室温对抗丙型肝炎病毒抗体检测ELISA试验的影响
丙型肝炎病毒(HCV)能够导致输血后肝炎。目前尚无特效药物治疗,主要依靠献血员的筛选来预防感染。献血员HCV的诊断主要以抗-CV ELISA、试验方法较为普便。ELISA敏感性高,特异性强,但实验中条件不当亦可造成假阴性和假阳性结果。为了解实验室温度对抗-HCV ELISA检测结果的影响,我们进行了一些研究。血清为卫生部检测中心2NC/ml定值质控血清,批号969,不同温度条件下连续测定20次。仪器为美国MR-4100酶标仪和STATFAX-2600洗板机。抗-HCV ELISA试剂盒由厦门新创公司提供,批号970510,操作按说明书。结果,抗-HCV ELISA试验在不同实验室温度6℃,16℃,25℃,30℃,37℃下进行,由低至高组观察了在室温显色10分钟及在37℃显色10分钟,发现其S/co值与A值均升高,显正相关。加显色剂后37℃孵育与室温避光放置,两组结果经t检验,P<0.001,有显著性差异。尤其应该......阅读全文
酶联免疫吸附试验——抗体检测实验-(ELISA-试验)5
实验步骤一、附加材料(其他材料见基本方案)抗同种型包被抗体:重链特异抗体(抗 μ、α、γ、б、ε)、重链亚类特异抗体(抗 γ1、γ2a、γ2b、γ3、γ4)或轻链同种型特异抗体(抗 γ和 κ)(不可结合显色 剂中的抗体)标准同种型抗体(如已知同种型纯化抗体)显色剂:碱性磷酸酶标记抗全部免疫球蛋白重链
酶联免疫吸附试验——抗体检测实验-(ELISA-试验)3
双抗体夹心ELISA法检测特异性抗体实验方法原理在有少量酶标特异抗体但无法获得纯化抗原时,用该检测方法筛选特异性抗体最为有效(图1.1.4)。另外,这种方法也可利用那些结合同一抗原的不同单克隆抗体来绘制抗原表位图。实验步骤一、附加材料(其他材料见基本方案)包被抗体溶液(特异性针对待测种属免疫球蛋白的
酶联免疫吸附试验——抗体检测实验-(ELISA-试验)1
间接ELISA法检测特异性抗体实验实验方法原理该检测方法使用毫克级的纯化或半纯化抗原,能筛选抗血清和杂交瘤上清液中的特 异性抗体(图1.1. 1)。Img纯化抗原可用于80〜800个微量滴定板的筛选。实验步骤一、实验材料:显色剂:碱性磷酸酶标记的蛋白A (Sigma公司),碱性磷酸酶标记的蛋白G (
酶联免疫吸附试验——抗体检测实验-(ELISA-试验)2
直接竞争ELISA法检测可溶性抗原实验实验方法原理该检测方法是使用特异性抗体和毫克级纯化或半纯化抗原来定性或定量测定可溶性 抗原的最有效的方法(图1.1. 2)。用抗体替换特异性的酶标抗体,就可转为间接方法, 以种属特异性或同种型特异性酶结合物作为第三种试剂即可检测结合的特异性抗体 的量。试剂、试剂
酶联免疫吸附试验——抗体检测实验-(ELISA-试验)6
实验方法原理在测定单一细胞群体的抗原表达水平时,该检测过程(图1.1.5)与流式细胞分析 一样灵敏(单元4.1、单元4. 2)。但在检测混合细胞时,敏感性不及流式细胞分析。用生物素化的抗体替代酶标抗体,就可转化为间接方法,而后加入亲和素标记的碱性磷酸 酶再次孵育可增加敏感性。实验步骤一、附加材料(其
酶联免疫吸附试验——抗体检测实验-(ELISA-试验)7
实验方法原理本检测方法可用来筛选细胞表面抗原的特异性抗体(图 1.1.6)。注意:所有步骤必须在 4°C、含有 NaN3 的生理缓冲液中进行。实验步骤一、附加材料(其他材料见基本方案)未混合的细胞样品碱性磷酸酶标记抗体或 F(ab’)(从免疫动物中获得的抗免疫球蛋白抗体)阳性对照抗体(即与实验细胞反
丙肝病毒暴露后,何时检测丙型肝炎?
导语:一般来说,丙肝病毒(HCV)侵入人体后不会马上产生抗体,往往需要一段时间才能产生足够的可检测到的抗体。从病毒感染到能够从血中检测到抗-HCV的这段时间,称为丙肝病毒感染的“窗口期”。在这段“窗口期”时间内,尽管血清抗-HCV阴性,但实际上血液内已经存在丙肝病毒的复制,并具有传染性。
丙型肝炎抗体是什么
丙型肝炎抗体是指丙肝病毒感染之后机体产生的抗体,该抗体不是保护性抗体,所以如果查到丙肝抗体IgG阳性,只能代表既往感染或者现症感染,并不具有保护性。但是因为IgG受一些因素的影响,所以临床中也会碰到IgG阳性,但实际上患者并没有患乙肝的情况,称为假阳性。 所以如果临床中遇到丙肝抗体阳性的患者,
输血前及术前感染性疾病标志物的检测与意义
[摘 要] 目的:了解我院病人术前、输血前和产前由输血引起的经血传播的疾病如乙型肝炎、艾滋病、丙型肝炎、梅毒的情况。方法:对我院2004年度1月至12月需输血、手术或分娩的病人进行输血前、术前及产前检测共9项,即:甲型肝炎病毒抗体(抗HAVIgM)、乙型肝炎病毒标志物(HBsAg、HB
临床化学检查方法介绍抗丙型肝炎病毒IgA抗体介绍
抗丙型肝炎病毒IgA抗体介绍: 丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的病毒性肝炎,丙型肝炎病毒抗体是丙型肝炎病毒感染机体后出现的特异性抗体,不是中和抗体,它是丙型肝炎病毒感染的标记。感染丙型肝炎病毒后机体可出现抗-HCV-IgA抗体。抗丙型肝炎病毒IgA抗体正常值: 阴性。抗丙型肝炎病毒IgA
临床化学检查方法介绍抗丙型肝炎病毒IgA抗体介绍
抗丙型肝炎病毒IgA抗体介绍: 丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的病毒性肝炎,丙型肝炎病毒抗体是丙型肝炎病毒感染机体后出现的特异性抗体,不是中和抗体,它是丙型肝炎病毒感染的标记。感染丙型肝炎病毒后机体可出现抗-HCV-IgA抗体。抗丙型肝炎病毒IgA抗体正常值: 阴性。抗丙型肝炎病毒IgA
丙型肝炎抗体检测抽血后的注意事项
1、抽血后,需在针孔处进行局部按压3-5分钟,进行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血肿。 2、按压时间应充分。各人的凝血时间有差异,有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫,可能会因未完全止血,而使血液渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些,才能完全止血。如有出血倾向,
丙型肝炎抗体检测的抽血前注意事项
1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。 3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。
丙型肝炎抗体检测的临床意义是什么
抗-HCV-IgA是丙型肝炎诊断、预后和疗效观察的可靠指标。 急性丙型肝炎多为抗-HCIgM型,这种病人转成慢性化的可能很高。慢性丙型肝炎多为抗-HCIgG型。故抗-HCIgG的检测是判定急、慢性丙型肝炎的重要指标。恢复期患者抗HCV多为IgG型,且滴度较低。[1]
丙型肝炎抗体检测抽血后注意事项
1、抽血后,需在针孔处进行局部按压3-5分钟,进行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血肿。 2、按压时间应充分。各人的凝血时间有差异,有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫,可能会因未完全止血,而使血液渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些,才能完全止血。如有出血倾向,
丙型肝炎抗体检测有哪些注意事项
一、抽血前的注意事项 1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。 3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。 二、抽血后应注意 1、抽血后,需在针孔
病毒的血清学实验—ELISA检测乙脑病毒早期特异性IgM抗体
实验方法原理将抗μ链球蛋白(豚鼠抗兔IgM 抗体)非特异地吸附在固相上,加入待检乙脑病人血清,血清中的IgM 能和抗μ链球蛋白结合。当再加入定量特异性日本乙脑病(JBEV)抗原和酶标记的相应抗体(兔抗IBEV IgG)时,病人血清抗体再与IBEV 抗原和酶标抗IBEV IgG 结合作用于酶底物,酶底
丙型肝炎病毒的形态培养
HCV病毒体呈球形,直径小于80nm(在肝细胞中为36~40nm,在血液中为36-62nm ),为单股正链RNA病毒,在核衣壳外包绕含脂质的囊膜,囊膜上有刺突。HCV仅有Huh7, Huh7.5, Huh7.5.1三种体外细胞培养系统,黑猩猩可感染HCV,但症状较轻。
丙型肝炎病毒的防治原则
丙型肝炎的预防方法基本与乙型肝炎的相同。我国预防丙型肝炎的重点应放在对献血员的管理,加强消毒隔离制度,防止医源性传播。国外报告,对献血员进行抗HCV筛查,可排除85%具有HCV传染性的献血员,从而明显降低输血后丙型肝炎的发病率。由于献血员抗HCV阳性率与ALT水平和抗-HBc是否阳性有关,ALT
丙型肝炎病毒的基因结构
HCV-RNA约有9500-10000bp组成,5′和3′非编码区(NCR)分别有319-341 bp,和27-55 bp,含有几个顺向和反向重复序列,可能与基因复制有关。在5′非编码区下游紧接一可读框(ORF),其中基因组排列顺序为5'-C-E1-E2-p7-NS2-NS3-NS4-N
你用的配对抗体经过病毒培养物验证了吗?
新冠抗原检测试剂盒面对愈演愈烈的新冠肺炎疫情,美国总统特朗普于8月28日表示,美国政府计划购买雅培公司(Abbott Laboratories)1.5亿人次的新冠抗原检测试剂盒,试剂盒单价为5美元,采购总额达到7.5亿美元。在此之前,美国食品药品监督管理局(FDA)在8月26日晚间向雅培的便
ELISA法检测丝虫抗体
丝虫病(filariasis)在我国是由斑氏和马来丝虫寄生于人体淋巴系统所引起的慢性寄生虫病,通过蚊虫传播。早期临床特征主要为淋巴管炎和淋巴结炎,晚期为淋巴管阻塞形成象皮肿。常用的检查方法是用ELISA 法检测丝虫抗体。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将微丝蚴固定在玻片上制
ELISA材料和方法(检测猪流行性腹泻病毒抗体)
1 材料 (1) 聚苯乙烯塑料微量组织培养板:4×10孔,上海塑料三厂生产。 (2) 包被液(pH值96):NaHCO3 293g、Na2CO3 195g,蒸馏水加至1 000ml,置4℃保存。 (3) 洗涤液(001mol/L、pH值74):NaCl 80g、KH2PO402g、
如何诊断丙型肝炎病毒?
1、根据患者的症状 虽然丙肝患者的症状都很隐秘,还有部分患者根本都没有症状,但是,只要我们细心的观察,是可以发现丙肝的蛛丝马迹的。 2、根据检查化验结果 丙型肝炎病毒RNA为丙型肝炎早期诊断的最有效方法。在急性丙型肝炎时,血清丙型肝炎病毒RNA可以从阳性转为阴性,而多数慢性感染者,其RNA
发现两种对抗艾滋病毒抗体
为艾滋病疫苗的研制指明新方向 美国杜克大学医学中心研究人员发现了两种强力抗体——2F5和4E10阻断艾滋病病毒(HIV)感染的机制。该发现为研制新的、更有效的艾滋病疫苗指出了一个新方向。相关研究刊发在美国《国家科学院院刊》(PNAS)上。 美国杜克大学医学中心人类疫苗研究所的S·穆尼尔·
抗丙型肝炎病毒IgA抗体的临床意义及注意事项
临床意义 阳性:丙型肝炎诊断、预后和疗效观察的可靠指标。 注意事项 (1)、阳性对照A值-阴性对照A值>0.4为测试有效。 (2)、酶联板的保湿温度和时间必须严格控制,勿用水浴。
简述丙型肝炎病毒抗体免疫球蛋白G的临床意义
1、临床意义 抗-HCV-IgG、IgM抗体均为非保护性抗体,急性期多为IgM型,慢性期多为IgG型,其检测是诊断急、慢性丙型肝炎的重要指标。恢复期患者抗HCV多为IgG型,且滴度较低。抗HCV-IgM阳性可确诊HCV早期感染。 2、注意事项 本试验阳性仅为初筛阳性,对一些弱阳性受检样
关于丙型肝炎抗体的基本介绍
丙型肝炎抗体英文名称: HCV-Ab 丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC),对患者的健康和生命危害极大,已成为严重的社会和公共卫生问题。丙型肝炎抗体临床意义 (1)在输血后患肝炎有80-90%的病人是丙型肝炎,其中大部分为阳
丙型肝炎抗体的临床意义
(1)在输血后患肝炎有80-90%的病人是丙型肝炎,其中大部分为阳性。 (2)在乙型肝炎患者中,特别是经常使用血制品(血浆、全血)的病人可以引起丙肝病毒的合并感染,使疾病转为慢性化、肝硬化或者肝癌。所以对乙型肝炎的复发病人或是慢性肝炎病人要进行HCV-Ab的检测。
酶联免疫吸附试验——抗体检测实验-(ELISA-试
间接ELISA法检测特异性抗体实验 备选方案1: 直接竞争ELISA法检测可溶性抗原实验 备选方案 2: 抗体夹心 ELISA 法检测可溶性抗原 备选方案3:双抗体夹心ELISA法检测特异性抗体 备选方案4:夹心ELISA法检测同种型实验