蛋白质的盐析与透析实验

一、实验目的(1)掌握蛋白质盐析沉淀的基本原理与操作。(2)掌握蛋白质透析分离的基本操作。二、实验原理蛋白质是亲水胶体,借助水化膜和同性电荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白质带负电荷)相互排斥作用维持蛋白质胶体的稳定,向蛋白质溶液中加入中性盐可破坏这些稳定因素,使蛋白质沉淀析出,称为盐析。盐析所得到的蛋白质沉淀经透析或用水稀释以减低或除去盐后,蛋白质能再次溶解并恢复其天然结构和生物活性,称为透析。由于蛋白质分子量很大,其颗粒直径范围在1~100nm内,不能透过半透膜。选用合适孔径的半透膜可使小分子物质透过,而蛋白质不能透过半透膜,从而可以除去与蛋白质混合的中性盐及其他小分子物质。蛋白质盐析常用中性盐,如硫酸铵、硫酸钠、NaCl等。蛋白质经盐析沉淀后,需脱盐才能获得纯品。脱盐最常用的方法为透析法。由于蛋白质分子量较大,不能透过半透膜,而无机盐及其他低分子物质可以透过,故利用透析法可将盐析得到的蛋白质进行纯化。将蛋白质溶液装入透析袋内......阅读全文

透析相关低血压的防与治(一)

 透析治疗是各种肾病恶化进展至晚期肾衰竭阶段的主要治疗手段之一,然而透析的并发症往往会影响患者的透析质量甚至增加患者死亡风险。临床医生应该提高对透析并发症的认识,进一步提高透析质量。  透析相关低血压已成为影响透析患者生活质量和长期生存的主要并发症之一。透析相关低血压主要分为两种类型:一种是透析过程

透析相关低血压的防与治(二)

 个体化超滤  根据患者体内水钠潴留情况制定超滤量,准确评估干体重是制定个体化超滤的基础。同时使用在线血容量监测,医生可调节脱水速度,使其不超过患者对血容量变化的最大耐受程度。通过对红细胞压积或血浆蛋白浓度进行持续的光学检测可以实时监测血容量的变化,早期发现低血压,并进行干预。一般来讲,血容量每

透析的原理和透析疗法分类

透析(dialysis)是通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。透析疗法是使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法,一般可分为血液透析和腹膜透析两种。

盐析反应的优势

不会引起蛋白质变性,经透析去盐后,能得到保持生物活性的纯化蛋白质。

盐析结晶的原理

盐析结晶是指在盐溶液体系中,加入某种电解质盐析剂, 这种加入的盐析剂,其离子的水合作用比原溶液中其它盐较强, 它使溶液中自由水分子数减小,从而提高溶液中欲结晶物质在溶液中的有效浓度,使欲结晶物质在溶液中结晶析出, 这就是盐析结晶。 研究表明,水对阴、阳离子都有较强溶剂化作用,但对阳离子比阴离子有更大

盐析的原理介绍

破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素,从而使蛋白质发生沉淀 。1、破坏了水化层在高浓度的中性盐溶液中,由于盐离子亲水性比蛋白质强,与蛋白质胶粒争夺与水结合,破坏了蛋白质的水化层。 在高浓度的中性盐溶液中,由于蛋白质和盐离子对溶液中水分子都有吸引力,产生与水化合现象,但它们之间有竞争作用,当大量中性盐

盐析结晶原理介绍

  盐析结晶是指在盐溶液体系中,加入某种电解质盐析剂, 这种加入的盐析剂,其离子的水合作用比原溶液中其它盐较强, 它使溶液中自由水分子数减小,从而提高溶液中欲结晶物质在溶液中的有效浓度,使欲结晶物质在溶液中结晶析出, 这就是盐析结晶。   研究表明,水对阴、阳离子都有较强溶剂化作用,但对阳离子比阴离

盐析的作用原理

破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素,从而使蛋白质发生沉淀 。1、破坏了水化层在高浓度的中性盐溶液中,由于盐离子亲水性比蛋白质强,与蛋白质胶粒争夺与水结合,破坏了蛋白质的水化层。在高浓度的中性盐溶液中,由于蛋白质和盐离子对溶液中水分子都有吸引力,产生与水化合现象,但它们之间有竞争作用,当大量中性盐加

盐析技术的应用

可以把发黄的白衬衫放在5%食盐水中浸泡1小时,再慢慢搓干净;或将衣服浸于10%的浓盐水中,泡1-2小时,取出用清水漂洗干净。衣领部位的污渍可以单独加一些细盐粒轻轻搓洗效果更佳。应当注意的是衣服应当用凉水浸泡,切勿使用热水。

盐析结晶的原理

盐析结晶是指在盐溶液体系中,加入某种电解质盐析剂, 这种加入的盐析剂,其离子的水合作用比原溶液中其它盐较强, 它使溶液中自由水分子数减小,从而提高溶液中欲结晶物质在溶液中的有效浓度,使欲结晶物质在溶液中结晶析出, 这就是盐析结晶。研究表明,水对阴、阳离子都有较强溶剂化作用,但对阳离子比阴离子有更大的

盐析现象的原理

1.盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程.如:加浓(NH4)2SO4使蛋白质凝聚的过程;在乙酸的酯化反应中加入饱和碳酸钠溶液,降低乙酸乙酯溶解度,使其分层现象更明显的过程.2.向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种

分离方法之盐析

盐析少量的盐(如硫酸铵、硫酸钠、氯化铵等)能促进蛋白质的溶解。当向蛋白质中加入的盐溶液达到一定浓度时,反而使蛋白质的溶解度降低而从溶液中析出,这种作用称为盐析。蛋白质的盐析是一个可逆过程,盐析出的蛋白质稀释后仍能溶解,并不影响蛋白质的活性。采用多次盐析和溶解,可以分离提纯蛋白质。制肥皂(高级脂肪酸钠

盐析现象的原理

1.盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。如:加浓(NH4)2SO4使蛋白质凝聚的过程;在乙酸的酯化反应中加入饱和碳酸钠溶液,降低乙酸乙酯溶解度,使其分层现象更明显的过程。2.向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种

透析(2)

主要原理通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。适用范围使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法。常用于急性或慢性肾功能衰竭、药物或其他毒物在体内蓄积的情况。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。

透析(5)

饮食建议透析患者可以吃哪些水果呢?据了解,一般这类患者基本上没有忌口的水果。情况视各自病情来定。腹膜透析的患者是不予以限制的,如果出现低钾的情况,还要鼓励吃些含钾丰富的水果,如柑、橙等。无尿的透析患者和血液透析患者在非透析的时间要杜绝含钾的食物。下面给大家介绍几种含钾的食物。高钾蔬菜绿叶蔬菜(如菠菜

透析-(1)

透析(dialysis)是通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。透析疗法是使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法,一般可分为血液透析和腹膜透析两种。中文名:透析外文名:dialysis性 质:一种分离纯化技术透析分类:血液透析

透析(3)

主要疗法血液透析疗法将患者的血液和透析液同时引进透析器(两者的流动方向相反),利用透析器(人工肾)的半透膜,将血中蓄积的过多毒素和过多的水分清出体外,并补充碱基以纠正酸中毒,调整电解质紊乱,替代肾脏的排泄功能。血液透析器俗称人工肾,有空心纤维型、盘管型及平板型3种 。最常用的是空心纤维型 ,由1~1

透析(4)

费用血透就是指血液透析,也称之为人工肾、洗肾,是血液净化技术的一种。透析若按每月10次计算约需5-6千元,加上必须用的促红素等药物,每月约需0.8-1万元,每年至少约10-12万元。出现并发症时血液透析的费用将增加。腹膜透析的费用会要更高,在3-4万。当然,各地的医疗材料和药品价格不同。副作用(1)

什么是透析?透析的适用范围?

透析(dialysis)是通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法。常用于急性或慢性肾功能衰竭、药物或其他毒物在体内蓄积的情况。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。

微透析与质谱实现在线联动应用

  中科院东北先进制造与材料大型仪器区域中心近日组织专家,对长春应化所完成的中科院仪器设备功能开发技术创新项目“微透析—质谱在线联用接口研制及应用方法研究”进行了验收。专家组认为,该成果实现了活体动物实时动态取样和在线分析,为创新药物研究提供了方法学借鉴。   该项目实现了微透析取样信号与色谱/质

蛋白质除盐的方法有哪几种

蛋白质在用盐析沉淀分离后 需要将蛋白质中的盐除去 常用的办法是透析 即把蛋白质溶液装入秀析袋内(常用的是玻璃纸)用缓冲液进行透析 并不断的更换缓冲液 因透析所需时间较长 所以最好在低温中进行 此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐 所用的时间就比较短2、等电点沉淀法蛋白质在静电状态时颗

蛋白质除盐的方法有哪几种简述其原理?

蛋白质在用盐析沉淀分离后 需要将蛋白质中的盐除去 常用的办法是1、透析 即把蛋白质溶液装入秀析袋内(常用的是玻璃纸)用缓冲液进行透析 并不断的更换缓冲液 因透析所需时间较长 所以最好在低温中进行 此外也可用葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的办法除盐 所用的时间就比较短。2、等电点沉淀法蛋白质在静电状

盐析纸色谱法

盐析纸色谱法 salting-out paper chromatography 是用于蛋白质类分离的一种纸色谱法。在水流动相中加入盐类或有机溶剂如乙醇、丙酮等,使组分的溶解度减小,被纸吸附的作用加强,从而使各蛋白质组分的移动距离有较大差别,从而达到较好的分离。

盐析剂的相关介绍

  在中性配合萃取和离子缔合萃取体系中,使用盐析剂可提高被萃取组分的分配系数。盐析剂是一种不被萃取、不与被萃物结合,但与被萃物有相同的阴离子从而使分配系数显著提高的无机化合物。通常盐析剂的阳离子在盐析过程中,因在水溶液中有强烈的水合作用,能吸引大量自由水分子,降低水溶液中自由水分子浓度,可相对增加被

抗体的纯化:盐析法

精制抗体的方法很多。一般采用综合技术,避免蛋白变性。如分离IgG时,多结合使用盐析法与离子交换法,以求纯化。提取IgM的方法也很多,如应用凝胶过滤与制备电泳法,或离子交换与凝胶过滤等。一、原理蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度,以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用

盐析的概念和原理

盐析(salting out)是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质,溶解度又大,在蛋白质溶液中,一方面与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。常用的中性盐有硫酸铵、

盐析现象是什么

1、原理 :蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度,以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用中性盐加入蛋白质溶液,中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质,于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失。2、同时,中性盐加入蛋白质溶液后,由于离子强度发生改变,蛋白质表面电荷大量被中和,

盐析的概念和原理

盐析(salting out)是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质,溶解度又大,在蛋白质溶液中,一方面与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。

盐析的特点和原理

盐析(salting out)是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质,溶解度又大,在蛋白质溶液中,一方面与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。

抗体的纯化:盐析法

精制抗体的方法很多。一般采用综合技术,避免蛋白变性。如分离IgG时,多结合使用盐析法与离子交换法,以求纯化。提取IgM的方法也很多,如应用凝胶过滤与制备电泳法,或离子交换与凝胶过滤等。 一、原理 蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度,以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。