荧光原位杂交（FISH）之一：实验原理
实验原理荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列，因而可以探针直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上定位。与传统的放射性标记原位杂交相比，荧光原位杂交具有快速、检测信号强、杂交特异性高和可以多重染色等特点，因此在分子细胞遗传学领域受到普遍关注。杂交所用的探针大致可以分类三类：1）染色体特异重复序列探针，例如α卫星、卫星I......阅读全文
－荧光原位杂交的技术原理
荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。 荧光原位杂交技术是一种
荧光原位杂交原理及步骤
荧光原位杂交/FISH技术服务 荧光原位杂交FISH的原理 ：荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行特异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸。由于DN
荧光原位杂交的技术原理
荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。荧光原位杂交技术是一种重
荧光原位杂交的技术原理
荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。 荧光原位杂交技术是一种
荧光原位杂交的技术原理
荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。荧光原位杂交技术是一种重
荧光原位杂交的技术原理
荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。荧光原位杂交技术是一种重
荧光原位杂交的原理简介
1974年Evans首次将染色体显带技术和染色体原位杂交联合应用,提高了定位的准确性。20世纪70年代后期人们开始探讨荧光标记的原位杂交,即FISH技术。1981年Harper成功地将单拷贝的DNA序列定位到G显带标本上,标志着染色体定位技术取得了重要进展。20世纪90年代,随着人类基因组计划的
荧光原位杂交技术的原理
生命科学的发展，生物技术的进步使我们对疾病本质的认识不断地深入，也使我们拥有更多新的治疗方法和药物应对疾病的威胁。如何准确有效地利用这些新的治疗方法和药物治愈疾病是我们迫切需要研究的内容。如何对疾病进行正确的分型和诊断却是上述工作的基础。只有全面地把握病情，并在此基础上进行准确的判断和分析，才能为病
荧光原位杂交的技术原理
荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。 荧光原位杂交技术是一种
多色荧光原位杂交实验
M-FISH 被成功地用于鉴别先天性疾病中的标记染色体或衍生染色体。近来该方法越来越多地被用于确认复杂核型中的多重染色体异常；在进行血液疾病的诊断时，M-FISH 在检测临界染色体重排中非常有用试剂、试剂盒DAPI 复染液乙醇SSC盐酸HClNP-40胰酶NaCl柠檬酸钠Spectra Vysion
荧光原位杂交实验方法
荧光原位杂交实验方法，实验原理荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色
多重端粒荧光原位杂交实验
实验方法原理实验材料永生化淋巴细胞株试剂、试剂盒青霉素谷氨酰胺胎牛血清植物血球凝集素胸苷秋水仙胺KCl甲醇冰乙酸柠檬酸钠SSC甘油生物素-16-dUTP地高辛-11- dUTP10 XdNTP 混合物仪器、耗材超净台细胞培养瓶Nunc 管培养基相差显微镜染色缸加热板装有Pinkel滤光片轮的CCD显
荧光原位杂交技术实验心得
荧光原位杂交技术（ fluorescence in situ Hybridization,FISH）是一种非放射性原位杂交方法，用特殊的荧光素标记核酸探针，在细胞或组织切片标本上进行杂交，以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。FISH 实验操作与用非荧光标记探针的原位杂交基本相似。在组
荧光原位杂交实验的步骤
探针变性：将探针在75℃恒温水浴中温育5min，立即置0℃，5～10min，使双链DNA探针变性。 切片置于65℃下过夜烘烤。 二甲苯中室温脱蜡2次，每次10分钟，随后浸入100%乙醇中5分钟。 切片依次室温置于100％乙醇、85％乙醇和70％乙醇中各两分钟复水。将组织切片室温浸入去离子水
多色荧光原位杂交实验
实验方法原理 试剂、试剂盒 DAPI 复染液 乙醇 SSC 盐酸 HCl
多色荧光原位杂交实验
实验方法原理 试剂、试剂盒 DAPI 复染液乙醇SSC盐酸HClNP-40胰酶NaCl柠檬酸钠Spectra Vysion探针M-FISH 探针实验步骤 一、染色体标本制备1.标本制备：不同标本来源的样品（血液、羊水、成纤维细胞培养物或骨髓）用其相应的标准程序进行制备。2.用相差显微镜找到合适的中期
荧光原位杂交的荧光原位杂交
荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子（reporter molecule）结
－荧光原位杂交的原理和意义
荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术，是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。
简述荧光原位杂交的技术原理
荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。 [2] 荧光原位
荧光原位杂交技术的技术原理
荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。 荧光原位杂交技术是一种
荧光原位杂交实验——基本方案
实验材料样品试剂、试剂盒DNA探针非同位素甲酰胺杂交混合液甲酰胺Triton X-100SSC仪器、耗材相差显微镜盖玻片水浴锅加湿盒滤光片荧光显微镜实验步骤1a. 石蜡切片或细胞的杂交：按石蜡切片或细胞的原位杂交实验的基本方案步骤1~7，对载玻片进行脱蜡、水化、 封闭和脱水处理。将标本晾干（或在干
多重端粒荧光原位杂交实验（一）
实验方法原理 实验材料 永生化淋巴细胞株试剂、试剂盒 青霉素谷氨酰胺胎牛血清植物血球凝集素胸苷秋水仙胺KCl甲醇冰乙酸柠檬酸钠SSC甘油生物素-16-dUTP地高辛-11- dUTP10 XdNTP 混合物仪器、耗材 超净台细胞培养瓶Nunc 管培养基相差显微镜染色缸加热板 装有Pinkel滤光片轮
多色纤维荧光原位杂交实验
实验方法原理试剂、试剂盒培养细胞悬液PBS晕圈溶液牛血清白蛋白乙醇醚10 X 切口缓冲液核苷酸混合物Bio-16-dUTP二硫苏糖醇酵母 RNA鲑鱼精 DNASSCTNT 溶液TNB 溶液仪器、耗材微型离心机Camag UV 盒 II荧光显微镜探针DNA实验步骤一、制备含 DNA 纤维的载玻片标本大
多重端粒荧光原位杂交实验（四）
（2）杂交后洗脱、抗体检测和复染1.准备封闭液和抗体溶液1〜3。2.振荡抗体溶液，在微型离心机中以最大转速离心10min。避光放置，如有必要可在室温中预温。3.加洗脱液I到干净的染色缸中，水浴中预温到72℃后调整pH至7.0。4．加洗脱液II到干净的染色缸中，室温（20〜25℃)放置。5.同时将用水
多重端粒荧光原位杂交实验（二）
（2）来自永生化淋巴细胞株1.增殖细胞，直至全培基到50mL。.2.收获细胞前的18〜24h，更换新鲜培养液。3.收获时，将20mL生长良好的细胞移到50mL离心管中。4.加200ΜL浓度为10μ×g/mL秋水酰胺，轻轻混匀。5.37℃条件下孵育50〜60min。6.180g离心5min。箱或水浴箱
多重端粒荧光原位杂交实验（三）
三、端粒克隆DNA的抽提1.准备含特定抗生素50μg/mL氨苄青霉素、35μg/mL卡那霉素或12.5μg/mL氯霉素）的LB平板。2.从-70℃取出甘油保存管，放在干冰上。3.取甘油保存的菌种在LB平板划线后，37℃细菌培养箱培养过夜。4.加100mL 2×YT培养基到500mL离心管中，按步骤1
荧光原位杂交技术原理和应用特点
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH）是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法，探针首先与某种介导分子（reporter molecule）结
荧光原位杂交中手动阅片和自动阅片大比拼
FISH是什么？是一条条欢快的鱼儿吗？红色、绿色、蓝色、黄色的亮点是鱼儿身上的五彩斑斓吗？我们这期讲得FISH可不是彩色的鱼儿Q那么，FISH到底是什么呢？FISH是荧光原位杂交（Fluorescence In Situ Hybridization， FISH），利用杂交的原理，用荧光染料标记探
肿瘤细胞的荧光免疫表型和－FISH－共分析实验
实验材料 正常鼠血清鼠单克隆抗地髙辛抗体鼠抗 FITC 抗体AMCA-亲和素FITC-亲和素生物素化山羊抗亲和素抗体Cy3 标记的亲和素Cy3 标记的山羊抗鼠抗体Cy3 标记的兔抗山羊抗体Cy3 标记的驴抗兔抗体Cy3 标记的兔抗鼠抗体 地高辛标记的山羊抗鼠抗FITC 标记的驴抗鼠抗体FIT
肿瘤细胞的荧光免疫表型和－FISH－共分析实验
染色体畸变通常在大多数血液肿瘤和各种实体瘤中检测到，在临床病理上，经常与判定肿瘤的直接形态和免疫表型特征有关。染色体畸变的检测为逐条诊断和肿瘤遗传分类奠定了基础。尤其在白血病和淋巴瘤中，许多主要的染色体畸变与疾病的临床分期有关。另外，在肿瘤预后过程中，还将发生其他染色体的畸变。因此，细胞遗传学结果对