在质粒载体中进行平末端片段的克隆
1．分别设立两个反应，用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段，使它们能产生平末端。2．苯酚：氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3．分别用TE（pH 8.0）重新溶解纯化出的两种DNA沉淀，使终浓度为100 ng/ml。 假设1 bp相当于660 Da，计算DNA的终浓度（pmol/ml）。4．将载体DNA去磷酸化。5．按下表将适量的DNA转移至无菌的0.5 ml离心管： 管号 DNA A和E 载体1 [60fmol (~100ng)] B 外源插入片段2[60fmol (~10ng)] C和F 载体1（60fmol）和外源插入片段3（60fmol） D 线状载体（5’-磷酸化）（60fmol） G 环状载体[6......阅读全文
pOSIPTO载体的基本信息和质粒图谱
pOSIP-TO载体载体基本信息载体名称pOSIP-TO载体抗性Tetracycline载体长度6919 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源St-Pierre F, Cui L, Priest DG, Endy D, Dodd IB, Shearwin KE.拷贝数Hig
在质粒载体中进行平末端片段的克隆
1．分别设立两个反应，用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段，使它们能产生平末端。2．苯酚：氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3．分别用TE（pH 8.0）重新溶解纯化出的两种DNA沉淀，使终浓度为100 ng/ml。 假设1 bp相当于660 D
pSMART®－HCAmp载体的基本信息和质粒图谱
pSMART® HCAmp载体载体基本信息载体名称pSMART® HCAmp载体抗性Ampicillin载体长度1833 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpSMART® HCAmp载体质粒图谱
pRSET－B载体的基本信息和质粒图谱
pRSET B载体载体基本信息载体名称pRSET B载体抗性Ampicillin载体长度2887 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpRSET B载体质粒图谱
pBS－SK()载体的基本信息和质粒图谱
pBS SK(-)载体载体基本信息载体名称pBS SK(-)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS SK(-)载体质粒图谱
pBC－KS()载体的基本信息和质粒图谱
pBC KS(-)载体载体基本信息载体名称pBC KS(-)载体抗性Chloramphenicol载体长度3400 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Agilent Technologies拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引
pBluescript－KS()载体的基本信息和质粒图谱
pBluescript KS(-)载体载体基本信息载体名称pBluescript KS(-)载体抗性Ampicillin载体长度2958 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High
pSMART®－LCAmp载体的基本信息和质粒图谱
pSMART® LCAmp载体载体基本信息载体名称pSMART® LCAmp载体抗性Ampicillin载体长度2025 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpSMART® LCAmp载体质粒图谱
质粒载体和外源DNA的连接反应
实验概要掌握DNA体外连接的基本技能，了解连接反应的注意事项。实验原理DNA片段之间的连接是通过DNA连接酶的催化实现的。DNA连接酶催化具有平末端或互补粘性末端的DNA片段间相邻碱基通过3’,5’磷酸二酯键连接起来，该反为需能反应，通常需要加入ATP或NADH，DNA连接酶对粘性末端的连接效率要远
pBS－KS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBS KS(+)载体载体基本信息载体名称pBS KS(+)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS KS(+)载体质粒图谱
pBluescript－SK(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBluescript SK(+)载体载体基本信息载体名称pBluescript SK(+)载体抗性Ampicillin载体长度2958 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High
pGEM®T载体的基本信息和质粒图谱
pGEM®-T载体载体基本信息载体名称pGEM®-T载体抗性Ampicillin载体长度3000 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpGEM®-T载体质粒图谱
pSMART®－HCKan载体的基本信息和质粒图谱
pSMART® HCKan载体载体基本信息载体名称pSMART® HCKan载体抗性Kanamycin载体长度1788 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpSMART® HCKan载体质粒图谱
pBC－KS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBC KS(+)载体载体基本信息载体名称pBC KS(+)载体抗性Chloramphenicol载体长度3400 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Agilent Technologies拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引
pEZ™－BAC载体的基本信息和质粒图谱
pEZ™ BAC载体载体基本信息载体名称pEZ™ BAC载体抗性Chloramphenicol载体长度7260 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数Low copy numberpEZ™ BAC载体质粒图谱
pSMART®－LCKan载体的基本信息和质粒图谱
pSMART® LCKan载体载体基本信息载体名称pSMART® LCKan载体抗性Kanamycin载体长度1968 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpSMART® LCKan载体质粒图谱
用低拷贝质粒作表达载体有什么好处
楼主的qq暂时加不上，我记下了，改天加。以下是个人意见。因为高拷贝质粒稳定性低，而且给宿主细胞的压力大。低拷贝数的质粒DNA在宿主细胞分裂前只能复制1～2次，而多拷贝数质粒可以在细胞分裂前复制成10～200拷贝。高拷贝数的质粒称为松弛型质粒(relaxed plasmid)，独立于细菌细胞而自主复制
pBS－SK(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBS SK(+)载体载体基本信息载体名称pBS SK(+)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS SK(+)载体质粒图谱
在质粒载体中进行平末端片段的克隆
在质粒载体中进行平末端片段的克隆1．分别设立两个反应，用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段，使它们能产生平末端。2．苯酚：氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3．分别用TE（pH 8.0）重新溶解纯化出的两种DNA沉淀，使终浓度为100 ng/ml
质粒载体和外源DNA的连接反应
实验原理DNA片段之间的连接是通过DNA连接酶的催化实现的。DNA连接酶催化具有平末端或互补粘性末端的DNA片段间相邻碱基通过3’,5’磷酸二酯键连接起来，该反为需能反应，通常需要加入ATP或NADH，DNA连接酶对粘性末端的连接效率要远高于对平末端的连接效率。在基因基因工程实验中，最常用的来源于T
质粒载体对宿主生存并不是必需的
这点不同于线粒体，线粒体DNA也是环状双链分子，也有独立复制的调控，但线粒体的功能是细胞生存所必需的。线粒体是细胞的一部分，质粒也往往有其表型，其表现不是宿主生存所必需的，但也不妨碍宿主的生存。某些质粒携带的基因功能有利于宿主细胞的特定条件下生存，例如，细菌中许多天然的质粒带有抗药性基因，如编码
外源DNA和质粒载体的连接反应
外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链ＤＮＡ５'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成４个新的磷酸二酯链。但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化，则吸能形成２个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有２个单链切口，当杂本导
pRSET－C载体的基本信息和质粒图谱
pRSET C载体载体基本信息载体名称pRSET C载体抗性Ampicillin载体长度2895 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpRSET C载体质粒图谱
pBluescript－KS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBluescript KS(+)载体载体基本信息载体名称pBluescript KS(+)载体抗性Ampicillin载体长度2958 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High
pEXK载体－的基本信息和质粒图谱
pEX-K载体载体基本信息载体名称pEX-K载体抗性Kanamycin载体长度2507 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Eurofins Genomics筛选标记Neomycin/G418(Geneticin)拷贝数High copy numberpEX-K载体质粒图谱
LITMUS29载体的基本信息和质粒图谱
LITMUS29载体载体基本信息载体名称LITMUS29载体抗性Ampicillin载体长度2820 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷贝数High copy number5'引物M13
LITMUS38载体的基本信息和质粒图谱
LITMUS38载体载体基本信息载体名称LITMUS38载体抗性Ampicillin载体长度2814 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷贝数High copy number5'引物M13
pDNRDual载体的基本信息和质粒图谱
pDNR-Dual载体载体基本信息载体名称pDNR-Dual载体抗性Ampicillin载体长度4938 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Clontech拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 fwdpDNR-Dual
pRHA109载体的基本信息和质粒图谱
pRHA-109载体载体基本信息载体名称pRHA-109载体抗性Ampicillin载体长度4193 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Giacalone MJ, Gentile AM, Lovitt BT, Berkley NL, Gunderson CW,拷贝数Hig
pTrcHis2－A载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis2 A载体载体基本信息载体名称pTrcHis2 A载体抗性Ampicillin载体长度4406 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis2 A载体质粒图