ELISA一步法误判高浓度抗HIV为阴性1例

酶联免疫吸附试验(ELISA)以其简便、快速、灵敏、特异性好,且适用于大批标本检测之特点,而广泛地应用于诸多领域,也是目前采供血机构筛查献血者各类传染性指标的主要检测方法。ELISA抗-HIV就其操作步骤来分有两类:即“一步法”与“二步法”,前者相对于后者,少一个洗板和加酶标记物再孵育的步骤,因此操作更为简便,为广大用户所青睐,国内有不少厂家在生产这类抗-HIV试剂盒。笔者在献血者血液标本的日常初、复检中,使用了二类各1家试剂,发现1例标本明显的一阴一阳结果,后经稀释法、二类多家试剂、抗-HIV确认试验,证实为ELISA“一步法”引起的假阴性结果,报告如下。1 材料与方法1.1 标本来源 标本采自本血液中心无偿献血者,采全血200ml于ACD-B三联袋T-200ml(上海市血液中心生产,批号0301406-14)内,并分离新鲜血浆135ml。1.2 试剂 抗-HIV ELISA试剂盒(厦门新创公司,批号200304660......阅读全文

人类免疫缺陷病毒抗体检测的介绍

  HIV-1/2抗体检测包括筛查试验和补充试验。HIV-1/2抗体筛查方法包括ELISA、化学发光或免疫荧光试验、快速试验(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒、免疫层析等)、简单试验(明胶颗粒凝集试验)等。补充试验方法包括抗体确证试验(免疫印迹法,条带/线性免疫试验和快速试验)和核酸试验(定性

ELISA原理与分类

一、ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合

ELISA实验原理与类型

ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与

ELISA原理与分类

1. ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复

ELISA试验中设置阴性、阳性、空白对照的作用(2)

3.计算NCx、PCx有效性与统计控制应用 读者如果注意到NCx与PCx有效性计算规则,很有点像电视上的“去掉一个最小值、去掉一个最大值”的评分办法,就知道统计学上的异常值“粗略”取舍法,把3个对照值中的1个最小、或最大“异常值”剔除,再重新计算余下的2个对照值的平均值。这样,不但可以比较前、后试验

输血传播疾病标志物的筛查检验

  本文介绍了我国对献血员开展的输血传播疾病标志物的筛查检验项目,包括乙肝表面抗原、丙肝抗体、爱滋病病毒抗体、丙氨酸氨基转移酶、梅毒抗体。分析了影响检验结果的几种原因,包括实验操作、检验方法、检验试剂的质量、检测标志物的窗口期。提出了几条保证检验质量的措施,包括实验室的全面质量管理、实验室的室内质量

elisa-法检测HIV为什么总是出现假阳性

造成ELISA检测HIV假阳性的原因主要有3个:1.试剂影响因素,可能与试剂盒包被抗原组合不同有关。目前第3代双抗原夹心法试剂的质量优于第2代间接法试剂,具有更好的敏感性和特异性,尤其对感染早期的弱阳性标本,主要包被的抗原的种类及比例,纯度有关系。2.患者自身情况的影响, 患者体内特有的内源件物质可

ELISA试剂盒HIV抗体检测操作要点

ELISA试剂盒HIV抗体检测是发现HIV感染的有效途径,ELISA法是艾滋病初筛试验室检测HIV抗体普遍使用的方法之一。具体操作过程中ELISA法的影响因素较多,稍有不慎就会降低实验的准确性。避免诸多影响因素、保证结果准确性,才能够充分发挥ELISA法的优点,经过多次实验的总结和分析,这篇文章分享

ELISA检测抗HCV影响因素分析

    ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。    1 试剂影响因素

ELISA检测抗HCV影响因素分析

   ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。   1 试剂影响因

ELISA检测抗HCV影响因素分析

 ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。    1 试剂影响因素    目

Nat-Commun:人工蛋白可以激发产生抗HIV抗体

  HIV-1表面有大量的糖类对HIV-1表面的蛋白质Env进行了伪装,使得HIV-1可以避开人体的体液免疫。而大多数HIV-1隔离群会由自然的序列突变产生“糖洞”,这些糖洞可能将其下的蛋白表面暴露给免疫系统。为了验证这个猜想,近日来自北卡罗来纳大学教堂山分校、宾州州立大学等单位的研究人员通过计算机

JCI:新型DNA技术用于靶向输送抗HIV药物

  近日,Wistar研究所的科学家利用基于合成DNA的技术来促进小动物和大动物模型中产生HIV广谱性中和抗体,为简单有效的下一代HIV预防和治疗方法提供了概念验证。这些结果在线发表在《Journal of Clinical Investigation》杂志上。  尽管抗逆转录病毒疗法在治疗HIV感

谈谈HOOK效应

1、HOOK效应钩状效应即HOOK效应,是指由于抗原抗体比例不合适而导至假阴性的现象,其中抗体过量叫做前带效应;抗原过量叫做后带效应。2、产生的原因抗原抗体特异性反应时,生成结合物的量与反应物的浓度有关。无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体, 均可发现只有在两者分子

一项免疫检验技术酶免疫试验的局限性分析

酶免疫试验之所以能成为临床免疫检验中的主导技术,是与它的方法上的特异性和灵敏性、操作上的简便性以及试剂的稳定性分不开的,还有很重要的一点是,其对环境没有污染威胁。尽管如此,作为一项免疫检验技术,酶免疫试验还是有其局限性的,不但所检测的生物学体液样本如血清中有可能存在各种干扰实验的因素,而且在实验过程

酶免疫实验的优点和缺点

  酶免疫试验之所以能成为临床免疫检验中的主导技术,是与它的方法上的特异性和灵敏性、操作上的简便性以及试剂的稳定性分不开的,还有很重要的一点是,其对环境没有污染威胁。  尽管如此,作为一项免疫检验技术,酶免疫试验还是有其局限性的,不但所检测的生物学体液样本如血清中有可能存在各种干扰实验的因素,而且在

酶免疫试验的优点及局限性

酶免疫试验之所以能成为临床免疫检验中的主导技术,是与它的方法上的特异性和灵敏性、操作上的简便性以及试剂的稳定性分不开的,还有很重要的一点是,其对环境没有污染威胁。尽管如此,作为一项免疫检验技术,酶免疫试验还是有其局限性的,不但所检测的生物学体液样本如血清中有可能存在各种干扰实验的因素,而且在实验过程

酶联免疫吸附测定技术ELISA的优点及局限性

酶免疫试验之所以能成为临床免疫检验中的主导技术,是与它的方法上的特异性和灵敏性、操作上的简便性以及试剂的稳定性分不开的,还有很重要的一点是,其对环境没有污染威胁。 尽管如此,作为一项免疫检验技术,酶免疫试验还是有其局限性的,不但所检测的生物学体液样本如血清中有可能存在各种干扰实验的因素,而

艾滋病的实验室检测流程

中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心继发布《全国艾滋病检测技术规范(2009 年版)》后,近日即将发布 2015 年版《全国艾滋病检测技术规范》,此规范堪称艾滋病检测实验室的「红宝书」,适用于疾病控制中心艾滋病确认实验室和医疗机构的艾滋病初筛实验室的 HIV 检测技术操作。今天来一

手把手教程:实验室检测艾滋病这样做

中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心继发布《全国艾滋病检测技术规范(2009 年版)》后,近日即将发布 2015 年版《全国艾滋病检测技术规范》,此规范堪称艾滋病检测实验室的「红宝书」,适用于疾病控制中心艾滋病确认实验室和医疗机构的艾滋病初筛实验室的 HIV 检测技术操作。今天来一起了解一下

HIV核酸检测:定性与定量检测方法及程序的区别

随着生物技术的发展,核酸检测得到了人们越来越多的重视,它可直接检查HIV RNA,可在发现血清学变化之前检测HIV感染,而且比P24抗原检测方法更灵敏。简单的说就是病毒感染人体后,一般情况下可通过一系列检测被发现,而最早能被检测到的是病毒核酸。现有的酶联免疫等血清学检测方法检测的是抗原或抗体,而

看看这些可能「误判」的结晶

笔者爱好和乐趣之一就是看书以及翻阅图谱,一直以来对尿液结晶的关注,也让我发现了不少问题:教科书及各行业里的图谱或多或少都有一些错误。不管是教材还是图谱都是我们从业路上的老师,我们都怀着无比的信任。有错改之,无则加勉。此文不旨在纠错,而是希望能更加用心,如果此文的指正也有问题,欢迎大家拍砖。常见错误一

全自动酶标仪的软件功能介绍

 软件功能是指全自动酶标仪所具有的对ELISA定性和定量测定及其他测定方式如酶标动力学、紫外和凝集等数据的统计分析并报告结果的功能。软件功能是中酶标仪的一个非常重要的功能。   如果硬件方面区别不大,则软件就成为判定全自动酶标仪优劣的惟一指标。对于用户来说,好的软件功能,对实际工作会有较大的帮助。E

全自动酶标仪的软件功能你了解吗?

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全自动酶标仪的软件功能介绍

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孕产妇检测感染性病原体血清标志物的临床意义

作者:王爱香,刘晓峰【摘要】  目的 探讨孕产妇(产前)检测感染性病原体血清标志物的临床意义。方法 采用酶联免疫吸附(ELISA)法对5639例孕产妇检测乙肝表面抗原(HBsAg)、丙肝抗体(抗-HCV)、艾滋病病毒1/2抗体(抗-HIV1/2),用梅毒血清学(TRUST)法检测梅毒抗体。结果 56

揭秘!核酸检测是什么流程

  HIV核酸定性检测技术,其检测过程分为核酸提取、逆转录合成cDNA、PCR扩增反应、扩增产物定性分和结果判定和完成报告单。  核酸检测具体流程如下:  1. 核酸提取  使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应

一文揭秘核酸检测完整流程

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核酸检测是什么流程?

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