ELISA一步法误判高浓度抗HIV为阴性1例

酶联免疫吸附试验(ELISA)以其简便、快速、灵敏、特异性好,且适用于大批标本检测之特点,而广泛地应用于诸多领域,也是目前采供血机构筛查献血者各类传染性指标的主要检测方法。ELISA抗-HIV就其操作步骤来分有两类:即“一步法”与“二步法”,前者相对于后者,少一个洗板和加酶标记物再孵育的步骤,因此操作更为简便,为广大用户所青睐,国内有不少厂家在生产这类抗-HIV试剂盒。笔者在献血者血液标本的日常初、复检中,使用了二类各1家试剂,发现1例标本明显的一阴一阳结果,后经稀释法、二类多家试剂、抗-HIV确认试验,证实为ELISA“一步法”引起的假阴性结果,报告如下。1 材料与方法1.1 标本来源 标本采自本血液中心无偿献血者,采全血200ml于ACD-B三联袋T-200ml(上海市血液中心生产,批号0301406-14)内,并分离新鲜血浆135ml。1.2 试剂 抗-HIV ELISA试剂盒(厦门新创公司,批号200304660......阅读全文

ELISA如何选一抗与二抗

二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般

酶联法检测人类免疫缺陷病毒HIV

实验概要本实验用ELISA法检测了人类免疫缺陷病毒HIV。实验原理在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型加Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型加Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。主要试剂1.预包被微

酶联法检测人类免疫缺陷病毒HIV

实验概要本实验用ELISA法检测了人类免疫缺陷病毒HIV。实验原理在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型加Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型加Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。主要试剂1.预包被微

血液检验室内质控存在的若干问题及对策

      室内质量控制(IQC)是实验室人员采用一系列方法,连续评价本实验室工作的可靠程度。确定报告能否发出,是保证实验室工作质量的重要措施。目前采供血机构检测抗HCV、抗HIV、HBsAg均采用ELISA法,ELISA有其自身的特点,如灵敏度较高,同时影响因素也较多,这就更需加强质量控制。本

酶联法检测人类免疫缺陷病毒

[测定方法] ELISA法 [方法学原理] 在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型十Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型+Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。 [标本准备] 静脉抽血2ml,不

质控图在HIV抗体检测室内质控的应用

作者:沈才祥【摘要】 目的 质量控制图的应用是HIV检测实验室常规的室内控制方法。HIV抗体检测实验室常规采用“即刻法”质控图和(或)Levey-Jennings质控图。二种质控图有许多优点,但也存在一些缺点。有作者提出动态质控图法作为HIV抗体检测室内质量控制的补充。方法 本HIV抗体检测实验室通

抗PCNA抗体为阳性

抗PCNA抗体即抗增殖性细胞核抗原抗体。此抗体为系统性红斑狼疮标志性抗体,可作为SLE诊断的参考指标。

特异性靶向HIV感染细胞的新型抗HIV药物研究取得进展

  艾滋病病毒(HIV)存在潜藏机制,可以长期潜伏在细胞中而逃逸宿主免疫系统的攻击,目前已上市的抗HIV药物均不能选择性地杀伤感染细胞而根除病毒。新的研究思路对开发新型抗HIV药物显得非常重要,研究具有选择性地杀伤HIV感染细胞而保护正常细胞不受伤害的抗艾滋病药物是极有前景的方向。

确保ELISA自动化检验的质量需注意的几个要点

在20世纪90年代中期以前,我国血液ELISA检验主要靠手工操作。从20世纪90年代中期开始,逐步开始自动化。目前,不少采供血机构已实现血液ELISA检验的自动化。1 正确认识检验自动化与检验质量的关系人们通常认为,只要购置了自动化仪器,血液ELISA检验的质量自然就会得到保证。而实际上,拥有自动化

《自然》:人体天生抗HIV能力机制得以阐明

APOBEC-3G酶能从一开始就阻止HIV的复制 人类具有内置的抗HIV的武器——名为APOBEC-3G的酶,但迄今无人知道该如何开启它的潜能。美国科学家近日研究揭示了这种酶的原子结构,为药物开发指明了新方向。相关论文10月12日在线发表于《自然》(Nature)杂志上。 APOBEC-3G存在

酶联免疫吸附测定方法介绍

双抗体夹心法双抗体夹心法双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。三、加酶标抗体:使固

ELISA的试剂2

3.1.3  包被用抗原   用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中提取等(例

ELISA检测p24抗原用于诊断HIV感染的研究现状

作者:熊祝嘉 作者单位:(北京市朝阳区煤炭总医院,北京 100028) [关键词] ELISA;p24;HIV  1  HIV感染实验诊断的研究概况  HIV主要通过性接触、血液和母婴传播。近年来,欠发达国家的感染人数超过发达国家。预计到2010年我国感染HIV的人数将超过1 000万。目前测定血清

美CDC呼吁为国民提供更多HIV检测

HIV病毒微粒  近日,美国疾病控制和预防中心(CDC)发布了一份《发病率和死亡率每周报告》。该报告称,在美国,有超过一半的感染艾滋病病毒(HIV)的年轻人从未接受过病毒检测。  CDC早期的研究发现,该国82%的HIV感染者知道他们感染了这种病毒。但是,报告还指出,年龄在13~24

血液检验室内质控存在的若干问题及其对策

   室内质量控制(IQC)是由实验室人员采用一系列方法,连续的评价本实验室工作的可靠程度,确定报告能否发出,是保证实验室工作质量的重要措施。目前血站系统检测抗HCV、抗-HIV HBsAg均采用ELISA法。ELISA有其自身的特点如灵敏度较高,同时影响因素也较多,这就更需加强质量控制。本文就实验

酶联免疫法的检测方法

  双抗体夹心法  双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:  一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。  二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。  三、加酶标抗

酶联免疫法的检测方法

  双抗体夹心法  双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:  一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。  二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。  三、加酶标抗

ELISA有哪几种常用方法

也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂。双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,操作步骤如下:1) 将特异性抗体与固相载体联结。RF是一种自身抗体,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加

输血传播疾病标志物快速检测与职业暴露

【摘要】  目的 增强医护人员职业防护意识,探讨可能的防护方法,减少职业暴露的发生。方法 对7 089份急诊患者血清进行HBsAg、抗HCV、人类缺陷病毒抗体(抗HIV)、梅毒螺旋体特异性抗体(抗TP)快速和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。结果 7 089份急诊手术患者血清中,H

金标记免疫层析法联合ELISA法检测传染四项的临床应用

金标记免疫层析法联合ELISA法检测传染四项具有较高的符合率,说明在急诊或门诊检测中用金标法筛查是完全必要的。两种方法的联合应用保证了检测结果的准确性与及时性,避免了医疗纠纷的发生。        传染四项是指乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg),丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV),人类免疫缺陷病毒(H

血清阴性的抗磷脂综合征病例分析1

病例简介陈女士,23岁,因“停经39天,阴道流血1小时”于2020年4月5日就诊。现病史:末次月经:2020-2-26,行经如常.停经39天,阴道流血1小时就诊。2020年4月5日浙江省桐乡市妇幼保健院B超:早孕胚囊11*8*8mm,未见卵黄囊。血HCG:9116mIU/ml P:16.21ng/m

血清阴性的抗磷脂综合征病例分析2

病情总结患者既往有早发型子痫前期病史,在病史上符合抗磷脂综合征的临床诊断标准,此次妊娠早孕期有先兆流产症状,我们予地屈孕酮治疗,同时还完善了标准的抗磷脂抗体检测以及子宫动脉血流检查,但结果是标准的抗磷脂抗体检测阴性。虽然病史符合APS临床诊断标准,而实验室检查不支持,诊断不能成立。在检查中发现患者早

ELISA试验中设置阴性、阳性、空白对照的作用

一、ELISA试验有效性与三项对照什么是“有效性”(Validity)?要获得准确的检测结果“有效性”评价,就会关系到:为什么要设置“阴性、阳性和空白”等不可缺少的三项对照?要用什么样的物质担当“阴性、阳性和空白对照(品)”?这“三项对照”如何设置、需要设置几个孔位?获得的测定值如何“认可、取舍与计

人类免疫缺陷病毒抗体检测的介绍

  HIV-1/2抗体检测包括筛查试验和补充试验。HIV-1/2抗体筛查方法包括ELISA、化学发光或免疫荧光试验、快速试验(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒、免疫层析等)、简单试验(明胶颗粒凝集试验)等。补充试验方法包括抗体确证试验(免疫印迹法,条带/线性免疫试验和快速试验)和核酸试验(定性

HIV病毒(艾滋病病毒)的抗体检测

  HIV-1/2抗体检测包括筛查试验和补充试验。HIV-1/2抗体筛查方法包括ELISA、化学发光或免疫荧光试验、快速试验(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒、免疫层析等)、简单试验(明胶颗粒凝集试验)等。补充试验方法包括抗体确证试验(免疫印迹法,条带/线性免疫试验和快速试验)和核酸试验(定性

乙肝血清学标志物定量检测及其临床意义(2)

3.讨论    传统的ELISA 方法对乙肝两对半血清标志物定性测定, 只能判断其阴阳性, 无法得知其真正的浓度, 给临床诊断和治疗带来许多不便。而HBV 血清标志物定量检测能较为准确地反映其血清中的含量, 可以间接反映体内HBV 复制活跃程度, 对临床药物疗效评价具有重要意义。两对半定量检测结果的

输血前及术前感染性疾病标志物的检测与意义

  [摘  要] 目的:了解我院病人术前、输血前和产前由输血引起的经血传播的疾病如乙型肝炎、艾滋病、丙型肝炎、梅毒的情况。方法:对我院2004年度1月至12月需输血、手术或分娩的病人进行输血前、术前及产前检测共9项,即:甲型肝炎病毒抗体(抗HAVIgM)、乙型肝炎病毒标志物(HBsAg、HB

JCI:新型DNA技术用于靶向输送抗HIV药物

  近日,Wistar研究所的科学家利用基于合成DNA的技术来促进小动物和大动物模型中产生HIV广谱性中和抗体,为简单有效的下一代HIV预防和治疗方法提供了概念验证。这些结果在线发表在《Journal of Clinical Investigation》杂志上。  尽管抗逆转录病毒疗法在治疗HIV感

Nat-Commun:人工蛋白可以激发产生抗HIV抗体

  HIV-1表面有大量的糖类对HIV-1表面的蛋白质Env进行了伪装,使得HIV-1可以避开人体的体液免疫。而大多数HIV-1隔离群会由自然的序列突变产生“糖洞”,这些糖洞可能将其下的蛋白表面暴露给免疫系统。为了验证这个猜想,近日来自北卡罗来纳大学教堂山分校、宾州州立大学等单位的研究人员通过计算机

ELISA原理与分类

1. ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原 或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用 洗涤的方法使固相载体上形成