FCM对外周白细胞的免疫荧光分析(二)

(2)红细胞被溶解后再对白细胞染色:此方法的优点是可以了解被染白细胞的数量以及存活率。但由于有时有些标本比较敏感,溶解红细胞后,还要经过多个染色步骤,这样容易造成抗原的丧失。此法具体步骤如下:①室温下放入14ml氯化铵在15ml的试管里。②加入0.5~1ml全血,混合3~5min。③立即离心100~150×g,并用PBS洗2次。④白细胞计数,注意存活率应在90%以上。做成每毫升含5×10 6 白细胞悬浮液。将细胞分配到5ml的试管,每试管0.2ml,即1×10 6 个细胞。⑤荧光标记的单克隆抗体染色30min,4 ℃ ,避光。抗体浓度配制如前所述。⑥PBS洗3次后,用0.5%甲醛固定。方法如前。(3)用Ficoll—Hypaque 梯度离心法分离出单个核细胞:用此法可以分离骨髓细胞、淋巴结、扁桃体捣碎后的单细胞悬液等。血液标本应有抗凝剂。取血到分离不能超过6h。①抗凝全血4~20ml,用等量PBS或Hanks液稀释。②稀释血8或......阅读全文

对外经贸大学举办来华留学教育七十周年活动

5月16日,对外经济贸易大学来华留学教育七十周年暨第二十届国际青年文化节开幕式举行。活动现场。对外经济贸易大学供图本届国际青年文化节以“青春汇·五洲情/United Youth·Shared Friendship”为主题,分为廿年与共、天下大观、五彩汇聚、菁英荟萃、文化互鉴、寰宇沙龙六个板块,包含1

流式细胞仪技术(FCM)原理及应用

流式细胞术 (Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理,同时利用荧光染料,激光技术,单抗技术以及计算机

免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释

PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果

免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释

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免疫荧光的一抗核二抗分别用什么稀释

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免疫荧光非特异性染色的消除方法(二)

(二)透析法荧光素如FITC 分子可以通过半透膜,而蛋白质大分子不能透过,可将未与蛋白结合的荧光素透析除去。(1)将标记完毕的荧光蛋白液装入一透析袋或玻璃纸袋内,液面稍留空隙,紧扎。(2)浸入0.02mol/L PH 7.1~7.4的PBS中(悬于大于标记物体积约50~100倍的PBS内),在4℃中

免疫荧光定量分析仪

  免疫荧光定量分析仪--用以对人体血液和尿液中的各种分析物(CRP、PCT、NT-proBNP、cTnI等)含量进行快速准确的定量分析。光源采用大功率LED灯珠,采用窄带干涉滤光片对激发光和荧光进行滤光,采用内置运放的光电转换芯片OPT101进行荧光强度的检测。采用立迈胜一体化步进电机驱动,皮带传

异常白细胞形态检查分析

1.核象变化。    (1)核左移:说明外周血中幼稚或杆状核粒细胞增多,见于急性白血病,急性化脓性细菌感染,急性中毒,急性溶血。正常妊娠、缺氧及低血压也可出现细胞核左移现象。    (2)核右移:说明中性粒细胞核分叶过多,见于巨幼细胞性贫血,恶性贫血,化疗及炎症恢复期,遗传性中性粒细胞分叶过多,尿毒

流式细胞仪术检测各类免疫细胞的数量

流式细胞术(FCM)是一种高速度、高灵敏度、高精度和高分辨率的自动分析细胞的高新技术。主要用于定量分析单细胞表面、细胞内抗原和对分子水平的核酸含量的测定。试剂及材料1. FITC(或PE)标记的抗CD的mAb及正常小鼠IgG2. 细胞洗液:含2%BSA、0.1%NaN3 的PBS。3. 固定液:25

亨廷顿病新的检测方法:外周白细胞突变蛋白定量

最新一项研究发现测量血清中突变的亨廷顿蛋白(mHTT)的浓度或可提供一种方法明确已知的亨廷顿病(HD)携带者是否发病。 随着HD疾病的进展,mHTT在免疫细胞中产生的越多,因此这个方法也可能有利于HD进展的监测。这一研究结论发表于最近一期的《临床研究杂志》。与18例已经出现临床症状的HD患者相比,8

对外周血中人自然杀伤(NK)细胞群的表型表征分析

概述:制定 10 色免疫表型 Panel,以鉴定人自然杀伤细胞(NK)。用于量化 NK 细胞群子集的设门策略。介绍:NK 细胞属于固有免疫系统的一部分,并与肿瘤监测和病毒感染细胞的杀伤相关。最近,有研究表明,NK 细胞在自身免疫病方面也发挥着作用,其方式为调节适应性免疫反应,即 T 细胞,或

中国临床流式细胞分析的发展

王建中   北京大学第一医院/第一临床医学院检验科 流式细胞分析又称为流式细胞术(flow cytometry, FCM),是一种大量、高速分析单个细胞的多种生理、生化、免疫、遗传等特性的细胞分析技术,在临床医学中有着广泛的应用。FCM是一种综合运用了激光技术、电子技术、半导体技术、计算机技术、流体

流式细胞仪的简要介绍与注意事项

一、流式细胞仪的检测范围1.流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2.流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪

关于根尖周病的-病因分析

  根尖周病是指发生在牙根尖周围组织,如牙骨质、根尖周围的牙周膜和牙槽骨等的疾病。  1.感染  最常见的感染来自龋病、牙髓病,其次是牙周病通过根尖孔、侧副根管及牙本质小管而继发,血源性感染比较少见。  根尖周病感染的主要致病菌是以根尖微生物混合感染的结果,其中牙龈卟啉单胞菌是主要病源菌。细菌及细菌

关于肛周脓肿的病因分析

  本病属于肠道内细菌感染,“肠道菌”是源头,是致病的要素。“肛窦”是感染的入口,也是脓肿和成瘘后的内口。“肛腺”是感染的途径,它先发生感染,然后蔓延。“肛周间隙”是最终的发病部位。肠道菌进入肛窦致其发炎,堵塞肛腺开口,致肛腺液流出受阻,引起肛腺感染,感染通过肌间隙、淋巴管蔓延至肛周间隙,最后形成肛

流式细胞技术精彩回顾

分子生物学主要致力于对细胞中不同系统之间相互作用的理解,包括DNA,RNA和蛋白质生物合成之间的关系以及了解它们之间的相互作用是如何被调控的。而流式细胞仪是测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术。与传统的荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点。技术简介流式细胞术(Flow Cytom

“莫名”的白细胞计数危急值病例分析

危急值是指危及生命的检验结果,当这种检验 结果出现时,患者可能正处于生命危险的边缘,如 果得不到及时有效的治疗,有可能危及患者的安全 及生命[1]。 我院收治一例外伤患者,在成功手术后, 病情稳定。 但术后第 22 天突然一过性地出现白细 胞计数危急值。 现报告如下。 1 临床资料  病历摘要

血细胞分析白细胞的种类相关介绍

  白细胞有五种,按照体积从小到大是:淋巴细胞(人体自身产生的抗体),嗜碱粒细胞,中性粒细胞,单核细胞和嗜酸细胞。  白细胞计数增多见于急性感染、尿毒症、严重烧伤急性出血、组织损伤、大手术后白血病等。  白细胞计数减少见于伤寒及副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血急性粒细胞缺乏症、脾功能亢进,X线放射性核素

流式细胞仪的简要介绍(质量控制、样品制备)

一、流式细胞仪 的检测范围1、流式细胞仪 可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2、流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原 、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式

流式细胞仪的简要介绍

一、流式细胞仪的检测范围1、流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2、流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪

一体化细胞免疫荧光技术介绍(二)

一体化免疫荧光技术应用举例超过800篇参考文献证明了使用ibidi产品进行免疫荧光检测的优势。1. Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) cultured under flow conditions in μ-Slide I 0.4 Luer蓝

小鼠不同周龄与骨密度的关系(二)

2.胫骨被测部位不同,其骨密度有异同,在1.4 mm处,总骨密度和皮质骨密度随着周龄的增长逐渐增加,呈正相关,分别是r=0.614,P

人类白细胞抗原HLA与疾病的相关性(二)

  (二)HLA-I、Ⅱ类抗原与疾病的相关情况  Lilley(1964)在动物实验中证明小鼠Gross病毒所致白血病的发病与H-2相关(表 6-17),并提出对Gross型白血病易感的基因可能位于H-2I区内。在人类首先证实强直性脊椎炎(ankylosing spondylitis,AS)

流式细胞DNA分析注意事项

  流式细胞仪并非是完全自动化的仪器,准确的实验结果还需要准确的人工技术配合,所以标本制备需要规范,仪器本身亦需要质量控制。  (一) 流式细胞术免疫学检测的影响因素和质量控制  流式细胞术在免疫学中有着广泛的应用,其免疫荧光染色的标本制备非常重要,常常由于标本制备过程中出现人为非特异性荧光干扰(尤

流式细胞技术

流式细胞技术(flow cytometry,FCM)是一项集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学以及细胞免疫荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。概括地说,流式细胞技术就是对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数的、快速的、准确的定性分析和分选的技术。该技术的