏染色的步骤和原理
原理:革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。步骤:(一)涂片固定在干净的载玻片中央滴加一滴蒸馏水,用接种环进行无菌操作,
分离和提纯常用的化学方法
1、加热法 当混合物中混有热稳定性差的物质时,可直接加热,使热稳定性差的物质分解而分离出去。如,NaCl中混有NH4Cl,Na2CO3中混有NaHCO3等均可直接加热除去杂质。 2、沉淀法 在混合物中加入某种试剂,使其中一种以沉淀的形式分离出去的方法。使用该方法一定要注意不能引入新的杂质。
酯酶染色
酯酶是分解各种酯类的水解酶,根据机制的不同,分为非特异性酯酶和特异性酯酶,非特异性酯酶易水解像acetate和butyrate之类具有短链的酯类,特异性酯酶易水解像naphthol AS‐D cholroaceteta之类的具有长链的酯类。单核‐巨噬细胞类为非特异性酯酶反应染色,中性粒细胞类
正常的血细胞染色的反应
1)粒细胞系统:原始粒细胞为阴性反应;自早幼粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应,并随细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强;嗜酸性粒细胞的颗粒本身不着色,而颗粒之间的胞浆呈红色;嗜碱性粒细胞为阳性反应,阳性反应物质为大小不一的紫红色颗粒。2)红细胞系统:幼红细胞和红细胞均呈阴性反应。3)单核细胞系统:
正常血细胞αNAE染色的反应
1)单核细胞系统原始单核细胞为阴性反应或弱阳性反应;幼单核细胞和单核细胞为阳性反应,这种反应可被氟化钠抑制。2)粒细胞系统各期粒细胞为阴性反应,有时少数粒细胞可呈弱阳性反应,此反应不被氟化钠抑制。3)巨核细胞和血小板为阳性反应。4)其他血细胞:幼红细胞和淋巴细胞一般为阴性反应,有时少数细胞也可是弱阳
苏木素染色剂的染色特点和原理
苏木素和伊红在组织学上被经常使用,与碘液不同,这是一种永久染色剂。其他常用的含有苏木素的染色剂有磷钨酸苏木素染色剂,也就是磷钨酸与苏木素的混合物。苏木素染色剂经常为组织的研究使用。 明矾和三价铁盐常常被用作媒染剂,展示核和细胞质结构。这些媒染剂的原理都是形成媒染剂-染料-组织复合体,从而显示颜色。使
细菌染色标本检查常用的染色方法
细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脱色→复染)。 1.单染色法:用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、大小及简单的结构,但不能显示各种细菌染色性的差异。 2.复染色法:用两种或两种以上的染料染色的方法,称为复染色法或鉴别染
细菌染色标本检查常用的染色方法
细菌染色标本检查常用的染色方法是检验主管技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助: 细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脱色→复染)。 1.单染色法:用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、
常用染色方法有哪些?
根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
常用的涂片染色方法
(1)巴氏染色法:本法染色特点是细胞具有多色性颜色,色彩鲜艳多彩。涂片染色的透明性好,胞质颗粒分明,胞核结构清晰,如鳞状上皮过度角化细胞胞质呈橘黄色;角化细胞显粉红色;而角化前细胞显浅绿色或浅蓝色,适用于上皮细胞染色或观察阴道涂片中激素水平对上皮细胞的影响。此方法的缺点是染色程序比较复杂。(2)苏木