westernblot跑胶的条带扩散混一起怎么回事

western blot 跑胶的条带扩散混一起原因很多但是可以肯定的是和SDS-PAGE的胶或者样品有关系具体来说,可能是蛋白上样体积太大,加样时溢出,可以减少上样量或者用更厚的胶或者是浓缩胶和分离胶之间有缝隙 总之要检查SDS-PAGE的过程,就可以解决western blot跑胶的条带扩散混一起的问题。......阅读全文

质粒pcr跑胶如何看结果

一般空载扩出片段较小,插入片段的质粒扩增片段较大,具体看载体及插入片段大小来判断是否为阳性克隆,及是否为目标片段。

WB上层胶怎么算跑好了

检测器检测。理论上,从普通培养基中收集分泌蛋白,此时对细胞生长条件的影响最小,是最佳的实验条件:但是这存在隐忧。因为含血清的培养基中含有非常丰富的BSA(牛血清白蛋白)之类的蛋白质,除非你进一步分离纯化,否则直接用这种样品去WB会有非常大的麻烦,尤其当你的蛋白在60-46kDa之间的时候:用“任何”

质粒pcr跑胶如何看结果

一般空载扩出片段较小,插入片段的质粒扩增片段较大,具体看载体及插入片段大小来判断是否为阳性克隆,及是否为目标片段。

western-blot跑不出条带,是什么原因

  转膜的问题,膜和胶之间有气泡等。  Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。  生物大分子印迹法实际上是凝胶电泳技

western-blot跑不出条带,是什么原因

  转膜的问题,膜和胶之间有气泡等。  Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。  生物大分子印迹法实际上是凝胶电泳技

DNA电泳跑不出条带啊!!什么原因

首先确定你得pcr体系有没有问题,比如酶或者buffer,dNTP,还有模板,如果你之前能p出来,基本引物和反应条件不会有什么问题,我建议你用实验室里别人的东西重复一下,,个人认为是模板或者酶的问题比较大

western-blot跑不出条带,是什么原因

  转膜的问题,膜和胶之间有气泡等。  Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。  生物大分子印迹法实际上是凝胶电泳技

跑western时不同浓度的分离胶对跑蛋白的影响

如果胶浓度不同,蛋白在其中迁移的速率就不一样,所以如果采用裁膜的方式,对于蛋白迁移的位置要事先有个预判。10%的胶,浓度高,迁移慢一些,如果都在相同位置裁,这里看到条带,6,8%的胶,膜需要裁得更靠下缘。或者把之前裁掉的膜的下半部分再拿来做做实验试试。当然,电泳时的各种因素也会有影响,但是如果其他配

跑western时不同浓度的分离胶对跑蛋白的影响

如果胶浓度不同,蛋白在其中迁移的速率就不一样,所以如果采用裁膜的方式,对于蛋白迁移的位置要事先有个预判。10%的胶,浓度高,迁移慢一些,如果都在相同位置裁,这里看到条带,6,8%的胶,膜需要裁得更靠下缘。或者把之前裁掉的膜的下半部分再拿来做做实验试试。当然,电泳时的各种因素也会有影响,但是如果其他配

电泳跑胶SDSPAGE的定义

聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由shapiro建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶

电泳跑胶SDSPAGE的定义

SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳详细资料如下:聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由s

跑胶的maker最少可以加多少

跑胶的maker最少可以加5微升。琼脂糖凝胶制作胶板从而让样品在胶板上产生电泳,简称“跑胶”。分子生物学中的跑胶会出现条带,是因为带电荷的生物大分子在电泳池里的运动速度决定于该分子的分子量,所以相同分子量的生物大分子就聚集在一起形成条带,进而实现了分离纯化生物大分子的目的。Maker跑出来的每条条带

跑胶时二聚体为什么很亮

在我印象里我们实验室PCR没出现过这种情况,也没有人专门研究这种情况,文章估计就更没有了=.=我提一点我自己的看法吧.你们做过没做过对照试验?如果没有的话建议做两个对照试验:一是PCR体系里加模板和酶,不加引物;二是PCR体系里加引物和酶,不加模板.这两个和正常实验组一起P一起跑胶,然后对照着看一下

生物实验中的”跑胶”是什么意思

琼脂糖凝胶制作胶板从而让样品在胶板上产生电泳,简称“跑胶”。分子生物学中的跑胶会出现条带,是因为带电荷的生物大分子在电泳池里的运动速度决定于该分子的分子量,所以相同分子量的生物大分子就聚集在一起形成条带,进而实现了分离纯化生物大分子的目的。

生物实验中的”跑胶”是什么意思

琼脂糖凝胶制作胶板从而让样品在胶板上产生电泳,简称“跑胶”。分子生物学中的跑胶会出现条带,是因为带电荷的生物大分子在电泳池里的运动速度决定于该分子的分子量,所以相同分子量的生物大分子就聚集在一起形成条带,进而实现了分离纯化生物大分子的目的。

蛋白样品在跑胶前要如何处理

  一.蛋白样品制备  之前和大家介绍过细胞和组织蛋白质的提取,当我们做WB的时候,需要对提取好的蛋白样品进行处理:在蛋白样品中加入SDS loading buffer 6X(蛋白上样缓冲液)稀释至1X(如蛋白样品有120ul,则加入SDS loading buffer 6X 600ul),混匀,7

跑RNA时,最下面出来的最亮条带是什么

跑RNA电泳时,最前面的是28s亚基,完整的应该有三条带,分别是5s,18s,28s。其中5S最暗,28S最亮!你的图显然是RNA降解比较厉害,5S和18S都降解了!楼上的两人纯粹胡扯!跑RNA 电泳时应该换成新的电泳液,

跑RNA时,最下面出来的最亮条带是什么

跑RNA电泳时,最前面的是28s亚基,完整的应该有三条带,分别是5s,18s,28s。其中5S最暗,28S最亮!跑RNA 电泳时应该换成新的电泳液,

跑RNA时,最下面出来的最亮条带是什么

跑RNA电泳时,最前面的是28s亚基,完整的应该有三条带,分别是5s,18s,28s。其中5S最暗,28S最亮!你的图显然是RNA降解比较厉害,5S和18S都降解了!楼上的两人纯粹胡扯!跑RNA 电泳时应该换成新的电泳液,

19—26KD蛋白条带用多少浓缩胶

26kd蛋白用15%的胶.因为跑50kDa以上的蛋白要用10%的。50kDa-15kDa左右的话用15%的,跑更小的蛋白(比如10左右或以下的),就要适当的把胶的浓度再提高,18%或20%都可以。所以26kd蛋白用15%的胶.如果以溴酚蓝跑到胶的底部为准,26kD在10%的由下往上1/4的地方,而1

请问PCR后的酶切跑胶的原理和目的

回收纯化得到目的条带,以用于下游的实验。

实时荧光定量PCR跑胶与普通PCR有区别吗

Real time PCR一般是不用跑胶的,普通PCR一般都需要通过跑胶来确定结果。但有时候Real time PCR完成后有些人为了更确定实验结果也会跑一下。 如果说区别的话,对于同一个基因来说Real time PCR为了提高扩增效率(往往循环数比较多),设计的引物都只能扩增出较小的片段,而同一

western-blot-跑胶时无法压成一条线

先看一下你的Mark 的条带是不是正常的,那就应该是你的制样有问题的,样品的盐浓度是不是太高了,样品是不是没有煮到位,如果mark都不正常,那就要考虑你的体系有没有问题,电极缓冲液的pH要一次到位,不能要HCl什么的调,否则条带扩散,SDS的量是不是对的,丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺有没有过期(胶凝了也跑

提取的总RNA跑完电泳条带总是很浅什么原因

跑变性胶,用专门的染色,一般180V,跑5分钟就好了,注意跑胶时的温度,时间过长,温度过高,RNA很容易降解

提取质粒还没加Rna酶为何电泳中不见Rna

一般来说,提取质粒所用的试剂盒已经加入了RNase,所以电泳跑胶不会出现RNA条带。即使是采用的人工方法提取,也不可避免的空气中,汗液,唾液等中丰富的RNase的降解。此外,按照你的问题来看,你应该是再提取质粒,提取质粒然后电泳渴望观察到RNA的条带,殊不知质粒分子一般较大,其所用的琼脂糖胶浓度一般

琼脂糖凝胶电泳跑完,DNA条带颜色浅怎么回事

琼脂糖凝胶电泳跑完,DNA条带颜色浅怎么回事原因有以下:1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;3、可能是原液浓

琼脂糖凝胶电泳跑完,DNA条带颜色浅怎么回事

原因有以下:1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度。3、可能是原液浓度太大造成的。4、可能DNA已降解。

琼脂糖电泳时,条带为何在点样孔中跑不出来

1)可能条带中(目的DNA)掺有基因组DNA(因基因组DNA分子量很大,不能从上样孔中出来)2)可能条带中(目的DNA)掺有蛋白质(因蛋白质与DNA一起,分子量很大,不能从上样孔中出来)总之,你目的DNA提取、分离的不纯,掺有基因组DNA或没有和蛋白质分离开,因此导致分子量大大加大,跑不出上样孔还有

琼脂糖凝胶电泳,做胶加EB目的

染色啊。你agarose胶电泳跑DNA,根据大小不同电泳速度不同,可是最后你需要看啊,怎么看呢?可见光下看不见DNA的。所以加EB也好,SYBRgreen也好,我们实验室用的genefinder也好,都是将DNA染色,用特殊的化学分子与DNA结合,并且在特殊波长的激发光下发射荧光,荧光强度与DNA含

琼脂糖凝胶电泳,做胶加EB目的

在搜搜上找的同一问题的答案:“染色啊。你agarose胶电泳跑DNA,根据大小不同电泳速度不同,可是最后你需要看啊,怎么看呢?可见光下看不见DNA的。所以加EB也好,SYBR green也好,我们实验室用的genefinder也好,都是将DNA染色,用特殊的化学分子与DNA结合,并且在特殊波长的激发